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比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用_19445

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比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用_19445比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用_19445 比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用 [标签:来源] 作者:陈红艳,王建华,耿淼,黄凯,严莉,杨新波,黄正明 【摘要】 目的 比对两种工艺六味地黄口服液制剂耐缺氧与免疫调节的作用。方法 以小鼠 为实验对象,分别以6、3、1.5 g/kg 3个剂量组的两种六味地黄口服液制剂给予小鼠灌胃14 d,通过耐缺氧、碳廓清试验,观察两种工艺六味地黄口服液对小鼠死亡时间、碳廓清指数及胸 腺、脾脏指数的影响。结果 各剂量组的各项检测结果与阴性对照组...

比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用_19445
比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用_19445 比对两种工艺的六味地黄口服液耐缺氧及免疫调节作用 [标签:来源] 作者:陈红艳,王建华,耿淼,黄凯,严莉,杨新波,黄正明 【摘要】 目的 比对两种工艺六味地黄口服液制剂耐缺氧与免疫调节的作用。方法 以小鼠 为实验对象,分别以6、3、1.5 g/kg 3个剂量组的两种六味地黄口服液制剂给予小鼠灌胃14 d,通过耐缺氧、碳廓清试验,观察两种工艺六味地黄口服液对小鼠死亡时间、碳廓清指数及胸 腺、脾脏指数的影响。结果 各剂量组的各项检测结果与阴性对照组比较,六味地黄口服液均 能延长小鼠存活时间,增强小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清能力。结论 两种工艺均具有增强小鼠 常规耐缺氧能力、免疫调节功能作用,且作用相当 【关键词】 六味地黄口服液;耐缺氧;免疫调节;小鼠 Contrast on the Effects of Two Kinds of Craft Prepared Liuwei Dihuang Oral Liquid on Anti- hypoxia and Immunoregulation in Mice CHEN Hong-yan, WANG Jian-hua, GENG Miao, et al Institute of Geriatrics, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China Abstract:Objective To contrast the effects of anti-hypoxia and immunoregulation of two kinds of craft prepared Liuwei Dihuang Oral Liquid. Method Mice were divided randomly into 7 groups:control group and two preparation craft Liuwei Dihuang Oral Liquid (6, 3, 1.5 g/kg). The animals were intragastric administration with drugs for 14 d. The dead time, carbon clearance rate and index of thymus and spleen in each groups were observed and measured. Results Compared with the control group, two craft prepared Liuwei Dihuang Oral Liquid significantly prolonged survival time and increased mono-macrophage capability of carbon clearance (P,0.05). Conclusion Liuwei Dihuang Oral Liquid has the effects of anti-hypoxia and immunoregulation, and two kinds of craft prepared Liuwei Dihuang Oral Liquid have no significant difference. Key words:Liuwei Dihuang Oral Liquid;anti-hypoxia;immunoregulation;mice 六味地黄口服液主要由熟地黄、山茱萸、山药、茯苓、牡丹皮等配伍而成,是治疗肾阴虚 的主要方剂,能滋阴补肾、养肝血、补脾虚。临床上主要用于糖尿病、肿瘤、血小板减少性紫 癜、系统性红斑狼疮等多种疾病的治疗,效果显著。近年来,人们对该方所具有的免疫调节、 抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、调节肾脏、保肝等多方面药理作用进行了研究[1]。为进一步优化制剂工艺,我们对原制剂工艺进行超滤膜处理后,观察其对药效的影响并与原制剂进行平行比较。 1 实验材料 1.1 动物 昆明种小白鼠,体重18,22 g,雌雄各半,购自军事医学科学院实验动物中心,合格证SCXK-(军)2002-001。 1.2 试药 原工艺六味地黄口服液,20 mL/瓶(含原药材9 g),批号051025;新工艺六味地黄口服液,20 mL/瓶(含原药材9 g),批号061113,新旧制剂均由北京长城制药厂提供。钠石灰(北京化工厂,批号20060627);印度墨汁(北京化学试剂公司,批号0070920);碳酸氢钠(北京化学试剂公司,批号0070123);肝素钠注射液(南京新百药业有限公司,批号061105);白凡士林(南京白云药业有限公司,批号20070505)。 1.3 仪器 酶联仪(型号TECAN A-5082,Sunrise Remote Touch Screen)、磨口瓶、秒 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 。 2 实验方法 2.1 六味地黄口服液剂量折算 原液每瓶9 g/20 mL,从成人(按60 kg)用量推算到小鼠用量,即以人体推荐日摄入量扩大40、20、10倍剂量折算成小鼠日摄入量,按照已知人用量(150 mg/kg),小鼠大剂量为150 mg/kg×40,6 g/kg,依此类推,中剂量3 g/kg,小剂量1.5 g/kg,每只小鼠按0.2 mL/10 g体重灌胃。 2.2 常压耐缺氧实验 取小鼠70只,随机分成7组,每组10只,分别为生理盐水对照组(NS),原六味地黄口服液大(YQD)、中(YQZ)、小(YQX)剂量组,及新六味地黄口服液大(XQD)、中(XQZ)、小(XQX)剂量组,小鼠连续灌胃14 d。于末次给药30 min后(平行操作),放入盛有15 g钠石灰的150 mL磨口瓶中(每瓶1只),加盖密封,瓶口涂凡士林,以呼吸停止为死亡指征,记录封瓶口到小鼠呼吸停止的时间为存活时间,并计算缺氧存活时间延长百分率。延长百分率,(给药组缺氧存活时间,正常组缺氧存活时间)/正常组缺氧存活时间×100%。 2.3 单核-巨噬细胞功能实验(碳廓清实验) 取小鼠70只, 雌雄各半,随机分成7组(NS、YQD、YQZ、YQX、XQD、XQZ、XQX组),每组10只。连续灌胃14 d。末次给药24 h后,小鼠按每10 g体重尾静脉注射1?9稀释的印度墨汁0.1 mL(生理盐水稀释)。注入后立即计时,分别于注射后第5、25 min用毛细吸管分别从 眶后静脉丛取血25 μL,溶于2 mL 0.1% Na2CO3溶液中摇匀,置于722分光光度计600 nm下比色,测光密度(OD值)。小鼠颈椎脱臼致死,并取肝、脾、胸腺进行称重,计算K,(OD1,OD2)/(t2,t1),α,3×体重/(肝重,脾重)。胸腺和脾脏称重后计算指数,胸腺指数,胸腺重量(mg)/小鼠重量(g),脾脏指数,脾脏重量(mg)/小鼠重量(g)。 2.4 统计学方法 所有数据以x?sx?s表示,采用SPSS11.0软件处理,组间比较采用方差 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 。 3 结果 (见表1,表3)表1 两种六味地黄口服液制剂对小鼠缺氧耐力的影响(略)注:与对照组比较,*P,0.05,**P,0.01(下同) 表2 两种六味地黄口服液制剂对小鼠免疫调节的影响(略)表3 两种六味地黄口服液制剂对小鼠胸腺和脾脏指数的影响(略) 4 讨论 采用超滤膜技术改进六味地黄注射液原提取工艺(水提醇沉法),药材水提后直接通过超滤膜过滤,浓缩,得有效部位,用高效液相色谱法进行定性、定量、质控分析,再对比过膜前后药物对小鼠常规耐缺氧、单核-巨噬细胞功能等的影响。两种工艺在药理上有何差异,将决定该新工艺是否能广泛使用,因此,开展对这种工艺的对比研究十分重要和必要。该实验从药理学的角度,考察优化提取工艺后有无药效学差异,为药厂的批量生产、生产周期的缩短、成本的降低等提供 实验室 17025实验室iso17025实验室认可实验室检查项目微生物实验室标识重点实验室计划 依据。本实验从常规耐缺氧以及对单核-巨噬细胞功能的影响两方面,进行了初步研究。 缺氧是一种紧张性刺激,可引起机体产生各种应激性反应,如影响机体各种代谢和机体的氧化供能,最终会导致机体心、脑等重要器官、组织供氧不足而死亡[2]。本研究显示,与对照组相比,两种工艺在3个不同剂量水平均可使耐缺氧实验中小鼠的存活时间显著延长,表明两种工艺均有增强小鼠常压耐缺氧能力。 单核吞噬细胞是调节机体免疫反应的重要活性细胞,他们可通过分泌抗体、分泌细胞因子、细胞毒作用、吞噬作用等来抑制和杀伤靶细胞[3]。印度墨汁是一种较强的抗原性异物,单核-巨噬细胞具有吞噬体内抗原性异物的功能,是体内一种重要的非特异性免疫细胞[4]。通过小鼠尾静脉注射墨汁的方式,可观察单核巨噬细胞对碳的清除能力,来反映吞噬细胞活力。本研究显示,与对照组相比,两种工艺的3个不同剂量水平在单核-巨噬细胞功能碳廓清实验中,均能明显增加小鼠碳粒廓清K值,表明两种工艺均具有促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清吞噬功能、提高吞噬细胞活力的作用。 胸腺为初级淋巴器官,游走的造血干细胞进入胸腺原基,分化增殖成T淋巴细胞,与细胞免疫有关[4]。脾脏最重要的功能是免疫功能,脾脏所具有的多种免疫细胞及免疫因子间相互作用、相互制约,既可以通过吞噬作用完成机体的非特异性免疫功能,又可以通过T细胞、B细胞介导的细胞免疫和体液免疫发挥特异性免疫功能。两器官结构的正常与否直接影响机体的免疫功能,胸腺指数与脾脏指数是反映机体胸腺和脾脏免疫功能的重要指征之一,其数值高低的变化可以反映机体免疫功能的状态。本实验结果表明,两种工艺制剂对健康小鼠的免疫器 官并无影响。 综上所述,本研究提示,两种六味地黄口服液均可增强小鼠常压耐缺氧能力及增强单核-巨噬细胞的吞噬功能,通过调节机体的免疫功能,增强机体的抵抗作用。两种工艺的制剂作用相当,新提取制备工艺经优化处理后,未影响其耐缺氧和免疫调节药效方面的作用。 【参考文献】 1] 郑建普,曹永孝.六味地黄方药理作用研究纂要[J].中医药学报,2003, 21(10):1700,1702. [2] 陈玉满,陈 江,毛光明,等.高山红景天的耐缺氧作用实验研究[J].中国卫生检验杂志,2007,17(8):1494,1496. [3] 肖子曾,戴 冰,黄开颜.六味地黄汤颗粒剂配方与汤药煎剂药理作用的对比研究[J].中国中医药科技,2004,11(1):31,32. [4] 陈欣然,杨月明,王敏伟.复方灵芝胶囊对小鼠的免疫调节作用[J].沈阳药科大学学报,2007,24(8):504,507.
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