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离子交换色谱[讲解].doc

离子交换色谱[讲解]

就在一念之间失去你
2017-10-06 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《离子交换色谱[讲解]doc》,可适用于综合领域

离子交换色谱讲解离子交换色谱离子交换色谱法离子交换色谱法(ionexchangechromatography,IEC)离子色谱分析法出现在世纪年代年代迅速发展起来以无机、特别是无机阴离子混合物为主要分析对象。离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。现在它不仅适用于无机离子混合物的分离亦可用于有机物的分离例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子因此应用范围较广。离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换形成离子交换平衡从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心并随着流动相的运动而运动最终实现分离。离子交换色谱的分配系数又叫做选择系数其表达式为:Ks=frac{RX^}{X^}其中RX表示与离子交换树脂活性中心结合的离子浓度X表示游离于流动相中的离子浓度。一、分离原理离子交换色谱(ionexchangechromatographyIEC)以离子交换树脂作为固定相树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。阳离子交换:阴离子交换:式中",,"表示在固定相上Kxy和Kzm是交换反应的平衡常数Z和X代表被分析的组分离子。M和Y表示树脂上可交换的离子团。离子交换反应的平衡常数分别为:阳离子交换:阴离子交换:平衡常数K值越大表示组分的离子与离子交换树脂的相互作用越强。由于不同的物质在溶剂中离解后对离子交换中心具有不同的亲合力因此具有不同的平衡常数。亲合力大的在柱中的停留时间长具有高的保留值。二、固定相离子交换色谱常用的固定相为离子交换树脂。目前常用的离子交换树脂分为三种形式一是常见的纯离子交换树脂。第二种是玻璃珠等硬芯子表面涂一层树脂薄层构成的表面层离子交换树脂第三种为大孔径网络型树脂。它们各有特点例如第二种树脂有很高的柱效但它的柱容量不大第三种树脂适用于非水溶液中物质的分离因为它们的孔径和内表面积大不需要用水溶胀便可满意地使用。典型的离子交换树脂是由苯乙烯和二乙烯基苯交联共聚而成:其中二乙烯基苯起了交联和加牢整个构型的作用其含量决定了树脂交联度大小。交联度一般控制在,,,范围内高度交联的树脂较硬而且脆也较渗透但选择性较好。在基体网状结构上引入各种不同酸碱基团作为可交换的离于基团。按结合的基团不同离子交换树脂可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。阳离子交换树脂上具有与样品中阳离子交换的基团。阳离子交换树脂又可分为强酸性和弱酸性树脂。强酸性阳离子交换树脂所带的基团为磷酸基(一)其中和有机聚合物牢固结合形成固定部分是可流动的能为其他阳离子所交换的离子。阴离子交换树脂具有与样品中阴离子交换的基团。阴离子交换树脂也可分为强碱性和弱碱性树脂。阴离子交换树脂属强碱性它是由有机聚合物骨架和一季胺碱基团所组成它带有正电荷。而与相反的是可以移动的部分它能被其它阴离子所交换。三、流动相离子交换色谱的流动相最常使用水缓冲溶液有时也使用有机溶剂如甲醇或乙醇同水缓冲溶液混合使用以提供特殊的选择性并改善样品的溶解度。离子交换色谱所用的缓冲液通常用下列化合物配制:钠、钾、被的柠檬酸盐磷酸盐甲酸盐与其相应的酸混合成酸性缓冲液或氢氧化钠混合成碱性缓冲液等。四、应用离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离而且广泛地应用于有机和生物物质如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。

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