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植物组织培养实习报告.doc

植物组织培养实习报告

谢闲鸥
2019-05-07 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《植物组织培养实习报告doc》,可适用于农林牧渔领域

种 苗 学(实习报告)学院班级:  集贤学院创新实验班  学  号:          姓  名:      马晶晶       指导老师:       杨海芸      年月日种苗学实习报告摘要:此次种苗学实习的主要内容有:了解实验室的规章制度和管理办法以及设备设施、MS培养基的配置以及麻竹芽无性繁殖初代体系建立的具体操作步骤、容器苗移植的具体过程。要求掌握组织培养的操作要求了解快速繁殖体系建立的指导思想。通过本次实习同学们接触到很多在课堂上学不到的东西对植物组织培养的生产发展及经营措施有了切实的认识。关键词:组织培养移植经营 前言植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞原生质体等通过无菌操作在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养愈伤组织再经过再分化形成再生植物。植物组织培养的特点是:、培养条件可以人为控制组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响且条件均一对植物生长极为有利便于稳定地进行周年培养生产。、生长周期短繁殖率高组培是由于人为控制培养条件根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件因此生长较快。另外植株也比较小往往天为一个周期。所以虽然组培需要一定设备及能源消耗但由于植物材料能按几何级数繁殖生产故总体来说成本低廉且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。、管理方便利于工厂化生产和自动化控制植物组织培养是在一定的场所和环境下人为提供一定的温度、光照、湿度、营养、激素等条件极利于高度集约化和高密度工厂化生产也利于自动化控制生产。它是未来农业工厂化育苗的发展方向。它与盆栽、田间栽培等相比省去了中耕除草、浇水施肥、防治病虫等一系列繁杂劳动可以大大节省人力、物力及田间种植所需要的土地。实习目的与意义、掌握基本培养基的配置及灭菌处理。 、掌握离体组织的采集及注意方法 。、掌握组织培养和容器苗移植的操作技术。、掌握无性繁殖材料管理的注意事项 。实验过程与内容MS培养基的配置母液的配置MS培养基含有近种营养成分为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量可将培养基中的各种成分按原量的倍或倍分别称量配成浓缩液这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时取其总量的( mL)或( mL)加水稀释制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出供配制时使用。  各种母液配完后分别用玻璃瓶贮存并且贴上标签注明母液号、配制倍数、日期等保存在冰箱的冷藏室中。 本次实习为节约时间和试机采用实验室已配好储存的母液进行实验。配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量:各种母液分别mL与各种母液一起放入烧杯中。 边加母液边用磁力搅拌器搅拌使各种母液混合均匀。配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时应在量取各种母液之前轻轻摇动盛放母液的瓶子如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染应立即淘汰这种母液重新进行配制②用量筒或移液管量取培养基母液之前必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗次③量取母液时最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上量取种划掉种以免出错。调pH 将锥形瓶置于磁力搅拌机上边搅拌边用pH计测量 溶液的pH值。若pH偏低则用滴管逐滴加入KOH溶液最终使溶液pH为并定容到mL。溶化琼脂及高压灭菌用天平分别称取琼脂g加入锥形瓶中并将锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕盖上锅盖。在 ℃下灭菌 min。 灭菌后取出锥形瓶。培养基的分装 及灭菌溶化的培养基应该趁热分装。分装时将锥形瓶置于磁力搅拌机上边搅拌边分装。先将要用的玻璃试管准备好设置好分装仪进行分装。注意:在进行分装之前要先对分装仪进行预热避免培养基堵住胶管造成浪费。分装完成后盖好盖子再次灭菌灭菌的步骤同上。初代繁殖体系的建立麻竹繁殖材料的获得本实验所用麻竹材料采于浙江农林大学温室。采集较长带节的幼嫩麻竹枝所采纸条应插入水中保持其生活力。将采集的枝条截成带节的小节长度约cm。剥去叶子于托叶鞘尽量不要伤及幼芽。然后将幼芽置于流水中冲洗小时以除去附着的微生物等。就爱那个冲洗完毕的幼芽放入酒精中浸泡秒然后置于次氯酸钠中抽滤分钟。置于超净工作台上用无菌水冲洗~遍备用。初代培养打开超净工作台用酒精擦拭两遍将实验用的镊子、剪刀放入高温锅灭菌备用。此时所有放入超净工作台的东西都要用酒精消毒。用镊子夹取置于无菌水中的幼芽剪成cm长度然后斜插入培养基中。注意要使繁殖材料的生态学上端朝上使繁殖材料能够正常生长。所有的繁殖材料都插如培养基后在试管外注明材料的拉丁学名、时间、操作者、代数等信息。最后将试管置于培养室培养。容器苗的移植容器苗的驯化将待移植的容器苗从培养室移入驯化室一周左右再进行移植。容器苗驯化的目的在于提高试管苗对外界环境条件的适应性提高其光合作用的能力促使试管苗健壮最终达到提高试管苗的移栽成活率。驯化的原则应从温度、湿度、光照及有无菌态等环境要素进行驯化开始数天内应和培养时的环境条件相似驯化后期则要与预计的栽培条件相似从而达到逐步适应的目的。移苗首先配置移栽基质用珍珠岩蛭石草炭土或腐殖土比例为::.也可用砂子:草炭土或腐殖土为:。这些介质在使用前应高压灭菌。再加水搅拌至一定湿度用手捏感觉有水但水不会溢出来的程度为适宜。接着从试管中取出发根的小苗用自来水洗掉根部粘着的培养基要全部除去以防残留培养基滋生杂菌。但要轻轻除去应避免造成伤根。栽植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔然后将小苗插入四分之一土注意幼苗较嫩防止弄伤栽后把苗周围基质压实栽前基质要浇透水。栽后轻浇薄水。再将苗移人高湿度的环境中。保证空气湿度达%以上。一周后可在开一个小口降低湿度让幼苗适应外界环境。逐渐增大开口直至幼苗完全适应外界环境并正常生长。小结与感想本次实习我接触到向往已久的组织培养技术原本认为很高大上的技术在老师的细心指导下也逐渐掌握要领。这次我们进行了麻竹初代繁殖体系的建立和容器苗的移植两项重要的工作。实验的过程很繁琐每一步都至关重要每一步都需要我们付出十二分的细心和耐心才能获得最后的成功。在配置培养基时需要加入的母液种类繁多我们的细心远远不够每加入一种母液就核对一种母液的细心制度让我们深深折服。另外培养基的灭菌至关重要这决定了之后工作的绝对成败。通过配置培养基这一基本但是至关重要的工作我们学会了付出细心用耐心收获成果。另外理论与实践是不可分割的在理论学习的同时我们还需要认真的进行实验。在现代农业中组织培养有着极其重要的作用因此更需要我们在实验中认真的学习组培的技术。 根据细胞的全能性原理以及组培原理将离体的植物器官原生质体培养在人工配制的培养基中给与适当的条件使其长成人类所需要的组织、器官和完整的植株的过程。而自然下的植株是含有病毒的这样会导致经济作物大量减产为了克服这一困难在组织培养前对外植体进行脱毒这不仅克服了经济作物的减产还提高了产量大大提高了经济效益。并切植物组织培养实现了高价植物种类的工厂化生产为这些紧缺植物和植物体内各物质特别是次生代谢物的提取提供了更多的材料。 在本次实验中我发现自身在做实验时还存在很多的不足在理论知识方面也有很多的欠缺。这就要求我在以后的学习中更加努力认真。同时也感谢团队同学的包容与互助以及老师的指导和教导。

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