血液凝固和影响血液凝固的因素修改版
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设计
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性实验)
院办:基础医学院二办
班级:2013级医学影像系2班
成员:杨智慧(201326010220)
代学燕(201326010215)
王艳(201326010225)
黄驰(201326010216)
余露(201326010229)
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血液凝固和影响血液凝固的因素
一、实验目的
1、通过测定某些条件下的血液凝固时间，加深理解影响血液凝固的因素。 2、了解内源性凝血和外源性凝血途径，影响血液凝固的因素。
3、熟练使用动物麻醉、分离颈总动脉、动脉插管及颈动脉放血取血。
二、实验原理
机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面，两者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢失的关键。
血液从流动的液体状态变成不能流动的胶冻状凝块的过程即为血液凝固(blood coagulation)。这是由凝血因子参与的一系列蛋白质有限水解的过程。血液凝固的关键过程是血浆的纤维蛋白原转变为不溶的纤维蛋白。而抗凝系统则包括抗凝因子和纤溶系统。
内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中(如图1所示);外源性凝血是指在组织因子参与下的血凝过程。本实验采用动物颈动脉放血取血，血液几乎未与组织因子接触。因此，凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。肺组织浸润液中含丰富的组织因子，加入试管观察外源性凝血系统的作用。
(图1)
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三、实验材料
家兔;石蜡油，冰块，32g/L枸橼酸钠，38g/L草酸钾，3%戊巴比妥钠;试管，动脉夹，动脉插管，恒温水浴槽，温度计，秒表，棉花，肺组织浸液。 四、实验方法
1.用3%戊巴比妥钠按1ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将兔仰卧固定于手术台上。
2.切开颈部皮肤后，分离一侧颈总动脉，头端用线结扎，向心端夹上动脉夹。用剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口，向心方向插入动脉插管，用线结扎固定。以备取血之用。
3.取试管8支，编号。按下实验条件准备完毕。
试管 编号 实验条件 凝血时间
1 无(作为空白对照，室温) 18min
2 粗糙面 放少许棉花 7min
粗糙面 3 石蜡油涂管壁内 60min
4 滴加2mlNaCl 42min
5-1 置于冰水槽中水浴 不凝 2ml血液 5-2 置于10?水中水浴 40min
5-3 置于20?水中水浴 20min
6-1 置于37?水中水浴 10min
温度 6-2 置于50?水中水浴 21min
6-3 置于60?水中水浴 60min
6-4 置于70?水中水浴 不凝
6-5 置于80?水中水浴 不凝
6-6 置于90?水中水浴 不凝
7 加32g/L枸橼酸钠3滴(加血后摇50min
匀)
8 加38g/L草酸钾3滴(加血后摇匀) 54min
9 加肺组织浸液0.1ml(加血后摇匀) 15s
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烧杯放血10ml 10 放血时用竹签不断搅动，2~3min后血液不凝，竹签
用水冲洗竹签后观察 上有丝状纤维 烧杯放血10ml 11 对照 血液凝固
4.立即用秒表计时，每隔15s将试管倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状时，记下所历时间。
5.实验观察:记录各管的凝血时间并进行对比。
五、实验结果: 如上表所示。
六、实验讨论:
1、室温:基准时间，一号及其他管血液凝固，是因为血液与管壁接触，启动了内源性凝血过程。
、试管内有少量棉花:比1时间短，血液和物体表面接触面越粗糙，凝血越快。 2
3、试管壁涂有石蜡油:比1时间长，血液和物体表面接触面越光滑，凝血越慢。 4、生理盐水2ml:比1时间长，因为血液被稀释了，凝固时间加长。 5、试管5系列:比1时间长，关于凝血的生物酶的在低温下活性低。 6、试管6系列:37?试管凝固比1时间短，相较于室温，37?更有利于酶发挥生物活性;但是随着温度的增加，凝固时间逐渐增加甚至出现不凝，是由于酶活性被破坏。
7、加肝素8单位:比1时间长，肝素是抗凝剂，能增强抗凝血酶?与凝血酶的亲和力，加速凝血酶失活;抑制血小板粘附、聚集。
8、加草酸钾3滴:比1时间长，草酸钾是抗凝剂，与血中钙离子结合形成难解离的草酸钙沉淀，钙离子是凝血过程中所需的物质之一，减少钙离子，抑制凝血过程。
9、肺组织浸液0.1ml:比1时间短，肺组织浸液含组织因子，启动外源性凝血过程，加速血液凝固。
10、竹丝搅拌影响血液凝固,就是用竹丝表面(毛糙)把因子 I( 纤维蛋白原 )迅速的变成纤维蛋白并卷走，失去纤维蛋白，血液的凝血过程打断，血液就不会凝固了。
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七、实验结论:
实验项目 结果
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
对照组 血液接触玻璃管壁,启动内源性凝血途径
棉 花 接触面粗糙，促进Plt激活;促进内源性凝血;网络血细胞加速凝血
石 蜡 接触面光滑，不利于Plt的激活;不利于内源性凝血的启动
温水浴 提高凝血过程中酶的活性，但温度过高时将破坏酶活性
冰水浴 酶的活性丧失
枸橼酸钠 加强血液中抗凝血酶?活性,发挥抗凝作用
草酸钾 与血液中Ca++结合生成草酸钙沉淀,去除Ca++，抑制血凝
组织因子 提供组织因子，激活凝血因子?,启动外源性凝血
毛刷搅拌 毛刷上有纤维蛋白，烧杯中血液不凝固。去除纤维蛋白,抑制血凝
八、注意事项
1、注意麻醉时的剂量，以防麻醉过度;
2、每支试管口径大小及采血量要尽量一致;
3、判定血凝的标准要力求一致。
九、参考文献
1、朱大年.王庭槐.生理学(第八版)人民卫生出版社，2013.3 2、 王卓强.徐震.刘秀珍.范里莉.体外不同程度生理盐水稀释血液对凝血功能的影响[J].解放军医学杂志，2008,33(10):—1268—1271 、冯志强.秦大莲.邹平.张英.医学机能学实验分册(第二版)人民卫生出版社3
2008.8
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