花椒干腐病的寄主抗病性与病原菌致病性分化

花椒干腐病的寄主抗病性与病原菌致病性分化 花椒干腐病的寄主抗病性与病原菌致病性 分化 西北林学院2010,25(6):115,118 JournalofNorthwestForestryUniversity 花椒干腐病的寄主抗病性与病原菌致病性分化 曹支敏,明玉玲,陈丹,张浩 (西北农林科技大学林学院,陕西杨陵712100) 摘要:对陕西省凤县,耀县,富平和韩城的花椒干腐病病情调查 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,同一地方的不同花椒品种之 间的发病程度存在明显差异,豆椒,大红袍病情较重,而米椒发病较轻.在PDA培养基上,凤县菌 系(Ffz)和耀县茵系(Fyx)茵落呈绒毛状,紫红色,生长速度明显快于富平茵系(Ffp)和韩城茵系 (Fhc),并以三隔膜镰刀型分生孢子多见.Vfp茵落独特,呈短绒毛至绢毛状,薄或稀疏,桔黄色, 其分生孢子较其它茵系产生时间早,形态大,以4,5隔膜孢子多见.Fhc的茵落特征虽然与Ffx, Fyx茵系基本相似,但在相同条件下不易产孢或产生孢子较小.用各茵系茵丝体对大红袍花椒茎 干刺伤接种,结果表明,接种F后的病斑扩展时间早,速度快,Ffp的致病性明显强于F和 ,后两者对大红袍的致病性相近.试验证明,花椒干腐病菌存在着培养性状Fyx茵系 和致病性 分化. 关键词:花椒;抗病性;干腐病茵(Fusariumsumbucinum);培养性状;致病性 中图分类号:$763.1文献标志码:A文章编号:1001-7461(2O1O)06-0115-04 ResistanceofPricklyAshtoStemRotandPathogenicity DifferentiationofFusariumsumbucinum CAOZhi—rain,MINGYu-ling,CHENDan,ZHANGHao (CollegeofForestry,NorthwestA&FUniversitytYangling,Shaanxi712100.China) Abstract:Situationsoftheresistanceofpricklyashplantstostemrotandpathogenicitydifferentiation0f thepathogenicfungusFusariumsumbucinumwereinvestigatedintheareasofFengxian,Yaoxian,Fuping andHanchengwithinShaanxiProvince.Theresultsshowedthatthedifferentvarietiesofpricklyashin sameplacebehaveddistinctlydifferentresistancestothefungus."Doujiao"and"Dahongpao"wereseri— ouslyinfected,but"Mijiao"hadlowerincidence.OnthePDAmedium,thecoloniesofF.sumbucinum strainsFfx(fromFengxian)andFyx(fromYaoxian)showedvilliform,purpleandfastergrowingrate thanthestrainsFip(fromFuping)andFhc(fromHancheng),with3-septateconidiamostly.Thecolony ofFfpshowedunique,shortvilloustosilkhairy,thinorsparse,orange,producingearlysporeswith4, 5septa.largerthanotherstrains.AlthoughthecolonycharacteristicsofthestrainFhcweresimilarto F{andFyx,itwasdifficulttoproducesporesorconidiasignificantlysmallerunderthesameconditions. AfterinoculatingthemyceliaofthesestrainsonthestemoftheDahongpao,strainFfpexhibitedearlier andmorerapidlesionexpansion,demonstratinghigherpathogenicitythanstrainsVfzandFyx.Thetests alsoprovedthattherewerecolonycharacteristicandpathogenictypedifferentiationofstemrotfungusF. sumbucinum. Keywords:pricklyash;resistance;Fusariumsumbucinum;colonycharacteristic;pathogeni city 花椒千腐病(亦称流胶病)是伴随吉丁虫为害而发生的一种枝干病害,病斑多局限 于树干基部,严重 收稿日期:2010—01—08俸回日期:2010-04一l1 基金项目:国家"十一五"科技支撑计划(2006BAD08A113) 作者简介:曹支敏,男,博士,教授,从事森林病理学与菌物学教学与研究E— mail:zmcao@nwsuaf.edu.cn. 116西北林学院 时树冠中,下部枝条上也产生病斑,常引起全株枯 死,是花椒树的一种毁灭性病害[1].近年来,在深 入研究该病害的发生规律,寻求综合防治途径中,发 现相近花椒品种(如大红袍)在不同地域内的发病程 度有明显差异,这除了环境因素,椒园管理水平的影 响外,各地的干腐病病菌也可能出现分化或变异. 为此,笔者以陕西省渭北,宝鸡花椒主栽品种为对 象,在进一步调查花椒品种抗病性的基础上,研究了 干腐病原菌的生物学特性与致病性分化,以期为控 制该病害的流行提供理论依据. 1材料与方法 I.I花椒品种抗病性调查 2008年4—8月,先后在陕西省富平,宝鸡,凤 县和韩城等县(市)选取 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 地,对花椒干腐病发生 程度及其与花椒品种之间的关系进行调查.根据花 椒栽植面积与分布情况,在各县(市)选取调查区(乡 或村)2,3个,每个调查区设标准地2,6块,每块 标准地调查2O,100株.标准地选择考虑花椒品 种,树龄及其立地条件等因素.具体调查采样按标 准地随机选2,3行,各行再每隔2株选取1株调 查,并按照曹支敏等[5_6]的分级标准,记载并统计各 调查区花椒干腐病情指数. 1.2菌系培养性状观察 1.2.1茵系来源及其分离2007年8—9月和 2008年9月先后从陕西省耀县,凤县,富平和韩城 采集花椒干腐病新发病病斑,寄主均为大红袍花椒 品种,各地采集典型病斑(即有流胶病状)3,5个. 通过PDA平板组织分离与纯化,分别获得F, Ffx,Ffp和Fhc4个花椒干腐病菌(无性型Fusar— iumsambucinumFucke1)菌系,其纯化菌种放于一 1O?冰柜中保存备用. 1.2.2茵系培养性状观察参考方中达r73的方法, 供试病菌培养基主要为PDA培养基,在25,26? 生物培养箱培养所分离各地干腐病菌菌系.从接种 后第3d开始观察,每隔3d观察1次,记载各菌系 的菌落生长速度,形状与颜色变化和孢子产生情况, 并在Olympus生物显微镜下观测孢子的形态和 大小. 1.3花椒干腐病的致病性测定 1.3.1材料供试菌种按采集地分别为Fyx,Ffx 和Vfp菌系(F^c分离较晚而未进行致病性测定), 接种寄主为来自陕西凤县的2a生大红袍花椒幼 苗,3月份盆栽于20"--26?温室培养. 1.3.2方法2008年7月,采用茎皮刺伤接种 法嘲,将Fyx,F和Ffp菌系分别接种到凤县大 红袍盆栽苗茎干上.接种前,先用脱脂棉蘸取无菌 水反复擦洗要接种的花椒苗茎干,待其表面干净后 用尖头镊子分别在茎干的上,中,下3个部位刺伤直 径约为0.5cm的接种面.在无菌条件下,分别取3 地病菌菌系纯培养菌饼(直径5ram)接种到刺伤接 种区.接种后,用蘸有无菌水的脱脂棉包裹接种面, 再用料薄膜将脱脂棉包裹扎紧,以起到保湿的作用. 以刺伤不接菌为对照.接种6d后,去掉接种面包 裹物,观察各菌系在各花椒品种上的发病情况,并从 发病期开始定期测量病斑面积. 2结果与分析 2.1不同花椒品种干腐病病情指数 4—8月份,各地花椒干腐病病情指数随时间推 移逐渐增大(表1).同一地方的不同花椒品种之间 的发病情况存在明显差异.如宝鸡晁峪的豆椒,大 红袍病情较重,而米椒发病较轻;凤县豆椒的病情指 数也高于当地的大红袍品种. 对8月份各地大红袍花椒品种的干腐病病情进 行.检验结果表明,韩城,凤县,富平和宝鸡的大红 袍病情存在极显着差异(夕?0<0.01).以韩城薛 峰王村的病株率与病情指数最高,芝阳赵峰村最低, 凤县发病率及病情指数较高,富平雷村的病情指数 较低.这除了与各地气候条件差异有一定关系外, 主要与树龄大小,特别是各地大红袍品种分化及病 虫害的管理水平有关. 2.2各菌系的菌落培养性状 表2表明,在PDA培养基上,Ffx,Fyx菌系的 菌落生长速度,形状,颜色,孢子的形态与大小都十 分相似,孢子以三隔膜镰刀型分生孢子多见,其菌落 呈绒毛状,紫红色,生长速度明显快于Vfp,Fhc菌 系.富平菌系Ffp菌落表现独特,呈短绒毛至绢毛 ,桔黄色,其分生孢子较其他菌系产生 状,薄或稀疏 时问早,个体大,以4,5隔膜孢子多见(图1).韩 城菌系Fhc的菌落特征虽然与Ffz,Fyx菌系基本 相似,但在相同条件下不易产孢或产生孢子较小. 总体来看,在PDA人工培养上的各干腐病菌菌系 的培养性状出现明显差异或分化,且镰刀型分生孢 子较自然发病病斑上的大孢子小[4]. 2.3各菌系的致病性 从表3可以看出,来自富平的菌系(Ffp)接种 后病斑扩展时间早,速度快,其致病性明显强于凤县 和耀县的Vfz和Fyx菌系,病斑扩展面积大于后 两者约50.Vfx,Fyx菌系对大红袍的致病性相 第6期曹支敏等花椒干腐病的寄主抗病性与病原菌致病性分化117 菌系(代号) 菌落性状 大小(培养15d) —— 形状与颜色 重复直径/cm 开始产孢时间 /d 分生孢子形态, 大,J,/m (1)菌系Ffp分生孢子(2)菌系F分生孢子(3)菌系F分生孢子(4)菌系Fhc分生孢子 图1花椒干腐病菌各菌系分生孢子形态及大小 Fig.1ConidialmorphologyandsizeofF.sambucinumstrains 3结论与讨论 通过对陕西省主要花椒品种的干腐病抗病情况 的田问调查,不仅证明不同花椒品种问的抗病性存 在着很大差异,即使同一品种大红袍在各栽培区的 抗病性也有所不同.各地豆椒均表现最感病,其次 118西北林学院25卷 裹3花椒千腐病菌3菌系对大红袍的致病性 Table3PathogenicityofF.sambucinumthree strainstotheDahongpaovariety 为大红袍,宝鸡米椒抗病性较强.大红袍为各花椒 产区的主栽品种,但实际调查发现各地大红袍的形 态学,生物学存在分化并且早已各有其地方俗名,如 凤椒,齐椒和韩城大红袍等.因此,需要进一步在相 同栽培环境条件下,对各地的大红袍花椒品种抗病 性进行更深入的研究. 病菌培养性状及其致病性研究表明,花椒干腐 病菌在陕西各花椒产区之间存在明显的培养性状和 致病性分化,基本可分为2个类型.凤县菌系 (Ffx)和耀县菌系(Fyx)可作为一个致病类型,富 平菌系(Ffp)单独为另一个类型.韩城菌系(Fhc) 是否与凤县菌系(F)和耀县菌系(Fyx)同类,仍 需要对其生物学性状与致病性继续进行研究.同 时,各地花椒干腐病菌的致病性分化还需进一步从 分子遗传结构变化的角度进行研究跚. 致谢:陕西省韩城市花椒研究所,风县花椒局等为病害调查提供 了便利条件.杨凌职业技术学院康克功教授提供了接种试验用花椒 苗,在此一并致谢. 参考文献: [1]李孟楼,曹支敏,李孔文,等.陕西地区花椒病虫种类初步调查 及重要的种的描述口].西北林学院,1988,3(1)t29—36. 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