交嘴雀和朱雀的超氧化物歧化酶同工酶的研究

交嘴雀和朱雀的超氧化物歧化酶同工酶的研究 第17 卷 第4 期 牡丹江大学学报Vol.17 No.4 Apr. 20082008 年 4 月Journal of Mudanjiang University 文章编号:1008-8717(2008)04-0099-03 交嘴雀和朱雀的超氧化物歧化酶同工酶的研究 杨 丽 娟 ,牡丹江大学化工系,黑龙江 牡丹江 157011, 摘 要:本实验采用聚丙烯酰胺凝胶连续电泳的方法,对交嘴雀、朱雀的心脏、肝脏、肾脏、肌肉、脑及肺六种组织的超氧化物歧化酶(SOD)同工酶分布特点及活性进行 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 研究,发现两种鸟都是肝组织中 SOD 同工酶的活性最 强,脑组织中SOD 同工酶活性最弱。实验结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明同工酶的区带分布组成在种与种之间有明显的区别。 关键词:交嘴雀,朱雀,超氧化物歧化酶,同工酶,聚丙烯酰胺凝胶电泳 +中图分类号:Q554.6 文献标识码:A 事达生物工程有限公司生产,氯化硝基四氮唑蓝,NBT, 超氧化物歧化酶(简称 SOD)是一类广泛存在于生物 体内的金属酶,其主要功能是特异地催化超氧阴离子的 ,生化试剂,,中国医药集团上海化学试剂公司生产,甲 硫吩嗪,PMS,,化学纯,中国医药公司北京分公司,其 歧化反应,具有多种生物学作用。国内外研究表明 SOD 它所有药品均为国产分析纯、化学纯或生化试剂。 对多种与超氧阴离子自由基有关的疾病具有良好的疗效 1.2 仪器(方允中等,1984),并且是一种很有希望的抗衰老制剂(袁 三恒多用电泳仪为 Ecp3000、垂直板电泳槽为 DYY-勤生,1982),SOD 已成为与负氧自由基有关反应的重 ?型,均由北京六一仪器厂生产。超速冷冻离心机,要工具酶(Geller,bl,and D,R,Winge,1984)。 BECKMAN COULTEKTM ALLegraTM 64R 交嘴雀,Loxia linnueus,为鸟纲、雀形目、雀科、交 Centrifuge; 微量 移液 枪, RAININ Pipetlite Magnetic 嘴属,多栖息于海拔 1,100 米以上的针叶林中,喜于树冠 Assist Pipette SL-10 SL-100; 凝 胶 成 像 系 统 , 上空活动,常结群飞翔。性活跃,不断由一树冠飞向另一 MultilmageTM Light Cabinet Alpla Innotech 树冠。飞翔时两翅激烈扇动,边飞边鸣叫,其鸣叫声较响。 Corporation。 取食落叶松、红皮云杉、鱼鳞云杉、臭冷杉和长白松种 1.3 制备胶的有关试剂 分 离胶贮液 : 28%Acr-0.735%Bis ,凝胶 缓冲液 :子。朱雀(Carpodacus erythrinus grebnitskii)为鸟纲、雀形 pH8.9Tris-Hcl 缓冲液,内含 TEMED,,电极缓冲液,pH8.3目、雀科、朱雀属,多栖息于海拔 500-900 米的山河谷和 的 Tris.Gly 缓冲液,AP 溶液,0.14%的分析纯过硫酸胺, 落山。迁飞时也可经过海拔 1,400 米的针叶带。经常到田 0.1%溴酚蓝指示剂,1%琼脂,糖,,保存液,甘油, 边草丛觅食,多成群很少单独活动,边迁飞边取食,停留 冰乙酸,蒸馏水,脱色液,7%乙酸溶液 染色液,时间较长(赵正阶,1985)。到目前为止鼠类的生理生化研 -1-1NBT(3mg.ml), PMS(1mg.ml), Tris-HCl 究已有很多报道,Pantelouris 等,1967,Hafner 等 1979, -1-1(0.5mol.L,PH7.6,0.001mol.LEDTA-Na), 2-1金昊等,1985,周虞灿等,1981,,但有关鸟类的研究还 aCl(0.5mol.L)。 为数不多。本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对两种 1.4 动物来源 交嘴雀、朱雀捕自牡丹江周围林区,鸟的 SOD 同工酶进行了分析研究,从而为鸟类的生化研 室内做短期饲 养。究和在分子水平上为鸟的分类积累基础资料。 1(材料和方法 动物组织提取液,杀死动物,立即取其心脏、肝脏、 肾脏、骨骼肌、脑、肺 6 种组织,用生理盐水去污,并 1.1 药品 丙烯酰胺,Acr,及甲叉双丙烯酰胺(Bis),-1-1 用滤纸除去多余的生理盐水,按 m.v=1g.10ml的比例 哈尔滨伊 收稿日期:2007-10-14 应(周虞灿,潘森樑,1989)。 除肺和脑组织外,其他组织中均有分布,迁移率为 0.11。 表 1 朱雀不同组织中 SOD 同工酶分布 心脏 heart 肝脏 liver 肾 kidney 肌肉 muscle 脑 brain 肺 lung R m - - + + + - 0.78 SOD 1- - - - + + 0.71 SOD 2- + + - - - 0.54 SOD 3+ + + + + ++ 0.48 SOD 4- - - - + + 0.31 SOD 5+ + + + - + 0.29 SOD 6++ ++ ++ ++ ++ ++ 0.23 SOD 7+++ +++ +++ +++ +++ +++ 0.18 SOD 8+++ +++ +++ + - - 0.11 SOD 9- - - - - +++ 0.06 SOD 10 条带数5 6 7 6 6 7 强带数2 2 2 1 1 2 注,从 SOD到 SOD的顺序是从阳极到阴极的顺序,“-”表示此处有谱带缺失,“+”的多少表示酶的活性大小 1 10 图 2 交嘴雀 SOD 同工酶分布图谱(上端为阴极，下端为阳极) 图 1 朱雀 SOD 同工酶分布图谱(上端为阴极，下端为阳极) 在交嘴雀的六种组织中共分离出 14 条 SOD 同工酶 带,见图 2,表 2,。脑中最少为 7 条,但是 SOD为活为 SOD 同工酶的主带,迁移率为 0.2,SOD除SOD 12 12 13 性最强的条带,肌肉组织中为 8 条,心脏组织中为 9 条, 了脑和肺组织外其他组织中均有发现。SOD是肺组织 14 中所特有的酶带。 肾脏中为 12 条最多, 肺组织中只有 10 条。其 中 SOD,SOD,SOD为交嘴雀六种组织中的共有酶带。 71112 表 2 交嘴雀不同组织中 SOD 同工酶分布 心脏 heart 肝脏 liver 肾 kidney 肌肉 muscle 脑 brain 肺 lung R m - - - - + - 0.85 SOD 1 SOD- + + - - - 0.83 2 SOD - + + + + + 0.79 3 SOD - + + + + + 0.76 4 SOD + + + - - + 0.70 5 SOD + + + - + + 0.66 6 SOD + + + + + + 0.62 7 SOD + + + + - + 0.56 8 SOD + + + - - - 0.36 9 SOD + + + + - - 0.30 10 SOD + ++ ++ + + + 0.25 11 SOD +++ +++ +++ +++ +++ +++ 0.20 12 SOD +++ +++ +++ +++ - - 0.12 13 SOD- - - - - +++ 0.07 14 条带数 9 11 12 8 7 9 强带数 2 1 2 2 1 2 注,从 SOD到 SOD的顺序是从阳极到阴极的顺序,“-”表示此处有谱带缺失,“+”的多少表示酶的活性大小 1 14 3(讨论属。 两种鸟 SOD 同工酶的共同点 都具有一条活力最强参考文献: [1]方允中.医学酶学.北京,人民卫生出版 的主酶带,其迁移率皆较低, 社,1984,459. [2]袁勤生.国外医学分子生物学分两种鸟都以肝组织中 SOD 活力最强,脑组织中 SOD 活 册.1982,4,278-280. 力最弱。这与其功能是相适应的。肝组织中 SOD 活性较 [3]Geller,Bl,and D,R.Winge Subcellular distribution of 强与该组织的需氧量较多有关。肾的 SOD 条数最多,并 superoxide dismutase in rat liver 1984. 且两种鸟都有一条特有的酶带,而且不同带之间的迁移 [4]赵正阶.鸟类志. 长白山,吉林科学技术出版社,1985, 率的差异较大。 360-370. [5]周虞灿,潘森樑.两种家兔乳酸脱氢酶的电泳变种和组 两种鸟 SOD 同工酶的不同点 区带的数目不同,同 一个体的不同组织,甚至同种 织特异性的研究.浙江师范大学学报,自然科学版,, 组织的不同区带间也有差异,交嘴雀和朱雀均为雀科, 1989,12,2,,109-115. 但不同属,而生化分类法在于比较其生化指标的异同, 作者简介:杨丽娟(1980-)，女，牡丹江大学化工系教 蛋白质的泳动速度和同类蛋白质的区带组成是重要指 师，研究方向:生物化学。 标,从两种鸟的区带组成上差别较大看出它们确是不同