ICS65．120
B46
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中华人民共和国国家标准
GB／T27985—201 1
饲料中单宁的测定 分光光度法
Determinationoftannininfeeds--Spectrophotometry
2011-12-30发布 2012—06-01实施
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前言本标准按照GB／T1．1—2009给出的规则起草。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(sAc／Tc76)提出并归口。本标准起草单位：上海市兽药饲料检测所。本标准主要起草人：商军、潘娟、黄士新、王蓓、曹莹、华贤辉、陆淳、蒋音。GB／T27985--2011 ????? www.bzfxw.com ????
1范围饲料中单宁的测定分光光度法本标准规定了饲料中单宁的分光光度测定方法。本标准适用于配合饲料、单一饲料中单宁含量的测定。本方法的检出限为17．5mg／kg，线性范围为0．50mg／L～6．00mg／L。2规范性引用文件GB／T27985--2011下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB／T6682
分析
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实验室用水规格和试验方法GB／T14699．1饲料采样GB／T20195动物饲料试样的制备3原理用丙酮溶液提取饲料中单宁类化合物，经过滤后，取滤液加钨酸钠一磷钼酸混合溶液和碳酸钠溶液，显色后，以试剂为空白对照，用分光光度计于760nm波长处测定吸光度值，用单宁酸作标准曲线测定饲料中单宁含量。4试剂和溶液除非另有说明，本标准中所用试剂均为分析纯，水符合GB／T6682三级用水规定。4．1钨酸钠(Na20。W·2H：O)。4．2磷钼酸(H。Mo。zO。oP·XHzO)。4．3钨酸钠一磷钼酸混合溶液：称取100．0g钨酸钠(4．1)、20．0g磷钼酸(4．2)，溶于约750mL水中，移入1000mL回流瓶中，加入50mL磷酸，充分混匀，接上冷凝管，在沸水浴上加热回流2h，冷却，转入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，过滤，置棕色瓶中保存。室温下可保存14d。4．4无水碳酸钠(Na：COs)。4．5碳酸钠溶液(75g／L)：称取37．5g无水碳酸钠(4．4)溶于250mL温水中，混匀，冷却，稀释至500mL，过滤到储液瓶中备用。室温下可保存7d。4．6丙酮(C。H。0)。4．7丙酮溶液(1+1，体积比)：分取等体积的水和丙酮(4．6)，等体积混合，摇匀，即得。4．8单宁酸标准品(c，。Hs：Ote)：含量≥95．0％。4．9单宁酸标准储备液：称取单宁酸标准品(4．8)适量(精确到0．0001g)，加适量水溶解，用水定容至100mL，摇匀，制成单宁酸质量浓度约为1mg／mL的标准储备液。在冰箱中4℃可保存5d。4．10单宁酸标准使用液：精密量取单宁酸标准储备液(4．9)10．00mL，置200mL容量瓶中，用水定容至200mL，摇匀。此溶液单宁酸质量浓度为50mg／L，用时现配。1 ????? www.bzfxw.com ????
GB／T27985--20115仪器和设备紫外可见分光光度计：带10mm比色皿，可在760rim处测定。电子天平：感量为0．1mg。粉碎机。振荡仪。单标线吸管：1mL，10mL，50mL，A级。刻度吸管：5mL。容量瓶：50mL，100mL，200mL，A级。具塞三角瓶：250mL。中速定量滤纸。6试样制备按GB／T14699．1采样，按GB／T20195制备试样，磨碎，通过0．45mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用。7分析步骤7．1试液的制备称取试样1g～2g(精确至0．0001g)，置于250mL具塞三角瓶(5．8)中，精密加入丙酮溶液(4．7)50．00mL，加塞密封，置振荡仪(5．4)上振摇40rain，静置，用中速定量滤纸(5．9)过滤，弃去初滤液，续滤液供测定用。7．2测定7．2．1标准曲线的绘制精密量取单宁酸标准使用液(4．10)0．00mL、0．50mL、1．00mL、2．00mL、3．00mL、4．00mL、5．00mL和6．00mL，分别置盛有约30mL水的50mL容量瓶中，播匀；加钨酸钠一磷钼酸混合溶液(4．3)2．5mL，加碳酸钠溶液(4．5)5．0mL，摇匀；分别用水定容至50mL，摇匀。单宁酸标准溶液浓度分别为0．00mg／L、0．50mg／L、1．00mg／L、2．00mg／L、3．00mg／L、4．00mg／L、5．00mg／L和6．00mg／L，放置30rain显色后，以标准曲线0．00mg／L为空白，在760nm波长处测定标准溶液的吸光度，以单宁酸浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。7．2．2试样的测定精密量取试液(7．1)1．00mL，置盛有约30mL水的50mL容量瓶中，摇匀；加钨酸钠一磷钼酸混合溶液(4．3)2．5mL，加碳酸钠溶液(4．5)5．0mL，摇匀；用水定容至50mL，摇匀。放置30rain显色后，以标准曲线0．00mg／L为空白，在760nm波长处测定试样溶液的吸光度，根据标准曲线求出试液(7．1)中单宁酸的浓度。如果吸光度值超过6．00mg／L单宁酸的吸光度时，将试液(7．1)稀释后重新测定。123456789555555555
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8计算和结果的
表
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述GB／T27985--20”8．1计算公式试样中单宁(以单宁酸计)的含量x，以质量分数表示，单位为毫克每千克(mg／kg)，按式(1)计算。x一巡警黑产⋯⋯⋯⋯⋯⋯㈩mXlUUU式中：c——试样测定液中单宁酸的浓度，单位为毫克每升(rag／L)；y——试样定容体积，单位毫升(mL)；D——试样稀释倍数；m——试样质量，单位为克(g)。8．2结果表示测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留到小数点后一位。9重复性同一分析者对同一试样同时两次平行测定所得结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。????? www.bzfxw.com ????
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