UV3200紫外可见分光光度计
(一)仪器上电:打开电源开关。测试前至少预热15分钟。
注意:上电后,仪器会自动自检并初始化。首先检查内存显示“正在启动EastRTOS请等待”,按任意键可跳过这一步,待初始化完成后,仪器将预热15分钟显示“仪器预热15分钟….”,15分钟到或按【ESC】跳过,屏幕最底行会显示:查找特征波长?,选“是”查找特征峰,选“否”跳过,在测试暗电流后,三声鸣叫,进入主显示界面;
如果内存中数据已丢失,仪器将直接查找特征波长;
如果仪器没有安装自动样品架,主页面右上角“样品架#1”将不会显示。(二)调空白:让盛参比液的比色皿入光路;按【0Abs/100%】键调空白。
注意:如果参比液太浓,“能量不足…….”将显示在屏幕的右上角。如果“能量过低……”显示在屏幕的右上角,试验将会中止,告警符号“Warning…”将显示在屏幕中央。如果没有安装自动样品架,“样品架#1”和“Max E”将不会出现。
(三)设置波长:按【GOTOλ】键,下方出现对话条,用数字键输入欲去波长450nm,
按【ENTER】键确认。自动调空白一次,最后屏幕显示0.00 Abs.
(四)文件处理:按【PRINT】可打印,按【OPEN】打开文件,所选文件其扩展名
必须是wav.,按【CLEAR】清除所选文件,按【SAVE】保存文件,其文件名最长三个字符,按【ESC/STOP】退回到前级界面。
(五)试验前的准备:将试验用的比色皿或试管用蒸馏水或其他专门的清洗剂清
洗干净,并用柔软的棉布或纸巾将其
表
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面的手指印或滴液擦拭干净;将盛参比液的比色皿放入4联手动样品架最近你的槽位中,再将推杆向前推到头使比色皿正对光路,关上样品室盖。
实验具体操作:
一、光度计模式:将参比液推入光路,按【1】键进入“光度计模式”测试界面,
进入后仪器会自动调空白一次,按【ESC/STOP】则回到主菜单。
1、按【F2】选择测试模式,分别为:吸光度,透过率,含量。按【∧】、【∨】
选择,按【ENTER】确认。按【0Abs/100%】校准空白,最后将测试样品拉
入光路,读取试验结果。
2、含量模式:主菜单后按【F1】选择浓度,其余操作如上。
a、按【F3】直接输入已知浓度因子F的值后,按【ENTER】确认,将测试样品
拉入光路,读取试验结果。
b、将已知浓度值的
标准
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液拉入光路中,按【F4】输入标准液浓度值后按【ENTER】
确认,将测试样品拉入光路,读取试验结果。
注意:如果浓度因子的值F大于9999,将显示“数据越限”的信息。
二、定量测量:主界面中按【2】直接进入“定量测定”界面,按【ESC/STOP】退
回主界面。
1、按【F1】选择浓度单位,按【GOTO】选择校正
方法
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,分别是:单波长法、
等吸收双波长法、和三波长法。
2、直接输入标准曲线,按【F2】选择拟合方法,再按【F2】可以直接输入一
条标准曲线。
3、建立标准曲线,按【F3】可以通过测试一组标准样品建立一条标准曲线。
a、输入标准溶液的浓度值。按【∧】【∨】修改。
b、参比液拉入光路后按【0Abs/100%】调空白,将各标准样品逐个拉入光
路按【START】一步一步测得标品A值。
c、按【F4】画出曲线。这时可以通过按【F1】键选择不同的拟合方法来
得到不同的拟合曲线。
注意:若样品数较少,选择二阶,特别是三阶曲线拟合会得到无效的结果。
4、定量测定,
第一步,获得标准曲线(三种方法):
注意:应在“定量测定”界面下进行。
a、调入存储于机内的标准曲线,进行测试
在建立标准曲线后的界面下按【LOAD】, 【∧】【∨】选择扩展名为***.fit的文件,按【ENTER】调入,按【ESC/STAOP】退回前级界面,进行测试。
b
三、光谱扫描:
主界面中按【3】直接进入“光谱扫描”界面,按【ESC/STOP】退回到主界面。
1、按【F1】设置扫描参数,按【∧】【∨】键选择Y轴标尺,
注意:
(1)由于仪器总是从高波长扫到低波长,所以设置扫描的开始波长要大于结束波长;
(2)扫描间隔只能是0.1nm,0.2nm,0.5nm,1nm,2nm,和5nm每次扫描能处理的数据点数最多
3000点,所以当扫描范围设得大时,扫描间隔就不能设得过小;
(3)扫描速度为“高速”,“中速”和“低速”三档可选。
2、按【F2】可选扫描模式。
3、将参比液拉入光路后,按【0Abs/100%T】键调空白建立基线,按【EST/STOP】键可停止扫描。
4、将待测分析样品拉入光路后,按【START】键扫描,按【EST/STOP】键可停止扫描。扫描结束蜂鸣器响三声。
5、扫描结束后按【<】或【>】键改变X轴标尺,按【∧】或【∨】改变Y轴标尺。按【F3】键进行峰谷检索(两种):
a、逐点检索:按【>】键从左到右逐点检索,按【<】键从右到左逐点检索。检索步距与扫描间隔一致。检索数据显示在显示屏的第一行。
B、逐点峰谷检索:按【∧】键从左到右逐点进行峰谷检索,按【∨】键从右到左逐点进行峰谷检索,检索数据同样显示在显示屏的第一行。
注意:峰谷检索中按【F1】键设置逐点峰谷检索的检索高度,该值越小检索到的峰谷点越多,反之亦然。
按【F4】光滑滤波可修订扫描曲线。按【SA VE】键输入文件名,按【ENTER】确认储存。按【LOAD】【∧】【∨】选择后缀扩展名。按【ENTER】确认,按【PRINT】打印。
四、动力学测量
主界面中按【4】直接进入“动力学测量”界面,按【ESC/STOP】退回。
1、按【F1】设置参数,按【∧】【∨】选择Y轴标尺。
2、按【F2】选择试验模式,
五、DNA/蛋白质测量、
主界面中按【5】直接进入“DNA/蛋白质测量”界面按【ESC/STOP】退回主界面。注意:具体算法参考附录A
1、按【F1】参数设置
2、按【F2】选择测量模式,“吸光度差1”或“吸光度差2”模式被选定后,在选择是否“测
量背景”。“吸光度差1”的测量波长为260nm和280nm背景波长为320nm(任选),“吸光度差2”模式的测量波长为260nm和230nm背景波长为320nm(任选).
3、按【F3】选择浓度(含量)单位
测量步骤:
a、参比液拉入光路中,按【0Abs/100%】调空白
b、待测液拉入光路中,按【START】开始测量。
c、若有多个样品,只需再按【START】即可
d、按【∧】【∨】查看多个样品测试结果。
4、按【F4】恢复参数缺省值
六、多波长测量
主界面中按【6】直接进入“DNA/蛋白质测量”界面按【ESC/STOP】退回主界面。注意:具体算法参考附录A
1、按【F1】参数设置,按【∧】【∨】输入多个波长。按【CLEAR】清除已输入波长。按【ESC/STOP】退出该界面。
2、按【F2】选择测量模式,
测量步骤:
a、参比液拉入光路中,按【0Abs/100%】调空白
b、待测液拉入光路中,按【START】开始测量。
c、若有多个样品,只需再按【START】即可
d、按【<】【>】查看多个样品测试结果。也可以按【∧】【∨】逐个查看。
系统设置和仪器校正
主界面中按【7】直接进入“DNA/蛋白质测量”界面按【ESC/STOP】退回主界面。
1、按【F1】进行波长校正
2、按【2】设置打印机
a、按【1】对打印机复位
b、按【2】选择打印口,
c、按【3】选择打印机,
d、按【4】选择打印模式,选择“打印屏幕”模式,第一行会显示一个小图标,选择“打印
报表”模式,则没有。
3、按【3】进行灯源设置:时间、日期。
4、按【5】可做暗电流测量
5、按【6】与电脑连接。
6、按【7】关掉按键响声,再按可打开。
注意事项:
1、操作时要保持清洁,特别是不能沾上有机溶剂,避免机体被腐蚀。
2、用完后要将比色杯洗净晾干。机体内放入干燥剂。
3、为延长紫外灯寿命不要忽开忽关,尽量集中安排检测。
4、仪器使用后要登记,签名。