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Nbn基因对小鼠小脑神经元发育的影响.doc

Nbn基因对小鼠小脑神经元发育的影响

无名指_上的等候
2017-11-28 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《Nbn基因对小鼠小脑神经元发育的影响doc》,可适用于综合领域

Nbn基因对小鼠小脑神经元发育的影响本文由杰尔斯坦贡献pdf文档可能在WAP端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT或下载源文件到本机查看。,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,解剖学杂志,,年第,卷第,,,,期,,,基因对小鼠小脑神经元发育的影响王堑张莉高云周。郭敏(宁医学院辽,附属一院,基础学院州锦,,,),,,摘要目的:过观察神经特异性,,通,基因敲除(,,,,,和对照(,,,,,小鼠小脑神经元发育的形态学变,,,,,,),,,,,,)化探讨,,,损伤修复基因,,,在小鼠小脑发育过程中的作用。方法:应用免疫组织化学技术和体视学方法对生后(),,,,、】、,,的,,,,,,,,,,,,鼠小脑进行系统观察和定量分析。结果:,,,,,小鼠相比,,,,,和,,,,小与,,,,,,,,,,,小鼠生后各时间相点小脑发育迟缓,,,,皮质各层界限不清胞排列紊乱,未形成正常小脑皮质的,层结构细至,,,,,阳性表达的颗粒细胞面数密度和体密度值明显减小,,阳性表达的浦肯野细胞面数密度和体密度值增加。结,,,,论:,,损伤修复基因,,,,可能是小脑发育过程中的重要基因,鼠小脑神经元的发育和成熟。影,,关键词,,脑经元育视学鼠,小神发体小,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,。,,,,,,,,,,,,((,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,。,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,),,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,在人类称之为,,是一种重要的,,),,修复基因表达的蛋白,,,其,,与,,,损伤修复,,参,,,如小头畸形、长发育延迟、织退化、,生组对,,损伤剂敏感、染色体不稳定、患肿瘤等,,都与,易,,,损伤修复密切相关。有关,,,基因对小脑发育影响的形态学方面的系统研究目前国内外尚少见报道研究拟本敲除(,,,,)鼠,,,,,,小每组,只以非基因敲除的同窝小鼠(,,,,),,,,,,为对照组【,雌雄各半,,共,只体质量,,,(,,,以上动物由世界卫生组织国际癌症研究署提供获中国医学科学院基础医学研究所并病理学系及实验动物中心支持完成)。仔鼠用快速断头法取出脑组织矢状缝纵向切开多聚甲醛固沿,应用免疫组织化学技术结合体视学方法对,,,,,,,,,,,,,,,,鼠小脑神经元的发育进行系统,和,,,小观察和定量分析进一步认识,,,损伤修复基因为定,,常规脱水、明、蜡定向包埋续矢状切片透石连厚,,于免疫组织化学显色及光镜下观察。用,,免疫组织化学显色(,,对小鼠小脑发育的影响及其功能研究提供基本的,实验依据。,材料和方法石蜡切片常规脱蜡入水橼酸高压修复枸,,,。消除内源性过氧化物酶活性山羊血清封闭室温孵育,,,,羊抗鼠单克隆抗体(,和,一,,,,,,,,,,:,,,,,和,:,国,,,公司),,,美,,,,,,,动物选择和标本制备(选用生后()、,、,,的神经特异性,,,,,,,基因孵育过夜抗(,,,孵育,,辣根酶标记二,:,),,,,链霉卵白素工作液,孵育,,,,,,,,,显色常规脱水、明、片镜下观察。用,,代替一抗作阴透封光,性对照。第,作者,,,:,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,(,,通讯作者,,:,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,(,,,体视学测定(收稿日期:,,,,修回日期:,,,,,,,,,,,,,,每个动物的脑组织等间隔选取切片张切片按每,,,“”选取视野镜下借助目镜方格测试系统用,形光采点计数法按公式,,,,和,,,,,分别测算出颗粒层,,,阳性表达的颗粒细胞、,,阳性,,,,表达的浦肯野细胞的面数密度和体密度值中,,式分别为,,,和,一,,,,阳性表达细胞的截面数,,为方格系统落在所测结构的点数和,分别为测试,系统落在参照系的点数和截面积(小脑为参照以系),。胞密集分布子层,,,阳性表达的细胞排列稀分,疏浦肯野细胞胞体较大散在排成单层突起开始发育内颗粒层,,阳性表达的细胞排列稀疏。,,,,,,外颗粒层,,,阳性表达的细胞明显减少均匀地,较排列在分子层的周围子层内,,,阳性表达的细分,胞增多肯野细胞胞体增大起及其分支增多浦突内颗粒层增厚,阳性表达的细胞明显增加列较,,,排密集,颗粒层消失子层,,,阳性表达的,,,外分,细胞减少内颗粒层即颗粒层,阳性表达的细胞,,,,,统计学处理(采用统计软件,,,(,,,,对所测各项数据进行析因设计的方差分析和独立样本,检验。,结果密集分布。,,,,,,鼠:,,,,,,较,,,,小与,,,,比,,,,,小脑皮质各层界限不清,细胞排列紊乱,,,至,外颗粒层仍未完全消失形成正常小脑皮质的,层未结构肯野细胞呈片状分布于整个小脑浦突起及其分支较少。,,体视学测量(,,,,,,与,,,,,,,,,,,,,,小鼠相比,,,,,光镜观察(,)(图,,,,,阳性表达于成熟的神经细胞核不同程度,呈的棕黄色,,,表达于浦肯野氏细胞的胞体和突而,,起呈不同程度的棕黄色。,,,,,,鼠:,,脑皮质外颗粒层,,,,小,,,,小逐渐变薄消失子层和内颗粒层(粒层)渐增分颗逐,,脑皮质颗粒层的,,,阳性表达的颗粒细胞,小,,面数密度和体密度值明显减少(,,),一,阳,,(,,,性表达的浦肯野细胞面数密度和体密度增加(,,,,)表,。(,()厚。,质的外颗粒层、子层、肯野细胞层和,,皮分浦内颗粒,层结构明显。外颗粒层,,,阳性表达的细,表,,,,,,,和,,,,,,小鼠小脑体视学参数(,,士,,,,,,,,,,组),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,士,,,,,,,,,,,,,),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,,,,,,,讨论,,,,,鼠小脑皮质各层结构明显颗粒层由,,,,小外外向内,,阳性表达的细胞逐渐增多,,内颗粒层,,,阳性表达的细胞排列逐渐由稀疏到密集。,,,,,,,研究表明,基因功能异常可影响小鼠中枢神,,经系统的发育导致小头畸形、长障碍、脑萎缩以生小及共济失调等,。,,,,,基因敲除的小鼠脑发育受到显著影响其脑组织重量与野生型小鼠相比明显减轻大脑皮层的脑回厚度有不同程度下降目测脑矢状面截面显著变小同时伴随小脑发育不良、萎缩,。本实验结果显示,,,,,,与,,,,比较,基因敲除鼠,,,等,认为外颗粒层是由具有增生能力的神经上皮细,,,胞不断迁移聚集所形成的时伴有外颗粒层细胞不同断内迁,,,和,,,等口,认为内源性的,,,,,,损伤在神经干细胞和神经祖细胞发生频繁的损伤不能如进行正确及时修复就会导致细胞凋亡,,,,,,,,等,,报道,,一鼠小脑外颗粒层有丝分裂后期颗粒细,小胞存在大量凋亡研究结果显示,,,,,,本,,,,,,小鼠小脑各层界限不清,阳性表达的细,,,,,,,胞排列紊乱布不均,,,仍未形成正常小脑皮分至,质的,结构。体视学测量结果表明,,,,层与,,,,,小鼠比较,,,,,,,,,,,鼠小脑颗粒层,,,,,,,小,,,阳性细胞面数密度和体密度明显减少。说明,,,,,,,脑皮质各层界限不清胞排列紊乱,小细至,,,粒层未完全消失形成正常小脑皮质的,,夕颗未层结构肯野细胞呈片状分布于整个小脑浦突起及其分支较少。说明,,因敲除小鼠小脑神经元发育受,基到明显影响测,,推,基因可能是小脑正常发育的一个重要基因。,,,免疫组织化学显色结果显示,,,,,,,,,,,基因作为一个重要的,,,修复基因明显影响了一,,本TXT由“文库宝”下载:

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