RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸、盐酸水苏碱、梓醇、麦角甾苷的含量

RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸、盐酸水苏碱、梓醇、麦角甾苷的含量 RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸、盐酸 水苏碱、梓醇、麦角甾苷的含量 106 中国现代医药杂志 年 月第 卷第 期2013 6 15 6 MMJC Jun 2013 VoI 15 No.6 !药物与临床! RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中 阿魏酸"盐酸水苏碱"样醇"麦角舀昔的含量 !" 复方益母草胶囊是由益母草 熟地黄 当归 3种 mm"250mm 5!m 色谱柱 流动相 0.1%磷酸水 A - 中药经过一定工艺组成的胶囊 功效为调经活血 祛 乙睛 B 梯度洗脱 0#10min A为 90% 11#15min 瘀生新 临床主要用于治疗瘀血所致月经过多 过少 A为 90%#75% 16#45min A为 75%#60% 46#55min 及经期延长 产后子宫复旧不全引起的恶露不绝等 A为 60% 柱温 30$ 流速 1mI/min 增益 50 雾化 [1~3] 症状 目前复方益母草胶囊没有明确的质量控制 温度 飘逸管温度 理论塔板数按盐酸水 36$ 70$ 标准 为了有效地 准确地控制其内在质量 确保临 苏碱峰计算不低于 见图 2000 1 床疗效 本研究用反相高效液相色谱法联用蒸发光 检测器同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸 盐酸水 苏碱 摔醇 麦角舀昔的含量 以建立复方益母草胶 囊完善的质量控制方法 仪器与试药 1 A B Waters 2695高效液相色谱仪 2424型蒸发光检 图 混合对照品溶液 和供试品溶液 高效液相色谱图 1 A B 测器 empower 2工作站 自动进样器 柱温箱 KO- 注 1为盐酸水苏碱 2为阿魏酸 3为摔醇 4为麦角舀昔 100型超声清洗器 昆明市超声仪器有限公司 Sar! torius BP211D分析天平 德国赛多利斯 阿魏酸对 2.2对照品溶液的制备 取盐酸水苏碱 阿魏酸 摔 照品 批号 0773-9706 盐酸水苏碱对照品 批号 醇 麦角舀昔对照品适量 精密称定 置 25mI容量瓶摔醇对照品 批号 110712-200305 110713-200204 中 加 50%甲醇溶解并稀释至刻度 摇匀 用 0.45!m 麦角舀昔对照品 批号 111530-200504 供 HPLC 滤膜过滤 即得混合对照 品溶液 每 1mI含阿魏酸 含量测定用 均由中国药品生物制品检定所提供 0.0121mg 盐酸水苏碱 1.S72mg 摔醇 0.0236mg 麦 甲醇为 HPLC级别 其他试剂均为分析纯 水为超纯 角舀昔0.0172mg 水 复方益母草胶囊样品来源为复方益母草胶囊 2.3供试品溶液的制备 取本品 内容 财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容 物 研细 取1g 由开封市民康制药厂提供 精密称定 置于锥形瓶中 加入 50%甲醇约 50mI 超 声处理 功率 120W 50kHz 30min 冷却至室温 取 2 方法与结果 续滤液 挥干 用 50%甲醇溶解并稀释至 5mI 用0.45 !m滤膜过滤 即得 2.1色谱条件和系统适用性试验 KromasiI C1S 4.6 2.4线性关系实验 精密吸取上述混合对照品溶液注入色谱仪 以进样量 4!I 6!I 10!I 15!I 30!I !g 的自然对数为自变量 色谱峰面积 A 的自然 对数为因变量 绘制标准曲线 建立回归方程 见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 作者单位 416000 湖南省湘西州人民医院药剂科 1 可见该方法在较大范围内线性关系良好 万方数据107 中国现代医药杂志 2013年 6月第 15卷第 6期 MMJC Jun 2013 Vo1 15 No.6 表 1 盐酸水苏碱 阿魏酸 摔醇 麦角舀昔的回归性分析 对数外标法计算含量 盐酸水苏碱 阿魏酸 摔醇 麦 2 皂昔 回归方程 R 线性范围 !g 角舀昔的含量分别为 9.73mg/g 0.065mg/g 0.12mg/g 盐酸水苏碱 y1.2546x+4.5004 0.999 7.488!56.16 0.081mg/g RSD分别为 1.56% 1.38% 1.42% 1.72% 阿魏酸 y1.2483x+7.2442 0.9988 0.0484!0.363 n5摔醇 y1.2683x+6.8993 0.9994 0.0944!0.708 2.7方法回收率 取已经测定含量的样品 6份 每份 麦角舀昔 y1.2623x+7.0658 0.9996 0.0688!0.516 约 精密称定 按照供试品测定的盐酸水苏碱 0.15g 2.5仪器精密度 精密吸取混合对照品溶液 6!1 阿魏酸 摔醇 麦角舀昔含量 以其半份的 100%比例 15!1 以各峰面积分别计算 结果 盐酸水苏碱 阿魏 精密加入对照品贮备液 挥干甲醇后加入样品 再按 酸 摔醇 麦角舀昔的平均回收率 RSD 分别为 照 2.3 项下色谱条件测定样品 计算回收率 结果 1.46% 1.88% 1.53% 1.92% n5 盐酸水苏碱 阿魏酸 摔醇 麦角舀昔的回收率分别 方法重复性 取同一批样品 共 份 按 项 为 99.18% 99.73% 99.98% 100.82% n6 见表 2 2.6 6 2.3 下方法制备供试品溶液 进样体积 20!1 以两自然 表 2 盐酸水苏碱 阿魏酸 摔醇 麦角舀昔加样回收率试验结果 取样量 样品原有量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 成分 g mg mg mg % % 获术二酮 0.5002 4.8669 4.68 9.4545 98.02 0.5003 4.8679 4.68 9.5122 99.24 0.4996 4.8611 4.68 9.6265 101.82 99.18 2.15 0.4979 4.8446 4.68 9.6031 101.68 0.5027 4.8913 4.68 9.4441 97.28 0.4991 4.8562 4.68 9.3988 97.06 获术醇 0.5002 0.0325 0.03025 0.0634 102.11 0.5003 0.0325 0.03025 0.0628 100.10 0.4996 0.0325 0.03025 0.0619 97.28 99.73 1.81 0.4979 0.0324 0.03025 0.0628 100.62 0.5027 0.0327 0.03025 0.0623 97.93 0.4991 0.0324 0.03025 0.0628 100.36 吉马酮 0.5002 0.0600 0.059 0.1203 102.16 0.5003 0.0600 0.059 0.1187 99.43 0.4996 0.0600 0.059 0.1194 100.76 99.98 2.43 0.4979 0.0597 0.059 0.1165 96.19 0.5027 0.0603 0.059 0.1185 98.60 0.4991 0.0599 0.059 0.1205 102.73 获术烯 0.5002 0.0405 0.043 0.0843 101.82 0.5003 0.0405 0.043 0.0849 103.20 0.4996 0.0405 0.043 0.0834 99.84 100.82 1.66 0.4979 0.0403 0.043 0.0826 98.30 0.5027 0.0407 0.043 0.0841 100.89 0.4991 0.0404 0.043 0.0838 100.87 万方数据108 中国现代医药杂志 年 月第 卷第 期 a a a ~ ~ 2013 6 15 6 MMJC Jun 2013 VoI 15 No.6 !"#含量测定 取三批样品a按照上述色谱条件下进 较流动相水-甲醇系统\ 乙睛-水\乙睛-0.1%磷酸水 样测定a以外标法计算复方益母草胶囊中盐酸水苏 系统a发现乙睛-0.1% 磷酸水系统效果较为理想a分 碱\阿魏酸\摔醇\麦角舀昔成分的含量见表 3O 离效果俱佳a保留时间合适 O本研究梯度洗脱变化比 例简单a克服了梯度过于复杂a难以操作a避免梯度 表 测定结果 a $ n:3 mg/g 复杂而导致重复性较低和基线不稳等现象出现a最 编号 盐酸水苏碱 阿魏酸 摔醇 麦角舀昔 终造成的是样品组分含量难以得到保证O 而本研究 040207 9.69 0.064 0.120 0.080 040208 10.63 0.062 0.182 0.083 中盐酸水苏碱\阿魏酸\摔醇\麦角舀昔峰均能达到 040209 8.43 0.065 0.184 0.103 基线分离a保留时间适中a能较好对盐酸水苏碱\阿 魏酸\摔醇\麦角舀昔的定性和定量a系统适用性较 $ 讨论 好O 因此a我们选用乙睛-0.1%磷酸水系统作为流动 相O 复方益母草胶囊可调经活血a祛瘀生新a临床主 参 考 文 献 要用于治疗月经不调O 其内在质量的优劣直接关系 着复方益母草胶囊的临床应用效果a也关系着复方 1 连方a穆琳a赵丽萍a等.复方益母胶囊治疗妇产科疾病临床应 益母草胶囊的合理应用O 因此a对于如何定性\定量 用[J].山东中医杂志a2003a228:473-475 地控制复方益母草胶囊的质量的研究意义重大a必 2 章曙丹a徐强a倪晨a等.薄层扫描法测定鲜母益胶囊中盐酸水 须制定有效\安全\可控的复方益母草胶囊的质量标 苏碱的含量[J].中成药a2004a264:7-8 准a使得复方益母草胶囊的安全性\可控性及有效性 3 邓伟雄a陈华辉a钟文明a等.复方益母草胶囊防治药物流产后 得到确切的保证O 出血的临床研究[J].中国现代医生a2012a5018:165-166 4 王晓燕a王舒.HPLC-ELSD法测定益母草颗粒中盐酸水苏碱的 复方益母草胶囊由益母草\熟地黄\当归组成a 含量 实用医药杂志a a : [J]. 2012 29 6 523-524 其主要有效成分为盐酸水苏碱\阿魏酸\摔醇\麦角 5 李存金a郭飞宇. HPLC-ELSD测定复方益母草胶囊中盐酸水苏 [4a5] 舀昔a盐酸水苏碱属于季按碱a无共轭体系 a另外 碱的含量[J].中国现代应用药学a 2013a301:72-74 [6] 摔醇在紫外区为末端吸收a吸收值低a干扰大 a所以 陈新贵 法测定不同来源地黄中摔醇的含量 安徽医药a 6 .HPLC [J]. 如果采用紫外检测器检测时a溶剂吸收也会产生很 2012a167:910-911 7 WangXGa Zou YFa Mao YCa et aI. Study on the guaIity standards 大干扰a导致基线噪音加大而影响定量O 综合考虑a for Fufangyimucao CapsuIe [J]. Primary J Chin Mater Meda 本研究采用蒸发光检测器a通过各参数的调整a得到 2000a143:9-11 较好的分离效果O实验结果表明a本研究建立的高效 8 Huang OMa Cao ZOa Ding MG. Determination of Notoginsenoside 液相色谱法测定复方益母草胶囊中的盐酸水苏碱\ R1aGinsenoside Rg1 in Xinkeshu capsuIe by HPLC-ELSD[J]. 阿魏酸\摔醇\麦角舀昔的含量测定方法a能够快速\ Chin J Mod AppI Pharma2011a288:770-773 李建芳a黄劲通 法测定益母草膏中盐酸水苏碱的含量 有效地分析复方益母胶囊方药中盐酸水苏碱\阿魏 9 .HPLC [J]. 广西中医学院学报a2012a151:58-59 酸\摔醇\麦角舀昔的含量O 收稿:!"#3$03-13 [7~9] 本实验在流动相系统的考察中a参考文献 比 万方数据