下载

0下载券

加入VIP
  • 专属下载特权
  • 现金文档折扣购买
  • VIP免费专区
  • 千万文档免费下载

上传资料

关闭

关闭

关闭

封号提示

内容

首页 【word】 改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较

【word】 改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较.doc

【word】 改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄…

朱丹桂
2017-12-11 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《【word】 改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较doc》,可适用于综合领域

【word】改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较第卷第期年月甘肃科技GansuScienceandTechnology)fJan改良Lowry法和Bradford法测定O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较马志鹏,潘倩,韦雪玲,杨艳芳,麻红霞,张军,刘西兰,王超英(中农威特生物科技股份有限公司,甘肃兰州)摘要:通过采用考马斯亮蓝法(Bradford)和改良Lowry法,对O型蹄疫病毒灭活抗原总蛋白浓度测定结果的比较表明,改良Lowry法能够更加精确,真实地反映型蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量关键词:总蛋白灭活抗原测定方法中图分类号:$口蹄疫疫苗生产过程,口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量偏高,则提示疫苗中杂蛋白较多而抗原纯净度较差,导致疫苗注射后引起动物体温持续升高,食欲减退或废食等副反应,严重的可引起休克,流产甚至死亡等因此,控制口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量,提高S与总蛋白含量比,可以降低疫苗的副反应,保证疫苗的安全性,提高疫苗质量总蛋白的检测方法主要有凯氏定氮法,双缩脲法,紫外吸收法,考马斯亮蓝法(Bradford)及Lowry法等,其中Bradford法和改良Lowry法最为简便快速材料与方法试剂考马斯亮蓝试剂(国药集团化学试剂有限公司)考马斯亮蓝G一mg溶于m乙醇中,加m磷酸,用纯水稀释至ml,滤纸过滤最终试剂中含(WV)考马斯亮蓝G一,(wV)乙醇,(WV)磷酸…mgml牛血清标准蛋白BSA(Thermo)molLNaCl试液改良Lowry蛋白分析试剂盒(Therno)器材混匀仪,GeneQuantTM分光光度计(英国拜尔控Bioehrom公司)样品批车间倍浓缩FMDOMYABY灭活抗原液样品Bradford法标准曲线制备分别取ul的molLNaC试液和mgml牛血清标准蛋白BSA稀释成lmgrnl取l个试管对各浓度牛血清标准蛋白BSA按表进行操作表Bradford法标准曲线制备改良Lowry法标准曲线制备)取支mgml牛血清标准蛋白BSA用纯水稀释成ugml,ugml,ugml,ugml,ugml,ugml,ugml,ugml和ugml)取O个试管,按表操作,对BSA各稀释度测定nm吸收度结果IBradford法标准曲线通过BSA各稀释度在nm吸收值,得出Bradford法标准曲线图,得出Bradford法回归方程为Y=x线性相关系数R:(O)显着正相关第期马志鹏等:改良Lowry法和Bradford法测定型LI蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量的比较改良Lowry法标准曲线通过BSA各稀释度在nm吸收值,得出改良Lowry法标准曲线图,得出改良Lowry法回归方程为Y=x,线性相关系数R=(),显着正相关OOB浓脚”gm)图Bradford法测定标准曲线及回归方程BsA浓度l罄hlO型口蹄疫病毒灭抗原液蛋白浓度测定Bradford法测定结果取O型口蹄疫病毒灭活抗原液ml,加ml考马斯亮蓝试剂,摇匀,h内在nm测定吸收值,得出型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量改良Lowry法测定结果分别对口蹄疫病毒灭活抗原液做倍,O倍和倍稀释,取各稀释倍数下的灭活病毒液ul,每隔s加改良Lowry试剂Oml后,室温放置min,再每隔s,加福林酚试剂lOOul,室温放置min后nm测吸收度,得出型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量,见表讨论Bradford法是基于考马斯亮蓝G一存在两种不同的颜色形式的观察,即红色和蓝色考马斯亮蓝染料与蛋白质结合后颜色由红色转变成蓝色,蛋白质一染料复合体具有很高的消光系数,使得在测定蛋白质浓度时灵敏度很高J改良lowry法是基于Gun与肽键结合的观察该结合物使磷钼酸和磷钨酸还原该反应会产生深蓝色复合物,与蛋白质浓度有关在对O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量测定时,改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford图改良Lowry法测定标准曲线及回归方程法表O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白浓度测定结果(下转第页)叭墨v《r螽甘肃科技第卷的培养闭卷与开卷结合对于基本知识,基本概念,基本原理与技术知识,宜采用闭卷考试为了考核学生对所学知识的综合应用,着眼于创造思维能力的培养和训练,应适当采用开卷考试在实施开卷考试时,首先,要让学生有自由联想,自由发挥的时间和空间,避免大量内容充斥其中,致学生应接不暇其次,难度要适当,过于简单达不到培养学生思维的目的,过难则让学生苦思冥想,思维不活跃第三,考试的内容要有一定的启迪性要建立健全统一的阶段性考核体系要在调查研究,总结经验教训的基础上,研究和制订阶段性考试标准对阶段性考试的目的,内容,重新讲授要求学生对考试的结果进行自我总结,自我评价查明学习中的薄弱点和差距,找出自己的优势与不足,调整学习方法,使考试真正起到促进学生学习的作用要特别强调的是教师和管理者应及时对考试的结果进行分析和评价,总结考试中反映的问题,总结教学工作中的成绩和经验,从而提出改进教学的措施,提高教学质量考试是一种独特的活动,有其内在的性质和规律,理应把考试作为独立的研究对象,对之进行深刻研究目前我国对考试的研究还非常薄弱,特别是对创新能力的考评如何让考试在培养创新型人才过程中发挥更大的作用将是一项长期的重要的任务参考文献:方法,形式加以规范,科学制订各门课程统一的考试陈海天,王子莲,肖力中美高等医学教育浅析J办法通过考试改革促进校内教学的改革,真正做中国高等医学教育,():到以考试为指挥棒来指导学校的教学工作的开展程伯基对执行医学教育标准的思考J医学教育要高度重视”试后管理”探索,():虽然现在有考试分析,但考试分析结果没有真丁文龙,李稻,陈红,等构建”探究为基础”的教学模正起到作用应该在考试结束后的第二学期开学式…中国高等医学教育,():时,安排几节课进行真正的考试分析,教师对试卷内丁文龙,李稻,陈红,等医学生创新能力培养的实践容进行深入分析,针对学生共同存在的问题,必要时与探索J中华高等医学教育,():人一|‘v抗仵图改良Lowry法和Bradford法测定结果比较结论测定多肽含量多的生物样品中蛋白质含量时,改良Lowry法能够更加精确,由于灭活抗原液中大量多肽成分的存在故对型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量测定时,改良Lowry法能够更加精确,真实地反映O型口蹄疫病毒灭活抗原总蛋白含量参考文献:李建武生物化学实验原理和方法M北京大学出版社,:BradfodMMArapidandsensitivemethodforthequantitationofmicrogramofproteinutilizingtheprincipleofproteindyebindingJanalBioehem,,:LowryOHProteinmeasurementwiththeFolinPhenolReagentJJBioehem,,:闰萍,杨琦改良Lowry法和Bradford法测定蚯蚓提取物中蛋白质含量的比较J山西医科大学,,():StoscheckCMProteinassaysensitiveatnanogramlevelsJAnalBiochem,,():秋娈,李娜,赵凤林氯磺酚S与蛋白质作用的分光光度研究J分析化学,,():李进,王红,曹启花,等某些变色酸偶氮类染料与蛋白质作用的分光光度研究J化学试剂,,():李娜,李克安,童沈阳偶氮类染料与蛋白质作用的分光光度研究J分析科学,,():

用户评价(0)

关闭

新课改视野下建构高中语文教学实验成果报告(32KB)

抱歉,积分不足下载失败,请稍后再试!

提示

试读已结束,如需要继续阅读或者下载,敬请购买!

评分:

/8

VIP

在线
客服

免费
邮箱

爱问共享资料服务号

扫描关注领取更多福利