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肥料中粪大肠菌群的测定----流程

肥料中粪大肠菌群的测定----流程肥料中粪大肠菌群的测定一:前期准备一次性帽子、口罩、脚套 1,移液管{10ml 量筒100ml}160℃,4h 玻璃珠160℃,4h 三角瓶160℃,4h 培养皿160℃,4h 2,乳糖胆盐发酵培养基(用于乳糖发酵)115℃,15min 乳糖发酵培养基(用于复发酵)115℃,15min 伊红美蓝培养基(用于分离培养)121℃,15min 无菌水121℃,15min 二:实验过程无菌条件下进行: 10.0g固体样品/10ml液体样品 ↓ 三角瓶(带玻璃珠,90ml无菌水)1:10=10-...

肥料中粪大肠菌群的测定一:前期准备一次性帽子、口罩、脚套 1,移液管{10ml 量筒100ml}160℃,4h 玻璃珠160℃,4h 三角瓶160℃,4h 培养皿160℃,4h 2,乳糖胆盐发酵培养基(用于乳糖发酵)115℃,15min 乳糖发酵培养基(用于复发酵)115℃,15min 伊红美蓝培养基(用于分离培养)121℃,15min 无菌水121℃,15min 二:实验过程无菌条件下进行: 10.0g固体样品/10ml液体样品 ↓ 三角瓶(带玻璃珠,90ml无菌水)1:10=10-1 ↓ 200r/min振荡30min ↓ 吸取10-1—5ml,加入45ml无菌水(提前准备)1:100=10-2 ↓ 吸取吸取10-2—5ml,加入45ml无菌水(提前准备)1:1000=10-3 ↓ ……依次稀释得到10-4,10-5等浓度稀释液(每个稀释度必须更换无菌移液管) ↓ 选取三个连续适宜稀释液,分别吸取1.0ml加入到乳糖胆盐发酵管内(装有乳糖胆盐发酵培养基)(每一稀释度接种3支发酵管) ↓ 培养箱45℃,24h ↓ 不产酸,不产气,为粪大肠菌群阴性→实验终止→<3 结果:产酸,颜色变;产气,导管有气泡 ↓ 分离培养:从产酸产气或只产酸的发酵管中挑取发酵液在伊红美蓝培养基平板上划线 ↓ 培养箱36℃,18-24h ↓ 证实实验:无菌落→实验终止→<3 有菌落,进行革兰氏染色。染色反应阳性者(紫色)→实验终止→<3 染色反应阴性者(红色)为粪大肠菌群阴性 ↓ 革兰氏阴性无芽孢杆菌,则挑取同样菌落接种在乳糖发酵管中(装有乳糖发酵培养基) ↓ 培养箱44.5℃,24h ↓ 结果,不产气为粪大肠菌群阴性→实验终止→<3 产气为粪大肠菌群阳性 ↓ 根据粪大肠菌群阳性发酵管数,查MPN检索表 ,得出每克(毫升)肥料样品中的粪大肠菌群数

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