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血红蛋白的提取和分离.doc

血红蛋白的提取和分离

赵思海
2019-03-24 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《血红蛋白的提取和分离doc》,可适用于高中教育领域

专题 DNA和蛋白质技术课题 血红蛋白的提取和分离【学习目标】、简述蛋白质提取和分离的基本原理、理解蛋白质提取与分离的实验操作过程【重点与难点】重点:蛋白质提取和分离的基本原理难点:蛋白质提取与分离的实验操作(凝胶色谱操作)过程【自主学习内容一】基础知识(记忆).凝胶色谱法: 凝胶色谱法也称做     是根据         分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由        构成的多孔球体在小球体内部有许多贯穿的通道相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时的速度不同相对分子质量较小的蛋白质由于能够          路程较 移动速度  而相对分子质量较大的的蛋白质         只能在      移动路程  移动速度   。.缓冲液  缓冲液通常是由~种缓冲剂(如NaHCO、(NH)SO)溶解于水中配制而成其作用是                        。.电泳: 电泳是指                电泳利用了待分离样品中各分子       以及           使带电分子产生不同的   从而实现样品中各种分子的分离。两种常用的电泳方法是      和         。在测定蛋白质分子量时通常使用                   其中SDS的作用是                           。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于它         以及          等因素。【自主学习内容二】实验操作(凝胶色谱法)蛋白质的提取和分离 一般分四步:    、    、    和     。样品处理()红细胞的洗涤:洗涤红细胞的目的是                  采集的血样要及时通过采用        的方法使红液分层用胶头吸管吸出上层透明的黄色  将下层    红细胞倒入烧杯再加入       缓慢搅拌    低速离心如此重复三次直到       表明红细胞忆洗涤干净。注意:离心转速及离心时间不能过长否则              达不到分离效果。()血红蛋白的释放:原理是当外界溶液浓度低于细胞内液浓度时细胞  红细胞由于没有   的保护而    释放出血红蛋白使用的试剂是       。()分离血红蛋白溶液:将搅拌好的混合溶液离心后试管中的溶液分为层。第一层为无色透明的    第层为白色薄层固体是     第层是红色透明的液体这是       第层是红细胞破碎物沉淀物(其他杂质呈   色)。将试管中的液体用滤纸过滤除去        于分液漏斗中静置片刻后分出  层的红色透明液体。()透析:取mL的血红蛋白溶液装入    中将透析袋放入盛有mL的物质量浓度为       中(pH为   )透析h。透析可以去除样品中     的杂质或用于           。.凝胶色谱操作首先要               第二步是            因为                因此装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需的凝胶量。在装填凝胶柱时不得有    避免影响分离效果第三步是        。课内探究学案【知识链接】.血红蛋白存在于何种细胞?其特性和作用分别是什么?.为何不选用鸡血做实验材料?分离不同种类蛋白质的依据是什么?【合作探究】.凝胶色谱分离蛋白质的原理是怎样的?根据凝胶色谱分离的原理分析在装填凝胶时要紧密、均匀的原因。【学习反思】典题检测.凝胶色谱法可以有效的分离蛋白质的根据是(  )A.分子的大小 B.相对分子质量的大小  C.带电荷的多少  D.溶解度.利用凝胶色谱法分离蛋白质最先洗脱的蛋白质特点是(  )A.相对分子质量大的 B.溶解度高的 C.相对分子质量小的 D.所带电荷多的凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是(  )A.糖类化合物   B脂质  C蛋白质    D核酸.相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个(  ).用凝胶色谱法分离蛋白质时分子量大的蛋白质  (  )A.路程较长移动速度较慢   B.路程较长移动速度较快C.路程较短移动速度较慢   D.路程较短移动速度较快.能进入凝胶内部通道的蛋白质是指 (  )A.相对分子质量大的 B.吸附性高的 C.相对分子质量小的   D.溶解度低的.在对蛋白质进行洗脱时使用的试剂是A.蒸馏水  B.生理盐水  C.缓冲液   D.饱和磷酸盐溶液.缓冲液的作用是在一定范围内抵制外界的影响来维持下列哪一项状态基本不变的A.温度   B.pH     C.渗透压    D.氧气浓度.初步分离血红蛋白的实验中用到的缓冲溶液为 (  )A.HCO一NaHCO缓冲液      B.NHOHNHCl缓冲液C.CHCOOHCHCOONa缓冲液   D.HPO缓冲液.蛋白质提取和分离分为哪几步  (  )A样品处理、凝胶色谱操作、SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定    D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定血红蛋白因含有什么物质而呈红色 (  )A.O  B.CO  C.Mg  D.血红素将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时第二层是(  )A甲苯  B血红蛋白水溶液 C脂溶性物质的沉淀层  D其他杂质的沉淀.下列说法不正确的是(   )A血红蛋白在释放时加蒸馏水到原血液的体积再加%体积的甲苯充分搅拌B血红蛋白溶液离心后分为层第层为白色薄层固体C血红蛋白溶液离心后分为层第层为暗红色沉淀物D血红蛋白溶液离心后分为层第层为红色透明液体这是血红蛋白的水溶液课后作业下列操作正确的是(  )A分离红细胞时采用低速长时间离心 B红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D透析时要用mmoll的磷酸缓冲液透析h.使用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺电泳过程中不同蛋白质的迁移速度完全取决于A.电荷的多少  B.分子的大小  C.肽链的多少  D.分子形状的差异.洗涤红细胞的目的是  (  )A.去除血清  B.去除杂蛋白  C.除去血小板  D.除去水.洗涤红细胞时分离所用的方法为 (  )A.低速长时间离心 B.低速短时间离心 C.高速长时间离心 D.高速短时间离心.SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是( )A.增大蛋白质的相对分子质量     B.改变蛋白质的形状C.掩盖不同种蛋白质问的电荷差别   D.减少蛋白质的相对分子质量.电泳时带电粒子在电场的作用下移动所向的电极的方向与其所带电荷是  (  )A.相同  B.相反  C.相对  D.相向.样品的加入和洗脱的操作不正确的是(  )A加样前打开色谱柱下端的流出口使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B加样后打开下端出口使样品渗入凝胶床内C等样品完全进入凝胶层后关闭下端出口D用吸管小心的将ml透析后的样品加到色谱柱的顶端不要破坏凝胶面.下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述错误的是(  )A样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质此为样品的粗提取C可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去即样品的纯化D可通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度.下面关于对血红蛋白提取和分离的样品的处理措施中正确的是  (  )A.采集血样后要高速短时问离心获得血细胞B.洗涤三次后如上清液仍有黄色可增加洗涤次数否则血浆蛋白无法除净。C.在蒸馏水和甲苯的作用下细胞破裂释放出血红蛋白D.释放血红蛋白后再经过离心就可以使血红蛋白和其他杂质分离开来.下列有关提取和分离血红蛋白的过程的叙述中正确的是  (  )A.样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B.通过透析可以去除样品中相对分子质量较大的杂质此为样品的粗提取C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去即样品的纯化D.可通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度

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