兔儿伞不同溶剂提取物的体外抗氧化作用研究【分享】

兔儿伞不同溶剂提取物的体外抗氧化作用研究【分享】 兔儿伞不同溶剂提取物的体外抗氧化作用研究 作者:李加林，刘丽华，吴素珍，范启兰，陈水亲 【摘要】目的探讨兔儿伞乙醇、丙酮、醋酸乙酯、水提取物体外抗氧化能力。 方法利用微波辅助提取法分别得到了兔儿伞乙醇提取物、丙酮提取物、醋酸乙 酯提取物和水提取物，采用Fonton反应体系产生羟基自由基和邻苯三酚自氧化 产生超氧阴离子自由基。结果4种提取物对羟自由基、超氧阴离子岛由基(02- •)均有清除作用，其中以乙醇提取物的效果最佳。结论兔儿伞可作为抗氧化 物质资源，有一定的开发利用价值。 【关键词】兔儿伞;自由基;抗氧化活性 0由基(free radical)也称活性氧，很多情况下，它都缺少一个电 子，处丁•不稳定的状态。不稳定的自由基会从周围的物质中夺取电子配对，这 种行为就是自由基的氧化作用。被夺走电子的物质，又去抢夺其它物质的电子。 就这样，争夺电子的连锁反应逐渐扩散到各处，细胞一个一个被氧化，从而失 去了其正常功能。越来越多的科学研究证实自由基是人体疾病和衰老的直接制 造者。人只要活着，自由基就在不断生成。fi由基一旦大量产生，超过身体内 酶所能处理的程度，人的健康就会亮起红灯，出现癌症、动脉硬化、糖尿病、 白内障、风湿性关节炎、巴金森氏症等多种疾病[1]。动物实验也指出，寿命 的长短与自由基的产生及人体内抗氧化剂的浓度确实有密切的关联;流行病学 与临床研究 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 也显示，如果人体内有足够的抗氧化剂，则可降低多种疾病的 罹患几率。然而研究发现，合成抗氧化剂对人体具有潜在的威胁，如BHA可造 成大鼠前胃增生、乳状瘤甚至癌变，在日本已被禁用;BHT能使人的W1-38胚胎 细胞分裂后期发生阳性的染色体异常，甚至导致死亡，因此在美国和日本已经 停止使用。随着消费者自身健康意识的提高，天然抗氧化剂日益受到重视[2? 4]。因此，研究开发广谱、高效、安全的天然抗氧化剂，已经成为当今的研究 热点之一。 兔儿伞Syneilesis aconitifolia (Bunge) Maxim.为菊科兔儿伞属多年生 草本植物[5]，含有黄酮、维生素、多糖等多种保健活性成分和营养成分，其 嫩叶和幼苗在我国民间许多地方都作为一种药食两用食品，很受欢迎[6]。研 究 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明兔儿伞中黄酮类化合物及生物碱含量较高[7, 8]，现代药理学对其抗 炎镇痛作用进行了探讨[9]，而对兔儿伞进行自由基清除的抗氧化研究未见报 道，本文首次对兔儿伞提取物(水提取物、乙醇提取物、丙酮提取物和醋酸乙 酯提取物)的抗氧化活性进行了探讨，以期为兔儿伞作为一种天然的抗氧化物 得到推广和利用。 1材料与仪器 兔儿伞由安徽师范大学张中信老师于2007-06采自安徽黄山，经安徽师范 大学张小平教授鉴定为兔儿伞Syneilesis aconitifolia (Bunge) Maxim. ? 1.2仪器与试剂 WF-4000微波快速反应系统(上海屹尧 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 仪器有限公司);UV1900PPC紫 外可见分光光度计(上海亚研电子科技有限公司)电子天平(北京赛多利斯天 ; 平仪器厂)。所有试剂均为分析纯。 2方法 2. 1兔儿伞不同溶剂提取物制备将一定量的兔儿伞干燥粉末置于微波反应 釜中，分别以水、乙醇、丙酮、醋酸乙酯为溶剂，料液比为1:60，微波功率 800 W，提取3次，15 min/次，合并提取液，减压浓缩，真空干燥备用。 2.2羟自由基(• 0H)的清除能力采用亚铁离子催化H202产生• 0H(Fonton 反应)的方法[10, 11]。取0.75 mol/L邻二氣菲溶液1 ml，PBS液2 ml和蒸 馏水1 ml，充分混匀后，加0.75 mmol/L硫酸亚铁I ml,混匀，加0. 01%的 H202 1 ml, 37?C水浴60 min,以PBS液调零，536 run处测定吸光度，其值记 SAP;用1 ml蒸馏水代替1 ml H202,以PBS调零，测得吸光度记为AB;用1 ral试样代替1 ml蒸馏水，以同浓度不加H202的加试样管调零，测得吸光度记 为 As。• 0H 清除率(d%)计算 公式 小学单位换算公式大全免费下载公式下载行测公式大全下载excel公式下载逻辑回归公式下载 :d (%) = (As-AP) / (AB-Ap) X100%。 2.3超氧阴离子自由基(02- •)清除能力取0.05 mol/L pH 8.2的Tris 一 HC1缓冲液4. 5 mol于试管中，置25?C水浴预热20 min,加入供试样品 0. 1ml，2.5 mmol/L邻苯三酚0. 4 ml,混匀后在25?C水浴反应4 min加8 mmol/L盐酸两滴终止反应，(299?1) nm处测定吸光度，空白组以0. 1 ml蒸 馏水代替供试样品，并按下式计算清除率[12]。d%= (A空白-A样品)/A空白 X100%。 3结果 3. 1不同溶剂提取物对羟自由基的清除作用兔儿伞不同溶剂提取物对• 0H 的清除作用如图1所示。乙醇提取物对羟自由基清除率的回归方程是:Y= 1.576 79+ 13. 629 04X (R= 0.996 69)，丙酮提取物对羟自由基清除率的回 归方程是:Y=0. 43101 + 9. 935 53X (R= 0.999 8)，水提取物对羟自由基清 除率的回归方程是Y=0. 007+5. 033 5X (R=0. 997 36)，醋酸乙酯提取物对羟自 由基清除率的回归方程是Y= 6. 729+5. 614 5X (R=0. 969 9)，由回归方程可求 出兔儿伞的乙醇、丙酮、水、醋酸乙酯提取物对*0H清除率为50%时的提取物 浓度(IC50)分别为:3.55’ 4.99，9.93，7.70 mg/ml。由此可见，4种溶剂 提取物对羟自由基均有一定的清除作用，其中乙醇提取物对羟自由基的清除效 果最好。 2. 2不同溶剂提取物对超氧阴离子自由基的清除作用兔儿伞不同溶剂提取 物对02- •的清除作用如图2所示。乙醇提取物对超氧阴离子自由基的清除率 回归方程是:Y= 1.972 04+14. 423 11X (R=0. 996 5)，丙酮提取物对超氧阴 离子自由基的清除率回归方程是:Y=3.492 98 + 10.304 75X (R=0. 992 44)， 水提取物对超氧阴离子自由基的清除率回归方程是Y=6. 24X-1. 02 (R=0. 999 08)，醋酸乙酯提取物对超氧阴离子自由基的清除率回归方程是Y= 8. 748+6. 823X (R=0. 971 74),由曲线方程可求出兔儿伞的乙醇、丙酮、水、 醋酸乙酯提取物对超氧阴离子自由基的清除率为50%时的提取物浓度分别为: 3.33，4.51, 8.18，4. 94 mg/ml。由此可见，兔儿伞4种提取物对超氧阴离子 都有一定的清除作用，其中乙醇提取物对超氧阴离子&由基的清除效果最好。 图2兔儿伞不同溶剂提取物对超氧阴离子自由基的清除作用 4讨论 人体内的氧自由基如游离羟基、超氧阴离子等的过量产生，是人体细胞衰 老凋亡和癌变的重要原因。.OH是毒性最大的活性氧，它可以加成至碱基双键 中，破坏碱基，从而破坏细胞内DNA的结构，导致基因突变[13]。研究发现 黄酮类物质、花色苷等可作为抗氧化药物对心血管起保护作用[14]。研究发 现兔儿伞4种提取物均有一定的清除02 •和• 0H的作用，这可能与其含有 的黄酮类化合物有关，其中乙醇提取物对自由基的清除效果最好，可能是因为 以乙醇为提取剂时其中黄酮类化合物含量最高所致。因此，兔儿伞作为一种潜 在的抗氧化功能食品有待进一步深入研究。 【参考文献】 1] Bandoniene D. Pukalskas A，Venskutonis P R et al. Preliminary Screening of Antioxidant Activity of Some Plant Ex Rapeseed Oil [J] . Food Research International, 2000，33 (9) :785. [2] Pan Y M, Liang Y, Wang H S et al. Antioxidant Activity of Several Chinese Medicine Herbs [J] . Food Chemistry, 2004，88:347. C3]潘英明，梁英，黄志清，等.苏木、紫草等5种中草药抗氧化活性的 研究[J].天然产物研究与开发，2004，16 (1) : 43. [4] Shahidi F, Wanasundara P K，Phenolic Antioxidants [J] . CRC Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 1992， 32 (1) : 67. [5] 中科院中国植物志编辑委员会.中国植物志，第七十七卷，第一分册 [M].北京:科学出版社，1999:90. [6] 徐践.野菜漫谈(六)[J].农业工程技术，2004，3:43. [7] Ferdinand Bohlmann, Michael Grenz. Terpenglucoside aus Syneilesis aconitifolia [J] . Phytochemistry, 1977， 16 (7): 1057. [8] Roeder E，Wiedenfeld H，Liu K, Kroger R. Pyrrolizidine alkaloids from Syneilesis aconitifolia [J] . Planta Med, 1995， [9] 潘国良，张志梅.兔儿伞镇痛抗炎作用的研究[J].现代中西医结合 杂志，2002, 11(20) : 1985. [10] 萧华山，何文锦，傅文庆.一种用分光光度计检测氧自由基的新方法 [J].生物化学与生物物理进展，1999，26(2): 180. [11] 王晓春，龙苏，徐克前.车前草水煎液对氧自由基清除作用的研究 [J].实用预防医学，2002, 9 (2): 139. [12] 秦小明，林华娟，宁恩创，等.金花茶叶水提物的抗氧化活性研究 [J].食品科技，2008, 33 (2) : 189. [13] 陈乃东，周守标，王春景，等.春花胡枝子黄酮类化合物的提取及其 清除羟自由基作用的研究[J].食品科学，2007，28 (1) : 86. [14] 焦士蓉，马力，黄承钰，等.枳实提取物的体外抗氧化作用研究 [J].中药材，2008, 31 (1) : 113