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鱼外周血淋巴细胞分离试验方案

鱼外周血淋巴细胞分离试验方案鱼外周血淋巴细胞分离试验方案鱼外周血液淋巴细胞分离和观察试验方案试验动物:鲫鱼试剂:5,枸橼酸钠溶液、Hank’S液、吉姆萨瑞士染色液、人淋巴细胞分离液一、采血通过尾静脉采血5 mL，添加0.5 mL 5,枸橼酸钠溶液抗凝剂. 二、外周血淋巴细胞的分离和纯化取抗凝血2mL与Hank’S液1:1(也有2:1的比例)稀释混匀后，以2 mL/管的量分别置于玻璃离心管中，用移液枪吸取稀释血液2 mL或4ml，沿管壁缓缓的叠加到2ml人淋巴细胞分离液界面上，注意不要破坏分离液界面，以2 000 r,mi...

鱼外周血淋巴细胞分离试验方案鱼外周血液淋巴细胞分离和观察试验方案试验动物:鲫鱼试剂:5,枸橼酸钠溶液、Hank’S液、吉姆萨瑞士染色液、人淋巴细胞分离液一、采血通过尾静脉采血5 mL，添加0.5 mL 5,枸橼酸钠溶液抗凝剂. 二、外周血淋巴细胞的分离和纯化取抗凝血2mL与Hank’S液1:1(也有2:1的比例)稀释混匀后，以2 mL/管的量分别置于玻璃离心管中，用移液枪吸取稀释血液2 mL或4ml，沿管壁缓缓的叠加到2ml人淋巴细胞分离液界面上，注意不要破坏分离液界面，以2 000 r,min离心35 min后吸取淋巴细胞层。三、淋巴细胞吉姆萨瑞士(Giemsa)染 1、取涂片、自然干燥。 2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片，染1-2分钟。 3、滴加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)，轻轻晃动玻片, 与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀，染色3-5分钟。 4、水洗、吸干、镜检。 5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明，细胞核着色呈深浅不同的紫红色，胞浆呈浅红色，胞浆中颗粒区分明显。

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