皮肤成纤维细胞培养的体会

皮肤成纤维细胞培养的体会皮肤成纤维细胞培养的体会附表培养液的成份及含量定性好, 并能够表达其来源个体的基因组中 ( ) 成份含量浓度‰ 与代谢有关的绝大多数基因, 利用理化方法 316751675 3g H am F 10 予以检测。此外皮肤组织取材方便、安全, 易小牛血清 200200 m l 为患者接受, 可以动态观察, 细胞株可储存备 23832383 g 用, 故有着重要的实验价值, 尤其在先天性酶 H ep e s 谷氨酰胺 01150115 g 缺陷病的诊断中有无法代替的意义。但本技碳酸氢钠 014501...

皮肤成纤维细胞培养的体会附表培养液的成份及含量定性好, 并能够表达其来源个体的基因组中 ( ) 成份含量浓度‰ 与代谢有关的绝大多数基因, 利用理化方法 316751675 3g H am F 10 予以检测。此外皮肤组织取材方便、安全, 易小牛血清 200200 m l 为患者接受, 可以动态观察, 细胞株可储存备 23832383 g 用, 故有着重要的实验价值, 尤其在先天性酶 H ep e s 谷氨酰胺 01150115 g 缺陷病的诊断中有无法代替的意义。但本技碳酸氢钠 01450145 g 术在临床诊断方面应用仍不普遍, 除因技术青、链霉素 ( )15 151: 1操作精细外, 实验设备要求高、实验材料昂 m l 贵、来源困难也限制了该技术的发展。因此我 2 结果与讨论们在培养方法上进行探索, 力求寻找节约费用、简化设备的途径, 现将培养中的体会报道我们采用普通培养箱及简化培养液做了如下。 20 份皮肤培养, 其中培养成功 18 份, 成功率为 90% , 且培养中多次传代, 最多传至 19 1 材料与方法代, 并选择合适时机进行了分析。材料: 对遗传咨询门诊疑为征的患者〔2〕T u rne r’ s 文献报告成纤维细胞培养多在 CO 2取前臂内侧皮肤, 或手术切口部位皮肤。取材前用清培养箱内进行, 培养箱内环境为浓度CO 2 水洗净, 酒精消毒, 待干后用取皮器取皮肤表皮, 不要深至皮下组织, 以取皮后皮下组织无出血最为恰 5% , 湿度 90% , 培养瓶为开放式。但目前我当, 立即将组织浸入 + 抗菌素溶液中浸泡H am F 10 们国内多数实验室不具备培养箱, 尤其CO 2 1送实验室。h 临床单位更是因条件限制不能普及, 也就限方法: 将组织块取出, 用溶液冲洗两次, 在高 F 10 制了组织培养技术的应用。我们根据 H ep e s 3 压消毒的平皿中, 用眼科剪将组织剪或 2大的mm 可调节细胞代谢的值, 在普通培养箱内 pH 组织块, 贴于含 215培养液的组织培养瓶中, 使瓶m l 密闭式培养, 成功进行了皮肤成纤维细胞培立置 4, 6, 再平置, 以保证组织块不致脱壁。培养, 并传 19 代, 我们用普通培养箱代替了 h 培养箱。CO 2 养液: 可选择 + 小牛血清+ +H am F 10 H ep e s 在培养剂选择上, 多数单位在培养中添抗菌素, 调为 7. 2, 7. 4, 其成份见附表。 pH 加特殊的细胞生长因子, 而该因子价格昂贵, 培养箱: 采用普通恒温培养箱闭式培养。来源困难。我们应用了普通培养剂, 同样取得观察方法: 待接种后第 5, 给予换液, 容积为d了良好的培养结果, 细胞生长时间及可利用 25的培养瓶加 215培养液, 40的培养瓶内 m l m l m l 加 4的培养液。一般 7, 10开始长出成纤维细m l d 多, 霉菌性阴道炎的发病率逐渐增经 1 个疗程治疗后复诊, 并于月经后复查, 判断治疗效果。在接受治疗的 116 例中,1995 年 6 月至 1996 年 12 月采用自制药有限公司生产的达克宁栓治疗痊愈 112 例, 痊愈率 9615% , 有效 4 例, 有效道炎 116 例, 取得了很好的效果, 现 100% , 无效 0 例。治愈后 1 周复查第 1 次, 以如下: 后每次月经后复查 1 次, 连续 3 个月, 经随访 () 观察, 2 个月内复发 8 例619% , 3 个月内复与方法() 发者 4 例314% , 总复发率 10% 。复发后再象: 门诊病人。全部病例均有程度不等的用达克宁仍然有效。瘙痒、灼痛、尿频、尿痛、白带增多, 妇检: 霉菌性阴道炎是由阴道念珠菌感染所致, 粘膜充血水肿, 白带呈白色或黄色稠厚豆临床上治疗药物较多, 但复发率较高。达克宁 , 白带化验检出霉菌。药物成份咪康唑能作用于菌体细胞膜, 改变其择: 达克宁栓。达克宁的成份为咪康唑, 通透性, 阻止营养物摄取, 抑制其活性, 导致真含 200。m g 菌死亡, 同时对革兰氏阳性菌也有很强的抗菌方法: 初次就诊时, 用 2% 苏打液冲洗阴力, 对霉菌性阴道炎合并此类细菌的感染, 能将阴道内的分泌物擦干净, 将一枚达克宁短时间内消除症状, 患者用药 1 次即感症状明深处, 以小纱布阻塞阴道口, 以防药液流显减轻。此外, 它还能帮助阴道正常菌群恢复, 取出纱布, 嘱患者于次日晚始每晚用 2%提高抵抗力, 减少复发, 此药耐受性好, 极少数阴道后, 阴道内放一枚达克宁栓, 7 枚为病例有阴道刺激感, 停药后消失。经期停止上药, 治疗期间禁止性生活, 每我院对 116 例霉菌性阴道炎治疗结果表查。明, 该药对治疗霉菌性阴道炎有较好效果, 为定标准 : ?痊愈: 症状消失, 白带镜检霉患者提供了一个疗程短、疗效好、使用方便、有效: 症状减轻, 白带镜检霉菌阴性。?无副作用少的治疗药物。( )1997 年 7 月 18 日收稿轻, 白带镜检霉菌阳性。在培养中最为关键的环节是无菌操参考文献的培养技术, 而设备的简化不仅节夏蓓莉. 培养的皮肤成纤维细胞用于神经遗传病的研1 , 减少了实验材料的费用, 还免去了 ( ) 究. 中华医学遗传学杂志, 1994; 11 6: 358 刘鼎新, 吕证宝. 细胞生物学研究方法与技术 1 北京: 北充气体的烦琐, 为临床单位的 CO 2 2 京医科大学, 中国协和医科大学联合出版, 1990: 6 断特别是先天代谢性疾病的诊断创 ( )1997 年 5 月 27 日收稿, 同年 9 月 26 日修回

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