【doc】感染IBDV雏鸡血液ANAE^+——淋巴细胞比例和IL—2水平的动态变化研究
感染IBDV雏鸡血液ANAE^,——淋巴细
胞比例和IL—2水平的动态变化研究 安徽农业大学,1999,26(2):183—187
JournalofAnhuiAgriculturalUniversity\1fg3—U
感染IBDV雏鸡血液ANAE十一淋巴细胞
比例和IL一2水平的动态变化研究
f陈龙殷定忠
,/庞训胜邹叔和
霹罚翰霜E技禾而话丐动科系,风阳233100)
'8\
摘要研究了经IBD弱毒苗免疫和未免疫的30~59日龄AA鸡在感染传染性法氏囊
病藕毒(IBDV)后血液ANAE一淋巴细胞比例和白细胞介素一2(IL--2)水平动态变化.
结果表明,血液ANAE一淋巴细胞()在攻毒后的头5d内未免疫攻毒鸡(A组)和免 疫攻毒鸡(B纽)明显下降t且A纽比B纽下降的更快,第5天A组明显低于未免疫未攻毒
鸡(c组)tB纽也较C组低,C组没有明显的变化,咀后A和B组均回升,但B组比A组
回升的快一王28d时A和B组均达到或接近攻毒前水平,井接近或高于c组.血泉IL一2
水平A和B组在IBDV攻毒后的头7d内呈连浙下降趋势t但A组下降的曼剧烈,c组无明
显差异性变化,三组相比,B和C纽均高于或明显高于A组,以后A和B组避渐回升.
关键词雏鸡感染IBDVANAE一淋巴细胞IL--2变化七
分类号一$858.
一——,l
淋巴细胞是体内最重要的免疫活性细胞t其中T淋巴细胞在细胞免疫中起重要作 用,T淋巴细胞质中存在酸性非特异性酯酶(Acid一一naphthy[一acetateesterase,
ANAE)t用组织化学染色法可对酯酶部位显色,从而判定T淋巴细胞(即ANAE一淋
巴细胞)所占比例,了解其活性状况口].白细胞介素一2(IL一2)是由活化的T淋巴细
胞产生并促进T淋巴细胞生长的因子,它是保障机体正常免疫功能的关键环节.可以通
过促使某一特定的T细胞群体的克隆性扩增,通过T细胞数目及功能的提高来增强整
体的免疫功能.因此,研究组织器官,细胞或血液中ANAE一淋巴细胞活性和IL一2
水平的变化具有重要意义.
传染性法氏囊病是一种以淋巴组织坏死为主要特征的急性,接触性传染病,以往对 其病原学,流行病学,免疫学,特异诊断和疫苗制备等已进行了广泛研究0],但比较免
疫和未免疫IBD的雏鸡在感染IBD强毒后细胞免疫反应的研究尚少见.郏世民和张登荣
等分别研究过雏鸡感染IBDV前后免疫器官组织中和外周血液中的ANAE阳性淋巴细
胞变化',石放雄等研究过肉鸡神经内分泌免疫网络在IBDV弱毒免疫和强毒感染时发
生的调节机制],本文比较研究了在免疫和未免疫状态下,用IBD强毒感染肉鸡后血液
ANAE阳性淋巴细胞比例和IL一2水平动态变化,旨在揭示IBDV对雏鸡血液某些细胞
?
安徽省自然科学基金资助课题
胨龙.男.1964年生,博士,副教授.收稿日期:1998—05—25
安徽农业大学
免疫反应产生的影响,探讨其在免疫和未免疫状态下鸡IBD发生发展中的变化. 1材料与方法
1.1疫苗IBD弱毒疫苗由南京药械厂提供,批号950537.
,微量琼扩IBD为阴性的AA父母代种鸡所产的蛋孵化.1.2试验鸡取无IBD病史
取
320羽健雏随机分成3组:未免疫攻毒组(A组),免疫攻毒组(B组)和未免疫未攻毒 组(c组),每组40羽,隔离饲养.待鸡15日龄时,B组鸡群接种IBD弱毒苗.27日龄 时,每组随机选取1O羽安装颈静脉插管.
1.3强毒和攻毒试验强毒由本院传染病教研室提供,经确诊为患IBD的当地鸡囊毒,
再经接种健康鸡发病死亡后,采集法氏囊5,10个,按1:3加生理盐水制成匀浆,1500
rpm离心15min,取上清液,按1000U/ml各加青,链霉素混合,一2OC保存备用.在 鸡33日龄时,A,B组鸡用IBD强毒0.5mI滴鼻点跟,C组对照.
1.4血样采集与处理在IBDV感染前1d和感染后1,3,5,7,14,21,28d,每组 由安装颈静脉插管的鸡血样15mI,肝素钠(1:500)抗凝,作血涂片,然后以3000rpm 30min分离血浆,置一2O?冰箱保存待测.
1.5测定指标和方法ANAE一淋巴细胞比例一酸性非特异性酯酶组织化学染色 法j.计数其占淋巴细胞百分率;血浆IL一2放射免疫方法,试剂盒由中国科学院上海原
子核研究所提供.严格按药盒说明书进行.
1.6数据处理以平均值和
标准
excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载
误(Mean4-SEM)表示,用SAS软件对数据作 Studentst检验,方差分析和相关性分析,确定差异显着.
2结果与分析
2.1鸡群表现攻毒后,未免疫攻毒鸡(A组)在第1d未见明显异常,1d后部分鸡表 现轻度临床症状,3d后均出现精神抑郁,战栗,减食,粪便浅白色水样,剖检可见法氏
囊浆膜有谈黄色胶样渗出物,皱壁肥厚增大等与文献报道相一致的IBD临床症状和剖检
变化,整个试验期A组鸡死亡率7.免疫攻毒鸡(B组)和未免疫未攻毒鸡(c组)无 异常表现,剖检未见组织器官有明显变化
2.2感染IBDV雏鸡血液ANAE一淋巴细胞比例动态变化由表1可见,在攻毒后的 头5d内,A组和B组呈逐渐下降,其中A组在攻毒后的第3d就明显降为2o.38? 1.7O,明显低于C组,B组在攻毒后第5d虽有明显下降到2452+1.89,但高于A 组,与C组无明显差异,C组保持在33.06?34.12范围内变动,至第5d为34.56~ 2.13,在攻毒后的第7dA组ANAE一淋巴细胞仍明显低于攻毒前和C组水平,以后 A组和B组均回升,但B比A组回升得更快,在攻毒后第28d时A和B组均达到或接
近攻毒前水平,并接近或高于c组.
2.3感染IBDV雏鸡血浆IL一2水平动态变化表2显示,在攻毒后的头7d内,A组 和B组呈逐渐下降趋势,A组至第5d明显降为2.76~0.24t~g/L,显着低于B组和C 组,B组在攻毒后第7d虽明显下降到3.83士0.14pg/[,但仍显着高于A组,C组保持
在3.88,4.88范围内变化,至第7d为3.88+0.19g/L,明显高于A组,以后A组和 B组均回升,但B比A组回升得更快,在攻毒后第28d时A和B组均达到或接近攻毒前
26卷2期陈龙等感染IBDV雏鸡血液ANAE一淋巴细胞比例和IL--2水平的动态变化研究185
水平,并接近或高于C组.
表1感染IBDV雏鸡血液ANAE,淋巴细胞比例()动态变化
Tabte1Changeofb]oodANAE--lymphocytesratio()inchickeninfectedwithIBDV
(n一10,Mean?SEM)
注:表中同一到以A,B,C标记者差异极显着(P<O.01),a,b.c标记者差异显着(P<O.05),相同字
母标记者差异不显着(>0.05).下同;*<C0.05*<0.01,与攻毒前1d(30日龄)比
较=
表2感染IBDV雏鸡血浆IL--2(g/L)水平动态变化
Table2Chan~eofplasmaIL--2(/L)levelinchickeninfectedwithIBDV(n=l0,Mean~SEM)
注:*表示P<o.05,**表示P<001,***表示P<0.001,与攻毒前1d{30日龄)比较 24ANAE一淋巴细胞比例与IL--2水平闻的相关性分析发现只有A组的ANAEt 一
淋巴细胞()与IL一2呈显着正相关,相关系数r为0.7322(P<0.05). 3讨论
大量的研究已证实,IBDV经口感染后可经血液和粘膜上皮侵害鸡的淋巴系统,特别
是体液免疫的中枢器官法氏囊,引起其内的淋巴组织坏死和枯竭,导致体液免疫抑制;还
可危害鸡胸腺和脾脏,引起细胞免疫抑制'.龙塔等实验研究发现.21日龄雏鸡接 种IBDV强毒后3,7d,法氏囊,胸腺,脾脏,盲肠扁桃体等淋巴细胞组织中IBDV中荧
安徽农业大学
光细胞的出现达到高峰,此时这些淋巴细胞的坏死亦达到最严重的程度,胸腺淋巴细胞
坏死可持续到攻毒后10d_6.本研究发现,在攻毒1d后A组外周血ANAE一淋巴细胞
()就明显下降,B组也呈下降趋势,c组投有类似的变化,到攻毒后第5d时,A和 B组均降到最低值,A组与c组相比差异显着,说明IBDV严重侵害T淋巴细胞活性,并
从另一个角度论证了龙塔等人的研究结果.
本研究显示,在攻毒后的头7d内A和B组血浆IL一2活性呈下降趋势,A比B组 下降的更剧烈,在5,7d降到最低值,而B与c组的水平无明显差异;相关性分析表明,
只有A组ANAE一淋巴细胞()与IL一2呈显着的正相关提示IBDV侵人体内后,
IL一2话性水平的显着下降与活性的T淋巴细胞大量减少有直接的关系. 研究结果还表明,整个实验期,A组ANAE一淋巴细胞()与IL--2水平比B组 和c组下降的更剧烈tB组始终高于或明显高于A组且回升的更快,提示疫苗免疫具有
保护作用.免疫鸡因自身体内抗体的保护作用,淋巴细胞的损害可能较轻,所以很快
ANAE一淋巴细胞()与IL一2水平即恢复
比较研究充分证明:接种弱毒疫苗以提高机体免疫力,可以减轻IBDV对鸡免疫系统
特别是淋巴组织细胞造成的严重危害,从而维持ANAE一淋巴细胞()与IL--2水平 在高阈值上因此,重视预防免疫,制定最佳,有效的免疫
方案
气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载
,将是防制恶性传染病 的最为积极的措施之一
参考文献
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26卷2期胨龙等感染IBDV雏鸡血液ANAE一淋巴细胞比例和IL--2水平的动态
变化研究187
StudyonChangesofBloodANAE,LymphocyteRatio
andIL一2LevelinChickenInfectedwithInfectious
BursalDiseaseVirus(IBDV)
ChenLongYinDingzhongPangXunshengZbouShuhe
(DepartmentofAnima[Science,AnhuiAgrotechnicatTeachersCollege,Fengyang233100)
AbstractChangesofbloodANAE一lymphocyte()andIL一2levelsinbothimmu
nizedandnon—immunizedArborAcres(AA)chickenswithattenuatedLBDVwerestudied aftertheywereinfectedwithvirulentIBDV.TheresultsshowedthatBloodANAE+一lym—
phocyte()decreasedsignificantlyinbothnon—immunizedchickens(groupA)andimmu
nizedchickens(groupB)duringthefirst5daysofinfection,andgroupA'Sreducedmore quicklythangroupB'S,whilenon—
immunizeduninfectedchickens(groupC)keptaconstant
level,whichwerehigherthanthatingroupAandB.ThengroupAandBbothbeganto rise,butgroupBrosemuchmorerapidlythangroupA,andtheirlevelhadrecoveredtonor
mal28dlater.PlasmaIL一2levelingroupAandBtendedtodeereasegradually.while
therewasnoobviouschangeingroupC.
KwordsChiekenInfectionInfectiousbursaIdiseasevirus(1BDV)ANAE
lymphocyteIL——2
本刊1999年第1期第64~65页表1和表2有几处错误,特作更正,并向读者致歉.
表1和表2中"太阳灯"应改为"太阳光","32h光猝灭效率"应改为"32h光敏
化效率".
表1中一级动力学方程由上至下依次改为
C一1.6792e一0L
C一20104e一00at
C一1.9135e一00
C.一1.9724e一00''
C一1.6136e一00
C.一1.6228e一001
C—l7781e….
C.一1.8030e
C一1.8122e一5
C=1.9116e'
C一1.911】e一0B
C=1.9l57e
C=0.9480e..!
C一08890e一.0
表2中一级动力学方程由上至下依次为
C.一1.6793e一0L
一1.8576etl?6t C.
0—1.9080e
C一2.1183e圳0
C=1.9789e
C一1.8618e…"
C一1.889"…L0
C一1.8030e0 C一1.89l一.'" C.一1.8667e一.. C一1.8303e一00n C.一l8905e一..'. C.一0.948le-0o07?I C一09433e..'