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丹参酮和维生素E抗皮肤衰老作用的比较研究.pdf

丹参酮和维生素E抗皮肤衰老作用的比较研究

chemidoctor
2012-10-26 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《丹参酮和维生素E抗皮肤衰老作用的比较研究pdf》,可适用于领域

至堑亘篁叁塑堡生苤兰廛重量堡旦筮避窒箜塑丹参酮和维生素E抗皮肤衰老作用的比较研究王红丽吴铁吴志华朱永湘郭其杰(广东药学院临床医学系广东广州)·l·摘要目的观察丹参酮抗皮肤衰老作用并与维生素E进行比较。方法昆明种小鼠每日颈背部皮下注射D一半乳糖(mg.kg.d)造成小鼠衰老模型同时灌服丹参酮(mg/kg·d)或维生素E(mg/kg·d)d后测定小鼠全血~M(CAT)谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)~J和背部皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SD)活力、过氧化脂质(LP)代谢产物丙二醛(MDA)及皮肤羟脯氨酸含量。结果丹参酮可使衰老模型小鼠皮肤中SD活力、羟脯氨酸含量显著升高较维生素E组明显皮肤MDA含量显著降低但不及维生素E组改变显著。结论丹参酮、维生素E均有显著抗皮肤衰老作用丹参酮在提高皮肤抗氧化酶活力和增强成纤维细胞活性方面较维生素E明显而清除皮肤中脂质过氧化代谢产物方面则不及维生素E显著。关键词皮肤衰老D一半乳糖丹参酮中图分类号R.(文献标识码A文章编号()丹参酮是唇形科植物丹参(SalviamiltorrhizaBge)的有效成分有抗炎、抗菌、抗凝血等功效已证明有明显提高老龄小鼠肝中超氧化物歧化酶(SOD)活力和降低过氧化脂质(LP)含量作用“。维生素E(VE)是公认的抗氧化剂可抑制生物膜中脂质过氧化过程有明显抗衰老作用。我们在D一半乳糖所致小鼠衰老模型基础上分别灌服丹参酮或VE比较二者对衰老小鼠皮肤中某些抗衰老指标的影响。材料与方法.动物月龄清洁级雌性昆明种小鼠O只平均体重士g购自广东医学院实验动物中心标准饲料饲养w后随机分为组正常对照组、D一半乳糖衰老模型组、丹参酮组、VE组每组O只。.方法..实验步骤灌胃、皮下注射均按无菌操作进行。d后所有小鼠摘眼球放血处死立即检测全血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活力背部皮肤取下后迅速冰冻保存拟作皮肤组织匀浆及测定皮肤羟脯氨酸之用。正常对照组:每日颈背部皮下注射生理盐水.ml同时灌服生理盐水(O.ml/g)D一半乳糖(衰老模型)组:每日颈背部皮下注射D一半乳糖(mg/kg·d)同时灌服生理盐水(.ml/g)丹参酮组:每日颈背部皮下注射D一半乳糖(mg/kg·d)同时灌服丹参酮(mg/kg·d)VE组:每日颈背部皮下注射D一半乳糖(mg/kg·d)同时灌服VE(Omg/kg·d)。..A皮肤匀浆的制备取脱毛后背部皮肤组织.g左右经预冷生理盐水漂洗除去皮下脂肪和其它结缔组织滤纸拭干称重量筒量取该组织块倍重量预冷生理盐水先取/量倒人装有组织块烧杯中剪碎组织块后倒人匀浆管中将剩作者简介:王红丽(一)女讲师(主治医师)主要从事皮肤抗衰老研究。余l/生理盐水冲洗烧杯壁用内切式组织匀浆机制成lO组织匀浆(在冰水中进行)并反复冻融三次使细胞完全破碎内容物全部游离在液相中。..全血CAT活力测定取新鲜OH液.ml加蒸馏水Oml混匀从中取出ml加入pH.的.mol/L磷酸盐缓冲液ml紫外分光光度计测定其am波长处lcmA值调节A值在.~.之间作为CAT底物液。℃条件下取底物液ml迅速加入:O溶血液.mlam波长处立即测定其A值lmin后再测其A值同时测定蛋白质含量单位用U/(g·Hb)表示。..全血GSHPx活力测定参照南京建成生物工程公司GSHPx试剂盒说明书方法测定单位用U/(mg·Hh)表示。..皮肤匀浆生化指标测定...皮肤SOD活力测定参照南京建成生物工程公司SOD试剂盒说明书方法测定SOD活力单位以U/ml表示。...皮肤MDA含量测定ll一四乙氧基丙烷.g加甲醇配成mmol/L标准贮备液蒸馏水稀释成~.mol/L应用标准液取三氯醋酸g加蒸馏水至ml混匀精确称取.g硫化巴比妥酸(TBA)加蒸馏水至ml加温使其完全溶解后加冰醋酸looml混匀避光冷藏。取looA新鲜皮肤匀浆lml加O%三氯醋酸lml混匀再加入.TBA液lml℃水浴min取出后立即冷却加正丁醇ml振荡后r/min离心lmin取正丁醇液于nm处比色读取A值单位以nmol/g表示。...皮肤CAT活力测定测试物为l皮肤匀浆液方法同全血CAT活力测定。..皮肤羟脯氨酸含量测定小鼠背部皮肤脱毛并除去结缔组织后丙酮:乙醚(:l/V:V)脱脂OC烘干精细称取Omg加mol/LHCIml于O℃烤箱中水解h取水解液.ml用mol/LNaOH液调节其pH值在~之间定容lOml取该液.m人试管依次加入缓冲液lml氯胺Tlml高氯酸lml显色剂lml混匀O℃水浴lminnm波长lcm维普资讯http:wwwcqvipcom··光径比色空白调零同时配制怀札曲线管.单位以g/ng表不。.统计学方法所有测定指标均采用±表示组问比较采用t检验。结果.小鼠全血中CAT、GSHPx活力检测结果见表。小鼠皮下注射D一半乳糖d后血中CAT、GSHPx活力较正常对照组显著降低(P<.)与D一半乳糖组比较丹参酮组、VE组小鼠血中CAT、GSHPx活力显著升高(P<O.)提示丹参酮和VE均可显著提高体内抗氧化酶的活性而发挥抗氧化功能丹参酮尤为显著。表小鼠全血中CAT、GSHPx活力检测结果(±s)与D一半乳糖组比较:)P<.)P<O.Ol下表同.小鼠皮肤生化指标检测结果见表。与半乳糖组相比丹参酮组和VE组小鼠皮肤组织匀浆中SOD含量均明显升高丹参酮组升高尤为明显(P<O.)超过正常组水平提示丹参酮可明显增强皮肤抗氧化和清除自由基的能力其作用较VE显著丹参酮组和VE组小鼠皮肤组织匀浆中MDA含量较D一半乳糖组显著降低但VE组降低较丹参酮组更为显著(P<.)提示VE清除LPO能力较丹参酮更强丹参酮组和VE组小鼠皮肤组织匀浆中CAT活力较D一半乳糖组有增高趋势但因各组标准差太大无统计学意义。.小鼠皮肤总羟脯氨酸含量测定结果见表。丹参酮组和表小鼠皮肤生化指标检测结果(±S)表小鼠皮肤总羟脯氨酸含量测定结果(±s)国查堡芏量查≈生照:一童VE组小鼠皮肤中羟肺氨酸含量较D一半乳糖组分别升高了。、.差异均有显著性丹参酮组较VE组升高更为明显。提示丹参酮和VE均可有效对抗I)半乳糖所致的皮肤衰老二者均能促进皮肤胶原蛋白合成使皮肤呈现年轻化表现。讨论羟脯氨酸是胶原蛋白特有的氨基酸之一约占胶原蛋白全部氨基酸残基的.。皮肤中富含胶原蛋白皮肤衰老与真皮胶原蛋白的含量和性质有关随着增龄控制DNA合成的抑制物增多致使rRNA、tRNA、mRNA含量逐渐下降蛋白合成逐渐减少又由于蛋白交联、降解结果总胶原量减少并老化皮肤僵硬而少弹性羟脯氨酸含量降低。测定皮肤中羟脯氨酸含量变化可作为判定受试动物皮肤衰老程度的一个特殊而敏感的指标。本实验结果证实丹参酮和VE均有显著的抗皮肤衰老作用。丹参酮可显著提高D一半乳糖所致衰老模型小鼠血中CAT、GSHPx的活力和皮肤中sOD活力、羟脯氨酸含量其作用较VE更为显著。其机制可能为丹参酮有明显扩张小血管、抑制血小板聚集、降低血粘度、改善微循环的作用从而使毛细血管网开放血流加速动脉血氧分压和血氧饱和度升高.组织新陈代谢增强ATP合成增加“促进抗氧化酶类合成.使血中CAT、GSHPx活力皮肤中SOD活力增强提高细胞清除jI::和(())能力保护细胞免受自由基损伤且可使成纤维细胞活性增强胶白合成增加而延缓衰老进程丹参酮又有Ca一拮抗剂作用.叮叭止(、a进入细胞内抑制黄嘌呤脱氢酶向黄嘌呤氧化酶转雯.减少自出基产生另外丹参酮又有轻微雌激素作用对皮肤衰老亦有改磐作j打。丹参酮可降低脂质过氧化代谢产物MDA沉积但不及VE明显其原因可能足VE有很强的抗氧化作用能保护细胞内抗氧化酶类活性从而阻止多价不饱和脂肪酸的过氧化反直抑制LPO生成.维持生物膜正常脂质结构和生理功能丽发挥抗衰老作用。总之.丹参酮、VE均有显著抗皮肤衰老作用但二者侧重点不同丹参酮在提高皮肤抗氧化能力和增强成纤维细胞活性方面较VE明显。而在清除皮肤中脂质过氧化代谢产物方面则不及VE显著。参考文献l季字彬张翠中药抗衰老有效成分药理与应用M.第版.哈尔滨:黑龙江科学技术出版杜:.出清洙.羟脯氨酸和动物衰老相关性的研究J.老年学杂志l():.FrolkisVV.AgingantiagingontogenesisandperiodsofagedevelopmentJ.Ger,mtolog~:():·MiqtuJ.CanAmioxidantdietsuIplementaIlnprotectagainstaQ。一rlitedTnitocho~tdrq~ldamageJAnnNYAcadSci·一.I.收简修回维普资讯http:wwwcqvipcom

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