高效液相色谱法测定小儿清热止咳颗粒中黄芩苷含量

高效液相色谱法测定小儿清热止咳颗粒中黄芩苷含量 高效液相色谱法测定小儿清热止咳颗粒中 黄芩苷含量 ? 950?HeraldofMedicineVo1.23No.12December2O04 效液相色谱法测定/bJL清热止咳颗粒中黄芩苷含量 苏孝共,郑国平,蔡进章 (1.温州医学院附属第二医院药剂科,325027;2.浙江省舟山市药品检验所中药室,316000) [摘要]目的:建立小儿清热止咳颗粒中黄芩苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,Agilen 1100HPLC系统,色谱柱:DiamonsilTMCl8;流动相:甲醇.2%醋酸溶液(57:43);流速:1.2mL?min-;检测波长:274nnl.结 果:黄芩苷在0.01422,0.14220mg?mL"范围内线性关系良好,r=0,9996,加样回收率98.89%,RSD=1.45%.结论:本 法简便,准确,重现性好,可排除其他成分干扰,可用于小儿清热止咳颗粒中黄芩苷的含量测定. [关键词]小儿清热止咳颗粒;黄芩苷;高效液相色谱法 [中图分类号]R927.5;R286[文献标识码]A /bJL清热止咳颗粒由黄芩,麻黄,石膏,杏仁,板蓝根,甘 草,北豆根等组成,具清热宣肺平喘作用,适用于,'bJLJ'b感引起 的发热恶寒,咳嗽痰黄,气促喘息,咽喉肿痛等症.方中黄芩起 重要作用.笔者采用高效液相色谱(唧c)法,测定制剂中黄芩 苷的含量,以作为控制质量的方法之一. 1仪器与试剂 Agilent1100HPLC系统(G1311四元泵,G1379自动脱气机, G1314VWD检测器,Agilent1100Lc化学工作站);SB3200超声波 清洗器.黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0715. 9708,含量测定用),甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其他试剂均 为 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯./bJL清热止咳颗粒(浙江泰利森药业有限公司生 产,批号:o303o8,030402,030403). 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱DiamonsilTMCR(250.0mmx4.6mm,5 tan);流动相:甲醇一2%醋酸(57:43),检测波长:274nm;流速:1.2 mL?mini";柱温:室温;进样量:20止. 2.2对照品贮备液和供试品溶液的制备 2.2.1对照品贮备溶液精密称取黄芩苷x,-JN品7.11mg,置 50mL量瓶中加50%甲醇溶解并稀释至刻度,制成浓度为 0.1422mg?mL-的对照品贮备液. 2.2.2供试品溶液取供试品适量,研细,精密称取粉末1g 置50mL容量瓶中,加50%甲醇适量,超声处理30min,冷却,加 50%甲醇溶液至刻度,摇匀,过滤,精密吸取续滤液5mL置25 mL容量瓶中,加50%甲醇溶液至刻度,摇匀. 2.3阴性干扰试验精密吸取对照品贮备液4mL,置10mL容 量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,制成0.05688mg?mL-的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 品溶液,另按标准中的处方比例和制法制成缺黄芩的阴性样品 颗粒,并按供试品溶液制备法制成阴性样品溶液.按2.1项下 色谱条件分别进样加止.结果,供试品溶液中黄芩苷能达到基 线分离,且峰形稳定,阴性样品不干扰黄芩苷的测定(图1,3). 2.4线性关系考察精密吸取上述对照品贮备液1.0,2.0, 4.0,6.0,8.0,10.0mL分别置10mL容量瓶中,加50%甲醇溶液 至刻度,制成浓度分别为0.01422,0.02844,0.05688,0.08532, [收稿日期]2004-01-05[修回日期]2004-03.06 [作者简介]苏孝共(1963一),男,浙江温州人,主管药师,学士,主 要从事中药鉴定和质量分析工作. [文章编号]1004-0781(2004)12—0950-02 ^,, 0510l50510l50510l5 t/mint/mintllin 图1黄芩苷对图2供试品色谱图图3阴性样品 照品色谱图色谱图 0.11376,0.1422mg?mL".的标准溶液,分别按上述色谱条件进 样测定峰面积;以浓度(c)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,得回 归方程为A=55769.13C一23.53,r=0.9996,黄芩苷在 0.01422—0.14220mg?mL-.范围内线性关系良好. 2.5精密度试验精密吸取上述对照品溶液1mL,稀释至10 mL,每次进样20止,连续进样5次,测定峰面积,结果平均峰面 积787.52,RSD=1.22%,精密度良好. 2.6稳定性试验精密吸取上述对照品溶液于0,2,4,6,8,10 h进行测定,结果RSD=1.16%. 2.7重现性试验取批号030402样品5份,按供试品溶液制 备方法制备,测定,计算,RSD=2.12%. 2.8加样回收试验精密称定已知含量的供试品(批号: 置50mL容量瓶中,分别定量加入黄芩苷 o30402)o.3g各5份, 对照品适量,并按供试液制备方法制备,进样20止测定,结果 见表1. 表1回收率试验 注:平均回收率98.89%.RSD=1.45% 2.9样品含量测定精密吸取上述对照品贮备液4mL置10 mL容量瓶中,加50%甲醇溶液至刻度,制成浓度为0.05688 医药导报2004年12月第23卷第12期卷终?951? nag?mL-的标准溶液.分别取对照品溶液及供试品溶液,按上述 色谱条件测定(n=5),计算含量.结果批号为030301,030402, 030403的3批样品黄芩苷含量分别为14.94,15.38,15.16 nag?g-;RSD分别为1.18%,1.56%,1.32%. 3讨论 为了选择最佳提取溶剂,参考文献[1,3]分别选用80%甲 醇溶液,50%甲醇溶液,70%乙醇溶液,90%乙醇溶液以及甲醇一 冰醋酸(100:1)超声提取30min进行比较,结果以50%甲醇溶 液超声提取30min回收率较高. 在含量测定中选用甲醇一2%醋酸溶液(57:43)和甲醇一2%磷 酸(5O:50)以及乙腈.水(18:82)为流动相均得到较好分离,考虑 到乙腈成本较高,毒性较大,最后选择甲醇.2%醋酸溶液(57: 43)为流动相. 本法提取分离简便,色谱稳定,准确,重现性好,可以作为 iJ,JL清热止咳颗粒中黄芩苷含量的测定方法. [参考文献] [1]毛素芳,龚莉晁,若冰.HPLC测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含量 [J].华西药学杂志,2003,18(2):127—129. [2]张煊,周慧,邢建国,等.HPLC测定消痤颗粒中黄芩苷的含量 [J].华西药学杂志,2003,18(5):372—374. [3]崔佳,鲁燕侠,仝青英,等.感咳清颗粒中黄芩苷的含量测定[J]. 中国中药杂志,2003,25(5):462. 高效液相色谱法测定 双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 方崇波 (浙江省宁波市医疗中心李惠利医院药剂科,315040) [摘要]目的:建立高效液相色谱法(HPLe)测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含 量.方法:采用乙腈.0.1%磷 酸溶液为流动相(梯度洗脱),流速为1.0mL?min一,检测波长为318nnl.结果:绿原酸 线性范围为0.2568,2.0544,ug,平 均回收率97.7%,RSD=0.8%;黄芩苷线性范围0.9896,7.9168,平均回收率98.0%,RSD=0.9%.结论:该方法简 便,可靠,准确,可用于该制剂的质量控制. [关键词]双黄连口服液;绿原酸;黄芩苷;高效液相色谱法 [中图分类号]11286;11927.2[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2004)12— 0951.02 双黄连口服液由金银花,黄芩,连翘等3味药组成,主要成 分为绿原酸,黄芩苷和连翘苷,具有辛凉解表,清热解毒等功 效,用于感冒风热引起的发热,咳嗽,咽痛,具有疗效确切,使用 方便等优点.先行质量标准(《中华人民共和国药典)2ooo年 版)含量测定项下只对黄芩苷含量作了 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 ….为更好的控制 质量,保证临床疗效,笔者采用高效液相色谱法(HPLe)测定双 黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量. 1仪器与试剂 HP1100高效液相色谱系列:在线脱气机,四元泵,二极管阵 列检测器,HP1100化学工作站,UV.2401PC紫外分光光度计(岛 津).乙腈为色谱纯,水为双蒸水,其他试剂均为分析纯;绿原 酸,黄芩苷对照品均从中国药品生物制品检定所购得. 2试验方法与结果 黄芩苷对照品,加50%甲醇 2.1测定波长的选择取绿原酸, 水溶液配制成适宜浓度的溶液,在紫外区200,400nm波长处 进行扫描.分析紫外吸收图谱可见:绿原酸在318nnl处有较强 吸收,而黄芩苷在276,318nnl处均有较强吸收.为了便于检 测,选择检测波长为318nnll2J. 【收稿日期]2003—11—o4【修回日期]2003.12-08 [作者简介]方崇波(1973一),男,浙江慈溪人,主管药师,硕士,主 要从事医院药学工作. 2.2色谱条件色谱柱:LUNAC.(2),4.6mmX150.0mm, 5肿;流动相:0.1%磷酸溶液:乙腈:0min(88:12),10rnjn(74: 26);流速:1.0mL?min..;检测波长:318nnl. 2.3线性关系考察精密称取绿原酸对照品约12nag,黄芩苷 对照品50mg置50mL量瓶中,用50%甲醇水溶液稀释至刻度, 作为贮备液.精密量取贮备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,8.0 mL分别置于10mL容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,按上述 色谱条件进样,以进样量()一峰面积进行线性回归,得回归方 程为,绿原酸:Y=2022.831X+35.2764,r=0.9992(线性范围: 0.2568,2.0544,ug);黄芩苷:Y=1791.043+27.948,r= 0.9999(线性范围:0.9896,7.9168,ug). 2.4加样回收试验精密量取已知含量的样品2.0mL,置50 mL容量瓶中,用50%甲醇水溶液稀释至刻度,过滤,收集续滤 液,精密量取续滤液5.0mL置25mL容量瓶中,再分别加入贮 备液1.0,2.0,3.0mL,用50%甲醇水溶液稀释至刻度,按上述色 谱条件测定,结果见表1. 2.5精密度试验按线性考察方法配制溶液,重复进样6次, 得绿原酸RSD=0.4%,黄芩苷RSD=0.3%. 2.6稳定性试验按线性考察方法配制溶液,同一溶液分别在 0,4,8,24,48h进样测定,峰面积基本不变,RSD=0.85%.表明 在48h内是稳定的.