药用植物红芽大戟的组织培养

药用植物红芽大戟的组织培养 ?一}\广西植物Guil~aia17(2):149--1511997 陈芳清 (湖北三峡学院师范学院生物系,宜昌443000),'-—————————一 摘要针对药用植物红芽大戟结实卑和种子萌发 ) 华5 浩 10642) ' / t 广州.一, /(华南农业大学生物系, 卑较低的情况.探讨了利用组织培养努j击解决 Q9I 生产中繁殖的问题.结果表明,在茎,叶和芽3种外植体中,芽的出禽卑最高.禽伤组织褐化卑 低.生长最好,且易被诱导出不定芽,是较理想的快速繁殖 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 ;而茎和叶的愈伤组织褐化率 高,难以诱导出不定芽,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是6-BAZ0mg/L+N从0.4 mg/L,诱导不定芽的适宜激素组台是6-BA5.0mg/L+NAA0.05mg/L,根的诱导则在 1/2MS+NAA0.2+席糖1.5%+琼脂0.8%培养基上进行... 关醐拉竺堕竺定等箔审额国享..一 /- TISSUECULTUREOF?叻ICALPLANT KN0XIAVAIRIAN0IDEs ChenFangqing (TeachersCollege.HubeiThreeG0r譬【Yid~ang443000) Q|uAnXuXianghao (Departmem.SouthChinarUn&ersilytGuangzhou510642) AhetmctBecausethefruitingroteandgerminativepercentageofKnoxiaValerianoidesmlower. tissueculturewasexploredtosolvethepropagatingproblemintheproduction:Theresultsshow thatthebudisthebestma~rmlinspeedingpropagationamongthethreeexplantsfgtem,1eafand bud)asithasthebiggestioduetivity.theb簋 tgrowth,thelowestbrownpercantagaanditiseasyto beinductedadventitiousbuds.Thebrownpercentageofthecallusfromstemandleafisquitehigll andthecallusisdifficulttobeinductedadventitiousbudsinourexperiment.Thesuirabio phytohormouecompositionstoinductcallus,adventitiousbudsandrootsarcrcspoctivdy6—BA2.0 mg/L+NAA0.4mg/L.6—BA5.0mg/L+N—L^0.05mg/L,1/2MS+NAA0.2mg/L+sugar 1.5%-PagarO.8%., KeywordsKnoxiavaleHanoides;timuecultu~;callus;adventitiousbud 红芽大戟(Knoxh~valerlanoidesThorcL)属于茜草科红芽大戟属,是一种分布于我国 南方 的多年生草本珍稀药用植物'",由于原生地的植被退化及人工滥采乱挖,野生资源 数量急剧 减少.广东省于1990年开始人工驯化栽培试验,我们在野外调查及栽培试验中发 现,该植物的 1995--08--09牧稿 第一怍者简介:陈芳清,男,1963年出生,硕士研究生.讲师,植物学专业. 150广西植物l7卷 结实率及种子萌发率较低,我们曾利用其根颈进行繁殖,虽然获得成功,但由于根颈的分蘖 能力很低,根的长度小,致使繁殖系数以及药材收获率均较低,为此,我们采用了组织培养技术 进行快速繁殖. 1材料和方法 1.1材料 材料为广东省阳西县鸡啼岭采取的野生植株,带土移栽于广州试验地,取其茎段(不带 芽)叶和芽作外植体. 1.2培养基 基本培养基为MS?按不同处理 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 添加不同类型及浓度的激素,用0.2NKOH和0.2N HCI调节pH值为5.8,然后在高压灭菌锅中高温(120?)灭菌20min. I.3培养方法 , 取芋:.芝植体:.先TableIEffec拣组一用70%酒精擦洗表面,再放人Table'ifferen'phoohormo.cop'." 0.1%升汞溶液中消毒15min,用."ca.' 善'桃Phytohormone0.5em).Growth菇GrowthGrowth台上将外植体切成长的小c.p...Ij..盏"…一I喜…..…段接种于诱导愈伤组织培养基上,—————?——————:—不一 将培养出的愈伤组织切成小块接种6-BA2o?3小0无500小 于分化培养基上,最后将形成不定_B:75...0娄:嚣 芽的块段移到生根培养基,以培育6-BAL . 0 + +NAA . 0, .2:000000 出试管苗.6一BA2,0+NAA02100中0无100中 1.4观察!!:!竺!竺查!竺!!竺 分别每过5d,观察记录不同处理的生长状况. 2结果与讨论 2.1愈伤组织的诱导 红芽大戟的茎段,叶和芽形成愈伤组织的能力不一样(表1).经多种激素组台试验结果表 明,愈伤组织出愈率以芽最高,茎次之,而叶片形成愈伤组织的能力最差,虽然能通过改变激素 种类与浓度来调节叶的出愈率,但其愈伤组织的生长量仍较低,愈伤组织较紧密,易褐化枯死. 从表1中可以看出,激素在促进愈伤组织形成以6-BA2.0mg/L左右为宜,NAA则以O.4 mg/L左右为宜.该组台下诱导的愈伤组织出愈率高,生长量多,且较疏松,难褐化. 芽是一种特殊的外植体,许多植物的快速繁殖都以它为培养捌料".红芽大戟的芽在培 养过程中既能形成愈伤组织,叶片,叉能分化出一些不定芽,形成芽丛.其生长状况与NAA浓 度有关.在缺少NAA时,当6—BA为2.0mg/L,能促使芽生长出大量叶片,当NAA为0.4 mg/L时,除生长一些叶片外,芽切口处还产生大量愈伤组织;NAA为0.2mg/L时,除产生 愈伤组织外,还分化出不定芽,形成芽丛,- 2.2诱导不定芽及生根 由茎段,叶和芽培养出的愈伤组织转到新培养基上继代培养,生长状况差异较大 (表2). 2期陈芳清等:药用植物红芽大戟的组织培养151 由茎段,叶培养出的愈伤组织在低浓度的6—BA培养基中增长量较小,易褐化,但 不定根的分 化率较高;在高浓度的6-BA培养基中,愈伤组织的增长量较大,但不定根的分化率 较低.在 所有6-BA与NAA的激素组合中,茎段和叶的愈伤组织均未能分化出不定芽. 芽的愈伤组织在继代培养 中既能分化出不定根又能分化. 不激觏台织蜘首州七的影响 出不定芽.实验表明,在高浓Tb1e2E脯.'ofph.'orm.".c0mpo.i【i0"." 度的6-BA低浓度的NAAsccdhngdn"'0n州ca.us 组合中,不定芽的分化率最 -BA为3.0mg/L, 高.当6 NAA为0.05mg/L,不定芽 的诱导率为57.1%,平均每 块分化出3.1个不定芽;而当 6-BA为5.0rag/L,NAA 为0.05mg/L时,不定芽的 诱导率为100%.每块平均分 化出4.3个不定芽.不定根的 分化率为33.4%. 擞亲蛆台{mg/L) Phylohormone Composofioa StemCallusBud?1|l 根诱导率%根诱导率%芽丛诱导串% 叶愈掳组轵 LeercaUI 根诱导率% F~quency0fFrequ州y0rF嘲啪ofbedFrequencyof 啪tinduction啪tinductionclumpinductionrootiadu~tion 培养产生的不定芽转人生根培养基(1/2MS+NAA0.2+庶糖1.5%+琼脂0.8%)进行培 养,不定根的诱导率达9O%以上. 2.3试管苗移栽 把培养出的试管苗移到室温放置5,7d,然后打开瓶盖炼苗2,3d,再洗净根部培养基移 栽到经0.2%高锰酸钾消毒的细河砂中,保温保湿培养10d(温度18,24?,湿度90%左右), 再移人沙土培养,待小苗长出3,4个小叶片后便可移栽到大田. 3小结 红芽大戟的茎段,叶和芽在不同激索组合的培养基上的出愈率不一槔以芽的愈伤组织生长最 妊而叶最难诱导,且易褐化.培养愈伤组织最好的激索组合是6_.丑A2.0mg/L+NAA0.4m8/L 在继代培养中.茎段,叶的愈伤组织能进一步增殖并产生不定根,但不能形成不定芽.只有 芽的愈伤组织能形成不定芽.其原因待进一步研究芽是快速繁殖红芽大戟较理想的材料,它的 出愈率高,愈伤组织生长量大.且不易褐化.用它的愈伤组织在6一BA5.0mg/L+NAA0.05 mg/L的MS培养基上能分化出较多的不定芽.把培育出的不定芽再转人生根培养基,可培养 出试管茁.本研究对于扩大红芽大戟的生产,保护野生药用植物资源有积极的意义. 本研究得到1广东省医药总公司的支持,特此致谢. 参考文献 陈芳清.棣祥浩药用植物红芽太戟的个体生态学研免武汉植物学研 究,1995,13(2]:147,151 《全国中草药汇编》编写组《全国中草药汇编》(上册北京:人民卫生出版社.j975,382--383 黄敏琦.胨诗椿透百合离体快速繁殖.植物生理学通讯,1993,29(6):437 周纯,田惠桥濒危植物毛莨泽肖的组织培养.植物生理学通讯l994.30(4):277 范双喜,解淑贞.石习柏茎尖及茎段培养植物生理学通讯,1994.30(5):359 兰涛.盘建平,顾姻.二叉鹿角蕨茎顶的组织培养植物生理学逋汛1993,29(1):49