光合细菌制剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用

光合细菌制剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用 光合细菌制剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响 及抑瘤作用 ? 8? 文章编号:1007—6611(2004)01—0008—02 山西医科大学(JShanxiMedUniv)2004年2月,35(1 光合细菌制剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用 高丽,张肇铭,杨官娥,(山西大学生命科学与技术学院,太原030006;山西医科大学药学院) 摘要:目的观察两种光合细菌制剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用.方法以荷S180实体瘤小鼠为模型,灌胃给 药,连续10d,计算抑瘤率,测定小鼠脾,胸腺指数,中性红比色法测定腹腔巨噬细胞吞噬功能.结果光合细菌制剂可促进小 鼠脾及胸腺增殖,提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能,并对S180有一定的抑制作用,抑瘤率平均分别为36.1%和42.7%.结论 两种光合细菌制剂均具有免疫调节能力和一定的抑瘤作用. 关键词:发光细菌属;肿瘤,实验性;免疫力;药物筛选试验,抗肿瘤;小鼠 中圈分类号:R73—33文献标识码:A Immanityfunctionantitheantitumoreffectofphotosyntlleticbacteriapreparationsontumor igenicmice GAOLi,ZHANGZhao-ming,YANGGuan—e(CollegeLScienceandTechnology,Shan.riUniversity,Taiyuan030006, China) AhHt:ObjectiveToexaminetwophotosyntheticbacterium(PSB)preparations'influenceon theimmurfftyfunctionandantitu— moteffectoftumorigenicmice.MethodThemOUSemodelwithtumor— S180wassetup.Thecoefficientofthymusglandandspleen WaSdetermined,andthepha~gocyticfunctionofceliacmacrophageswasdeterminedwithn eutral—redcolorimetricmethod.Thenthetu— ITIOrinhibitory.O.uld出耐. ratewascalculatedResultsBothofthePSB~tionsimprovethecoefficientsofthymusandsple enand thephaIcfunctionofce 【macrophage.Theyalsohavesomeinhibitoryactionontumors,andtherateswt2re36.1%an d42.7%.Con— clusionEothofthePSBprcld11ctscanilTlprovetheimmunityfunction0ftl?mg?icmiceandhavean. anfittm~oreffect. Keywords:Rhodobacter;neoplasms,experimental;immunity;drugscreeningassays,antit umor;mice 光合细菌是地球上最早出现的具有原始光能合 成体系的原核生物,能够进行不放氧的光合作用,过 去多被应用于高浓度有机废水的处理中.近年来, 研究发现光合细菌在动物毒性测试及生殖,生长观 察实验中不仅对受试动物无致毒及致病作用,对生 育生长不具潜在性的危害性,而且其体内蛋白质,各 类维生素,氨基酸等营养成分含量非常高,并含有许 多未知的促生长因子以及抗病毒物质,用作饲料添 加剂时可显着提高动物的存活率,增强抗病力研究 还发现光合细菌具有抗辐射,调节机体免疫活性等 功能[卜3_.硒作为生物生长所必需的微量营养元 素之一,也已被证实在适当浓度下具有预防肿瘤发 生,抑制肿瘤细胞增殖,抗辐射,提高机体免疫功能 等作用[4--6j,特别是有机硒,不仅吸收利用率高且 毒副作用小于无机硒.本实验制备了含硒与不含硒 的两种光合细菌制剂,研究了它们对荷瘤小鼠免疫 功能的影响及抑瘤作用. 1材料和方法 1.1实验材料 1.1.1动物与瘤株昆明种小鼠,雄性,体重(20? 2)g,山西医科大学动物中心提供.S180瘤株由山西 省肿瘤医院提供. 1_1.2菌液光合细菌制剂I的制备:光合细菌 基金项目:国家科技攻关项目(2001BAS40C) T7菌株,系紫色非硫菌群红杆菌属的球形红杆菌 (rhodobactersphaeroides),由本院光合细菌研究室 分离鉴定保藏[7_,采用Ormerod培养基,光照厌氧 培养5d,菌液含菌数1.6×10个/ml.光合细菌制 剂II的制备:所用菌种和培养基同上,仅在培养基 中加入50mg/ml的亚硒酸钠,光照厌氧培养5d,亚 硒酸钠可转化为有机硒,转化率达90%以上. 1.1.3药品与仪器环磷酰胺(cp):江苏恒瑞医 药股份公司出品,批号01083121,临用前生理盐水 配制;RPMI1640培养基:GIBCO公司,1640培养 液中加青霉素100U/ml,链霉素100~g/ml,临用 前加10%灭活小牛血清(杭州四季青产品);亚硒酸 钠:分析纯,天津化学制剂研究所出品,生理盐水配 制成50rng/ml的溶液;尤尼柯紫外可见分光光度 计:尤尼柯公司产品. 1,2方法 1,2.1瘤细胞接种取新鲜无坏死的S180瘤组织, 无菌条件下匀浆,制成单细胞悬液,生理盐水调整细 胞数为1×10个/ml,计数活细胞数>95%,于每鼠 右侧腋窝皮下接种0.2ml. 1.2.2分组及给药接种后24h将动物随机分 组,每组8只,各组小鼠经下列不同处理10d后,进 行各项实验(见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1). 山西医科大学(JShanxiMedUniv)2004年2月,35(1 表1实验小鼠分组及给药方法 分组给药 荷瘸对照组 环磷酰胺组 亚硒酸钠组 制剂I组 制剂II组 生理盐水灌胃,0.3ml/(只?d),连续10d 腹腔注射环磷酰胺,100Hlg/,1次 亚硒酸钠溶液灌胃,0.3ml/(只?d),连续10d 制剂I灌胃,0.3ml/(只?d),连续10d 制剂II灌胃,0.3ml/(只?d),连续10d 1.2.3实验方法抑瘤率的测定:取荷瘤10d的 小鼠,称其体重后脱颈处死,剥离完整瘤块,称重并 计算抑瘤率. 抑瘤率=(1一实验组肿瘤重照组肿瘤重)×100%. 脾,胸腺指数的测定:取脾及胸腺称重,计算脾 及胸腺指数.脾指数=脾重(mg)/体重(g);胸腺指 数=胸腺重(mg)/体重(g). 腹腔巨噬细胞吞噬功能测定:采用中性红比色 法测定各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力. 1.3统计学分析数据采用z?S表示,用t检验. 2结果 2.1动物外观与体重环磷酰胺组小鼠逐渐行动 迟缓,毛发不荣,饮水饮食减少,体重增加缓慢.其 ? 9? 余四组小鼠行动较灵活,毛发光泽度好,尤以制剂II 组明显.四组体重增加均较快,与环磷酰胺组比较 均有显着差异(见表2). 2.2脾指数和胸腺指数制剂I组和制剂II组与 环磷酰胺组小鼠比较脾及胸腺指数均明显增加,而 与荷瘤对照组对比无差别,制剂I,II组间差异无统 计学意义,说明光合细菌制剂有提高脾及胸腺指数 的作用(见表2). 2.3腹腔巨噬细胞吞噬功能环磷酰胺组与其他 4组比较巨噬细胞吞噬功能有显着差异,其吞噬功 能明显低于其他4组,制剂I,II组与荷瘤对照组间 有显着差异,说明制剂I,II组均可提高荷瘤小鼠腹 腔巨噬细胞吞噬功能,制剂I,II组间差异无统计学 意义.亚硒酸钠组与荷瘤对照组,制剂I,II组间差 异无统计学意义(见表2). 2.4对小鼠S180移植瘤的抑制作用亚硒酸钠组 及制剂I,II组对小鼠S180移植瘤均有一定的抑制作 用,以制剂II组为最高(42.7%),但低于环磷酰胺 组(见表2). 表2光合细菌制剂对荷瘤小鼠抑瘤作用及免疫器官,腹腔巨噬细胞吞噬功能的影 响 与环磷酰胺组比较P<0.05,P<0.01;与荷瘤对照组比较P<0.05 3讨论 一 般认为,肿瘤免疫反应以细胞免疫为主,参加 免疫的效应细胞有细胞毒性T细胞,巨噬细胞,自然 杀伤细胞.胸腺与脾脏为体内主要的免疫器官,胸 腺为T淋巴细胞分化,增殖,成熟的场所.脾脏内有 T,B淋巴细胞分化,增殖和成熟,且有巨噬细胞.本 实验证明,两种光合细菌制剂均对免疫器官有保护 作用,增加胸腺,脾指数,增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细 胞的吞噬功能,且各指标均高于亚硒酸钠组.亚硒 酸钠组及两种光合细菌制剂对S180实体瘤均有一定 的抑制作用,抑瘤率分别为l7.1%,36.1%和 42.7%,两种光合细菌制剂组抑瘤作用均明显高于 亚硒酸钠组,以含硒制剂组效果更为显着.说明经 过光合细菌转化的亚硒酸钠与光合细菌协同作用能 增强两种成分单独使用时的调节免疫力及抑瘤作 用.其机理可能是通过促进T,B淋巴细胞分化,增 殖和成熟,提高巨噬细胞活性,进一步促进机体内各 种免疫应答的发生,从而发挥抗肿瘤作用.光合细 菌的调节机体免疫力,抗肿瘤作用的深入研究将为 其在医药,保健品行业的应用提供良好的开发价值. 参考文献: [I]张世静,曾焕泰,陈惠年,等.光合细菌对小白鼠毒性测试及生 殖生长观察[J].福建师范大学,1998,14(2):75,81. [2]AlbertB.Molecularbiologyofthecell[M].NewYork:Garland PublisngInc.1980.64. [3]俞吉安,张承康,范小兵,等.类球红细菌的免疫活性 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 [J]. 中国微生态学杂志,2002,14(1):14,16. [4]唐玫,王曼,郭宝江,等.富硒藻蓝蛋白对小鼠免疫功能及抗氧 化作用的影响[J].营养,2001,23(3):275--279. [5]刘俊清,王梦亮,齐延兵,等.康强硒((X)NSE)对恶性肿瘤辅助 治疗的临床观察[J].山西医科大学,1997,28(1):48,5O. [6]WangerPD.Seleniuninteractionwithcarcinogenes【Jj.Fundam ApplToxicol,1983,23(3):162,165. [7]张肇铭.紫色非硫光合细菌的研究.1.球形红假单胞菌的分离 鉴定和生理特性[J].山西大学,1984,7(4):201--204. 作者简介:高丽,女,1975—03生,在读硕士. [收稿日期:2003一O1一O9]