医药学论文-血小板抗原基因的分型与配型临床疗效

医药学 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 -血小板抗原基因的分型与配型临床疗效 作者:林国连 高发平 陈雅雯 【关键词】 血小板 摘要:目的:血小板基因分型及配型的探导，以便确定临床血小板输注的安全和疗效。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 :应用聚合酶链序列特异性引物技术(PCR,SSP)，对湛江市72例患者(人血小板抗原) 的HPA1-5系统等位基因进行分型，由湛江市血液中心提供相配型的血小板为其进行成份血小 板输注。结果:经血小板基因配型的吻合组血小板输注后CCI1、CCI24效果明显优于对照组。 结论:对血小板基因分型与配型可以提高临床输注血小板的安全性和疗效。 关键词:人血小板抗原;基因分型;配型;临床疗效 The Genotype Matched-type and Clinical Effect of Platelets Antigen Gene Abstract: Objective: To research the genotype and the matched-type of platelets antigen gene for making sure the clinical effect of the platelets inject. Method: Divide HPA1-5 system accede of 72 patients in Zhanjiang by the technique of PCR-SSP. The inject matched-platelets with provided by the blood center of Zhanjiang for patients. Result: The group injected the matched genotype platelets in the effect of CCI1.CCI24 were better than the compared one. Conclusion: To divide the genotype and match the type of platelets can improve the safety and curative effect of the platelets injection. Key words: Platelets antigen; The genotype; Matched-type; Clinical effect 国外近年来经大量研究后发现，HPA(人血小板抗原)在新生儿血小板减少性紫癜，输血后紫 癜，和经血小板输注后无疗效等疾病中具有重要意义,1,2,。特别在临床上，许多血小板减 少性紫癜患者，因血小板输注疗效很差，并发出血等，更有甚者导致死亡等严重后果。因此， 有必要对血小板抗原基因分型及配型进行深入的探导。一直以来，医学上一直用传统的血清 学方法进行HPA分型，由于缺乏高质量、高效价抗血清等等多种因素的制约，始终无法对HPA 进行分型。随着对HPA基因的深入研究，国外近年来己报道,3,6,将基因检测技术用于血 小板分型研究中，经临床配型输注取得较好的效果。本文应用聚合酶链,序列特异性引物技 术(PCR-SSP)对湛江市区72例患者的HPA1-5系统等位基因进行了分型，并提供基因型相合 的血小板成份进行输注，现报告如下。 1 材料与方法 1.1 检测标本:抽取185名湛江市区的健康军人献血者以及72例需输注血小板的患者静 脉血1m1(EDTA抗凝)。 1.2 主要试剂和仪器 Taq DNA聚合酶由Promega公司提供,HPA1-5系统等位基因特异性 引物由美国C&T公司提供,DNA提取采用德国QLAmp DNA Mini kit,扩增仪为澳大利亚 RG公司3000型WVSR分析仪。 1.3 DNA提取:采有德国QIAamp DNA Mini Kit从全血中提取DNA，操作按机器说明 书进行。 1.4 PCR,SSP特异性HPA基因扩增 1.4.1 PCR反应体系:反应体系共10μl，包括反应混合液(含特异性HPA1a,HPA5b基 因引物，内对照引物,Dntp、PCR缓冲液等)8μl，提取的基因组DNA1μl及含0.6U TaqDNA 酶液1μl。 1.4.2 PCR扩增参数:首先以95?5min变性;然后按95? 30S，60? 60 S，72?90 S 扩增，共45个循环。 1.4.3 扩增产物鉴定:PCR扩增产物在2%琼脂糖凝胶中电泳，在紫外光下观察结果。 1.5 临床HPA基因吻合组与末配型组输注成份血小板的疗效比较果:将需要输注血小板 的患者分为基因吻合者(吻合组)及末配型者(对照组)两组，分别在输注前、输注后1h 和24h进行血小板计数，同时 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 输入的血小板数总量及患者的体 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 面积。计算血小板输注 后1h、24h患者纠正的血小板计数增值(CC1),7,，比较两组的有效率。 2 结果 2.1 对185名湛江市区的健康军人献血者进行HPA基因分型，其ABO血型、HPA基因型 分布情况见表1。 2.2 对72例需输注血小板的患者进行HPA基因分开型，其ABO血型、HPA基因型分布情 况，见表2。 2.3 对湛江市区72例需输注血小板患者进行血小板基因分型并选择，由湛江市血液中心 提供HPA基因相吻合的血小板输注。共收到临床反馈资料60份，其中基因型吻合者(吻合组) 29份，未配型者(对照组)31份。吻合组与对照组血小板输注后1h、24h平均CCI值见表3。 对吻合组及对照组血小板输注后1h、24h的输注有效率进行了比较,8,，结果见表4。 3 讨论 血小板抗原在临床输血中有着重要的意义。血小板抗原不合，可导致血小板 输注后疗效差别很大，或者无效，输成份血小板后引起紫癜，以及引起新生儿血小板减少性 紫癜等等。要想输成份血小板有满意疗效，必须对血小板抗原基因分型及配型。近年来，国 外对血小板抗原基因分型进行很多研究。我国大部分地区没开展此项技术的研究工作，临床 上大部分地区没有对血小板抗原基因分型及配型。导致临床上输血小板的疗效不很满意，甚 至出现负作用。因此希望广大医务工作者在此方面加倍努力。对湛江市185名献血员的HPA1-5 系统等位基因进行分型，可建立一个小资料库，为临床输注成份血小板的患者提供配型相合 的成份血小板。对提高输血小板疗效有很大的帮助，还可以对血小板特异性抗体进行鉴别。 对湛江市72例患者进行的HPA的基因分型及配型，从收集回的60例疗效来看，基因吻合组 输血小板后1h、24h的平均CCI值比对照组显著升高。从两组疗效来看吻合组输注血小板后 1h、24h有效率 表1 湛江市185名献血者ABO血型、HPA基因型分布 略 均为100%，而对照组则为83.9%和80.6%，明显不及吻合组。目前临床上输注血小板只 考虑ABO血型相同，(实际工作中，由于病情急，且血源受限制时，血型不同也会输注血小板， 这情况结果，本人在另一编文章中已述)而忽视HPA配型。对那些需反复多次输注血小板者， 更应进行HPA的基因分型，以便提高输血小板的安全和疗效。 表2 湛江市72例患者ABO血型、HPA基因型分布 略 参考文献: ,1,williamson L M,Hacket G,Pennie J,et al.The natural history of fetomatrnal alloimmunization to the platelet-specific antigen HPA-la as determined by antenatal screening,J,.Blood,1998，92:2280. ,2,Kickler T S.Platelet immunology.In:Anderson K L, Ness P M.eds.Scientific Basis of Transfusion Medicine,M,.Philadelphia:WB Saunders,1994.304. ,3,Metcalfe P,Cavanagh G,Hurd C,et al,HPA genotyping by PCR-SSP:Report of 4 exercises,J,.Vox Sang,1999，77:40. ,4,Skogen B,Belissimo D B,Hessner J M,et al.Rapid determination of platelet alloantigen genotypes by PCR using allele-specific primers ,J,.Transfusion,1994,34:95( ,5,Cavanagh G,Dunn A,Chapman C E,et al.HPA genotyping by PCR-SSP:A streamlined method for rapid routine investigations,J,.Transfus Med,1997,41. ,6,Chen D F,Pastucha L T,Chen H Y,et al,Simultaneous genotyping of human platelet antigens by hot start sequence-specific polymerase chain reaction with DNA polymerase AmpliTaq gold,J,.Vox Sang,1997,72:192. ,7,王培华.输血技术学,M,.北京:人民卫生出版社,1988.182-183. ,8,孟钵,张益红,等.血小板抗原基因分型及配型的研究与初步应用,J,.临床检验杂志,2001,19(4):207