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发酵罐的使用

发酵罐的使用发酵罐的使用一、实验原理发酵罐是由3条线路构成的，一个是空气的进出(不进入夹层)，蒸汽的进出(只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体，是从夹层的上进下出的)，水的进出(进入夹层内，从下进上出。当开始发酵时，水路会形成一个循环，由温度感应器对其进行调节，保证水的温度在发酵所需温度范围内)。二、实验设备我们实验室所用的发酵罐是由蒸汽发生器、空气压缩机、储气罐和发酵罐和控制面板组成的。 1. 蒸汽发生器:黄灯亮代表需要进水，进水好后红灯亮，自动开始加热。其背后有一阀门，是控制蒸汽流出的开关，常开。 2. ...

发酵罐的使用一、实验原理发酵罐是由3条线路构成的，一个是空气的进出(不进入夹层)，蒸汽的进出(只在对空气过滤器灭菌时才进入罐体，是从夹层的上进下出的)，水的进出(进入夹层内，从下进上出。当开始发酵时，水路会形成一个循环，由温度感应器对其进行调节，保证水的温度在发酵所需温度范围内)。二、实验设备我们实验室所用的发酵罐是由蒸汽发生器、空气压缩机、储气罐和发酵罐和控制面板组成的。 1. 蒸汽发生器:黄灯亮代表需要进水，进水好后红灯亮，自动开始加热。其背后有一阀门，是控制蒸汽流出的开关，常开。 2. 空气压缩机:摁下红色按钮起开始向储气罐内通入空气 3. 储气罐:由于实验器材老化，处于安全考虑，压力控制在2Kg(0.2Mpa)，超过这一压力则要关闭空气压缩机。储气罐底部有一出气的安全阀，此阀是常开的。 4. 发酵罐:发酵罐上连有电极，当要打开发酵罐时要先将其拆下，避免损坏。在旋紧发酵罐时要对角线旋紧旋钮。三、实验步骤 , 实验前的预备工作 1. 清洗发酵罐:将发酵罐的电极拆下，旋钮选出，对发酵罐进行清洗 2. 检查气密性 1) 将阀门F14(发酵罐的出气阀)与发酵罐夹层的出水阀打开，在实验过程中这是一直要打开的 2) 打开电源总闸，打开蒸汽发生器水龙头，将水通入蒸汽发生器内，红灯亮时关闭水龙头 3) 将空气压缩机的开关打开，向储气罐内通入空气，当压力到2Kg(0.2Mpa)时，关闭空压机。 4) 通过进样孔向发酵罐内通入一定量的去离子水，使其没过空气管口。 5) 先打开发酵罐的进气阀门F11、F13，再打开储气罐连接发酵罐的管道阀门. 6) 当罐内压力上升到0.05MPa时，关闭F14,F13，将发酵罐底部取样旋钮旋至最下放方以防漏气，此时罐内压力在30min内保持不变则气密性良好。 3. 发酵罐的灭菌空消: 1. 30min后，打开F14,F13阀门，调节大小使其稳定在0.03MPa 2. 在打开蒸汽发生器的阀门前，先将发酵罐的蒸汽出口阀门打开 3. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐的进气阀门，关闭进气阀F13以防倒吸，当温度上升到121?时，保持30min，注意调节F14，使罐内压力维持在一定的压力值(过大会有危险，过小温度难以上升)此时发酵的前期准备工作已就绪，开始准备发酵。 2、 30min后，泄压;关闭蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门，打开F13进空气的阀门(防止罐体变形) 1. , 发酵步骤 (一) 实消 1. 冷却发酵罐(防止过热物料喷出)，从加样孔内通入物料(物料要先全部溶解)于6L 左右，打开搅拌器; 2. 打开蒸汽发生器的阀门与发酵罐蒸汽进入阀门，关闭F13以防倒吸; 3. 当罐内温度上升到90?时，停止搅拌以防电极被烧坏; 4. 对空气过滤器灭菌;当温度上升到100?时，打开空气过滤器的阀门F3，关闭进气阀 F11，再打开进气阀F13,对空气过滤器灭菌15min。 5. 实消;15min后，关闭空气过滤器的阀门F3与进气阀F13，打开F11，当温度上升到 121?时，保持30min，进行实消的灭菌。 6. 30min后，泄压，打开F13进气阀，再对罐体进行降温;关闭所有的蒸汽进口阀，打开水龙头，打开冷凝水的进出口阀(先出后进)。 (二) 接种 1. 对罐体进行降温，冷却到30?左右; 2. 接种;在进样孔旁围上一圈脱脂棉，倒上酒精，点火对加样孔进行灭菌，灭菌后，由进样孔进行接种。 (三) 开始发酵 1. 设置参数，温度设置在37?，打开循环水路的阀门，水龙头关小，开始发酵; 2. 取样;没两小时取样一次，取样前要相对管道进行灭菌，打开取样器的阀门，打开蒸汽进口阀，对管道灭菌15min，在冷却5min后方可取样，每次取样前都要对管道进行灭菌。将出样旋钮旋上，打开取样器的阀门，用离心管或试管接样，冷却后放入冰箱，每12h镜检一次，48h后统一检测OD值。 (四) 发酵结束 1. 发酵结束后，将样品全部放出; 2. 关闭进水阀，对夹套进行排水，最后关闭除出水阀外的所有阀门; 3. 将发酵罐电极拆下，清洗发酵罐。四、注意事项 1. 从准备到最后有三个阀门一直都是打开的，一个是储气罐底部的阀门，一个是发酵罐。的蒸汽出口阀门，一个是发酵罐的空气出口阀门F14(只在检查气密性时关闭过)2. 当对发酵罐进行空消和实消是空气的出口阀门都是打开的，防止发酵罐变形，进口阀门多是关闭的，防止倒吸。 3. 注意在两个地方要防止倒吸， 1) 在对空气过滤器进行灭菌时要先打开蒸汽进气阀F3，关闭F11,再打开F13进气阀 2) 实消完后要先将进气阀门都打开后才能打开空气进气阀F13. 4. 阀门的打开都是先出后进，先开出口阀再开进口阀，关闭时则相反，是先关进口再关出口 5. 进行空消是要注意罐内的压力，因为水变成蒸汽后会升大罐内的压力。 6. 实消时打开搅拌器使罐内物料受热均匀，当注意要在90?要关闭，以防烧坏电极。 7. 发酵所需的压力是有实验得出的。

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