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荧光光度法测定样品中糖精钠含量.doc

荧光光度法测定样品中糖精钠含量

高明健
2017-12-02 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《荧光光度法测定样品中糖精钠含量doc》,可适用于综合领域

荧光光度法测定样品中糖精钠含量实验分子荧光光度法测定样品中糖精钠含量一、实验目的(了解分子的电子结构、振动结构和转动结构掌握荧光光谱分析法的基本原理,学会利用工作曲线进行荧光定量分析的方法。二、实验原理糖精作为人工合成甜味剂,其学名为邻磺酰苯甲酰亚胺,分子式为CHONS。糖精为无色到白色结晶或白色晶状粉末,在水中溶解度很低,易溶于乙醇,乙醚,氯仿,碳酸钠水溶液及氨水中。对热不够稳定,无论是在酸性还是在碱性条件下,将其水溶液长时间加热则逐渐分解而失去甜味。因糖精难溶于水,故常用其钠盐,即糖精钠。糖精钠的分子式为CHONSNaHO,它为无色结晶,易溶于水,不溶于乙醚,氯仿等有机溶剂。其热稳定性与糖精类似但较糖精要好,其甜度为蔗糖的倍。糖精钠已有多年的使用历史,并广泛用于食品、医药、日用化工等行业中。糖精钠被摄入人体后,不分解,不吸收,将随尿排出,不供给热能,无营养价值。但是近年来国内外一些学者对糖精钠的致癌问题有所争论,尤其食用性及安全性越来越引起人们的重视,因此我国对糖精钠的使用量做出严格的规定(国标中规定糖精钠用于饮料等食品,其最大使用量为gkg)。由此看来,研究快速、高效的检测糖精钠的方法是十分必要的。目前测定食品中糖精钠的方法很多,国标中规定的测定方法有高效液相色谱法、薄层层析法和离子选择电极法。文献报道的测定方法有:比色法和紫外吸收分光光度法等。前者中以高效液相色谱法最为理想,后者中或需高温反应,或需配置大量试剂,其分析速度也较慢。荧光产生原理荧光是光致发光。某种物质的分子受到紫外光的激发,吸收光能后使电子发生能量跃迁,从基态能级跃迁至激发态能级,处于激发态的电子很不稳定,经过很短的时间后会释放出能量,即发出荧光,重新回到分子基态。荧光的产生过程:糖精钠可以用荧光光度法定量测定。对于稀溶液在实验条件相同的情况下同一物质的荧光强度与其浓度成正比。本实验用工作曲线法分析试样中的糖精钠含量。具体方法是:配制一系列不同含量的标准溶液测其荧光强度然后以浓度为横坐标荧光强度为纵坐标绘制工作曲线。在与标准溶液相同的条件下测未知试样的荧光强度从工作曲线上即可查出试样中糖精钠的浓度。三、仪器和试剂仪器()WGY型荧光分光光度计(天津港东)()cm石英比色皿()mL比色管个()吸量管:ml支ml支()洗耳球烧杯擦镜纸试剂()储备标准液(mgmL):精确称取g经干燥h的糖精钠于小烧杯中,加去离子水溶解,定容至mL容量瓶中。()工作标准液(mgmL):取上述储备溶液ml于一个ml容量瓶中用去离子水稀释定容至刻度摇匀。四、实验步骤糖精钠系列标准溶液及未知试样溶液的配制取个mL比色管用吸量管分别加入,mL糖精钠再取个mL比色管分别加入mL未知试样溶液然后各用去离子工作标准溶液水稀释定容至刻度,摇匀待测。启动WGY型荧光分光光度计()将WGY型荧光分光光度计度计氙灯置于“ON”的位置打开电源开关。()启动连接荧光光度计的计算机后双击WGY显示图标。静等仪器自检完成出现喀嚓声音后显示WGY主窗口后可以测定。发射光谱和激发光谱的绘制在熟悉WGY型荧光分光光度计的性能和操作方法的基础上根据本实验所用的标准溶液及未知试样溶液的实际情况学生自行设计实验参数测取发射光谱和激发光谱并找出最大发射波长和最大激发波长然后打印出光谱图。(其结果是:最大激发波长为nm,最大发射波长为nm,通带宽EXnm,负高压,扫描速度中档。起始波长分别为nm和nm)合成样品中糖精钠含量的测定根据绘制的发射光谱和激发光谱学生自行设计定量分析的仪器参数绘制工作曲线求出未知溶液的浓度并打印结果。五、数据处理将打印的未知溶液的两个结果取平均值再由平均值求出原始试样中的浓度。六、结果讨论学生自我评价仪器参数设计的水平和实验结果。

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