API20E对致病微生物检测应用

API20E对致病微生物检测应用 API20E对致病微生物检测应用 健康必读杂志2010年7月第7期Healthmum—readMag~ine2010JulvN01.17 ..曩药物与临床 AOI20E对致病微生物检测应用 张海艳 【中图分类号】R155【文献标识码】A【文章编号】1672—3783(2010】07—0221 —02 【摘要】本实验用API2oE和出入境行业检验标准(sN标准)~-65株食品中可疑茵 总结了API20E在食品常见致病菌 进行检测, 检测中优缺点. 【关键词】API20E,致病微生物,检测 沙门氏菌,志贺氏菌,耶尔森氏菌,霍乱弧 大肠杆菌, 菌,副溶血性菌等都是法定检验的致病菌,每一种致病菌都有 一 套不同的检验标准,对于基层的检验实验室来说,不但操作 程序复杂,而且要拥有品种繁多的生化试剂,另外还要耗费漫 长的检验时间,如大肠杆菌的检测,按照SN0168—92标准,从 开始到最后检大肠杆菌需要10天左有的时间. API细菌鉴定系统为国际公认标准(细菌)鉴定系统.本 研究用API20E分别测试大肠杆菌,沙门氏菌,霍乱弧菌,副溶 并用出入境行业检验标准的相应标准(sN 血性菌一些可疑样品, 标准)进行对照试验,总结了API20E在基层食品实验室检测中 的一些经验. 1样品,材料和仪器 1.1样品来源样品来自各进出口公司送检食品中分离得到 的可疑菌株,其中可疑大肠杆菌24株,沙门氏菌16株,可疑霍 乱弧菌7株,可疑副溶血性弧菌18株. 1.2SN法鉴定用的培养基和生化试剂均为北京陆桥技术有 限责任公司产品. 1.3API20E生化反应板及相关试剂为法国生物梅里埃公司 的产品. 2检验依据 2.1各致病菌SN检验依据 大肠杆菌检验方法:SN0169—9211].沙门氏菌检验方法: SN0170—92121.霍乱弧菌检验方法:SN/T1022—200113].副溶血 性弧菌检验方法:SN0173—92【4】. 2.2各致病菌API20E检验依据 API20E法的操作按厂家规定的操作方法程序执行. API20E法检测步骤【5】:(1)从分离平板挑取可疑单菌落 制成菌悬液(可疑弧菌的用0.85%的生理盐水,其余的用蒸馏 水),按操作说明书指导分别滴加于API20E试剂条各个微量生 化管内,37%培养24h?2h.(2)滴加附加试剂,判断各生化 管的反应结果是阳性还是阴性,并转化成相关的读数.(3) APILAB软件分析得出最终结果. 3结果 API20E检出大肠杆菌15株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株, 副溶血性弧菌3株; 作者简介:张海艳(1978.12一),女,硕士,主要从事病 原微生物教学和研究. 具体检测结果如下: 表1大肠杆菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:大肠杆菌:%id为95.8,T值为0.6, 好的鉴定结果. 表2沙门氏菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:甲型副伤寒沙门氏菌:%id为99 5,T值为1,很好的鉴定结果. 表3副溶血性弧菌阳性样品在API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:副溶血性弧菌:%id为98.4,T值为 0.92,好的鉴定结果. 表4可疑霍乱弧菌样品(实际为创伤弧菌)在 API20E试条中的生化反应结果 APILAB软件分析结果为:创伤弧菌:%id为99.7,T值为1.00, 很好的鉴定结果. SN法检出大肠杆菌l5株,沙门氏菌9株,霍乱弧菌0株,副 溶血性弧菌3株;两种检测方法结果完全一致. 4讨论 通过实验,我们对比了2种不同的检验方法优劣,发现API 20E在基层食品检测实验室的检验存在很大的优势. 优势:1不需高昂的仪器设备,仅需试剂条和一套软件, 基层实验室一般都能满足要求.优势2所需耗材种类少.SN法 中的生化培养基,种类繁多,费时费力,不易保存,对于基层 的检验实验室来说,不但要拥有品种繁多的生化试剂,而且操 作程序复杂,较难掌握.API20E用一种试剂条就可以检验肠 杆菌科和弧菌等多种食品常见致病菌,所需耗材简单.优势3 可鉴定多种致病菌.API20E是肠杆菌科和其它G一杆菌和弧菌 的标准鉴定系统,它可以用一种鉴定条来鉴定大肠杆菌,沙门 氏菌,志贺氏菌,耶尔森氏菌,霍乱弧菌,副溶血性菌等不同 的致病菌,而在国家标准(GB)和入境检验检疫行业标准 fsN)中每一种检验标准只能检验一种致病菌.优势4鉴定结果 和SN方法一致,分析更全面,详尽.API20E包含了SN法的绝 大部分生化反应,这保证了API20E的结果与SN法的结果是一 致的.此外还增加了SN法没有的一些生化反应,总生化鉴定反 . 应达N21种,加上API检索工具(APILABPlus分析软件), 分析更全面,详尽,能判断很多非典型鉴定模式,往往能直接 鉴定到亚种或型,而SN法只能鉴定出"是"或"非"某种细 菌.优势5所需时间短,在处理如食物中毒等突发事件时,可 以在较短的时间内得到结果.在食物中毒等突发事件的检验中 更体现出它的优点【6】.如大肠杆菌的检测,按照SN0169—92标 准,其中生化反应检测时间为4d(Koser氏枸橼酸肉汤36% (下转第227页) —— 221—— 健康必读杂志2010年7,EJ第7期Healthmust—readMagazine2010JulyNo1.7 药物与临床 在pivas中配置细胞毒性药物的体会 黄建华 【中图分类号】R471【文献标识码】C【文章编号】1672—3783(2010)07—0227 —01 细胞毒性药物指在生物学方面是有危害性影响的药品,可通过皮肤接触或吸人等方式造成包括生殖系统,泌尿,肝肾系 统的损害,还可致畸或损害生育功能.由于条件限制,护理人 员在开放的环境中配置该类药物,容易造成职业性损害,严重 威胁着护理人员的健康.静脉药物配置中心的建立弥补了这一 条件缺陷,加强了药物配置过程中职业暴露的防护.2004年10 月我院成~_Tpivas,目前负责14个病区的液体配置,日平均配置 2ooo~,其中细胞毒性药液占l%一2%,配置的细胞毒性药物主 要有5一FU,依托泊苷,顺铂,氟尿苷等.对于这5年多来细胞 毒性药物在pivas中配置的体会如下: 1配置细胞毒性药物的准备 1.1生物安全柜的准备护士要严格遵守操作规程,操作前 必须启动净化装置包括净化环境及生物安全柜.配置细胞毒性 药物必须在垂直气流的生物安全柜中进行,生物安全柜的过滤 能有效的拦截微生物颗粒及尘埃颗粒,同时也是细菌与病毒的 积集区,所以应由专业人员定期更换.安全柜的前窗除做清洁 外不得随意开启,以保持柜内气压.每周2次用清水无尘的抹布 擦拭回风槽及台板下面的玻璃碎屑,每月做操作问及柜内的空 气培养. 1.2操作台的清洁和消毒风机开启30分钟后柜内洁净度可 达到百级标准,操作前后用75%酒精擦拭安全柜内壁,台面, 以保证工作区无污染,顺序为从上到下,从前到后,从里到 外.同时紫外线各照射半小时,紫外线是一种电磁波,可杀 灭各种微生物,具有杀菌效果可靠,不污染环境,安全节约 等优点,在使用过程中,应保持紫外线灯表面的清洁,每周 用75%酒精棉球擦拭一次,发现灯管表面有灰尘,油污时,应 随时擦拭. 1.3护理人员的准备护士洗手后必须穿上防尘防静电的洁 净服,工作鞋,戴好口罩帽子.戴两副手套,里面是PE手套, 外面是无粉的乳胶手套,每操作3O分钟或遇手套破损及被药液 污染应及时更换,洁净服的袖口应卷在手套内. 2操作规程 2.1配置药液操作台应覆以一次性无菌布,减少药液的污 染,一旦污染或操作完毕及时更换.严格执行操作规程,保 持在离工作台外沿20cm,内沿8—10cm,并离台面至少lO一15cm区 域内进行操作.打开安瓿前,将安瓿颈部,顶端的药液弹至底 部,用无菌纱布包裹打开,折断安瓿时不要朝着自己;如果安 瓿内是需要溶解的粉剂,打开前至少要在工作台中放置5min使 浮质沉降,将溶媒物质沿安瓿壁慢慢加入,以避免药物粉末散 出.配置西林瓶的细胞毒性药物应避免强正压或强负压的操 作,抽取干净后使瓶内保持负压,再拔出针尖,以免药液溢 出.抽取药液同时要防止针头与针栓分离,针筒中液体不能超 过针筒容量的3/4. 2.2废弃物的处理药物空瓶要用密封的厚塑料袋封好后连 同配置的药液放于药框内传递给药师核对,核对正确后将空瓶 收集在带盖防漏的专用盛器里.注射器,使用的一次性治疗 巾,手套及其他物品在生物安全柜内放入密封袋中.密封袋和 容器外要有警示标识.操作完毕后由专人统一焚烧处理. 2.3操作完毕至少30min,待药物气溶胶和气雾吸除干净, 才能清洁安全柜,使用无菌的一次性无纤维纸清洁,以免药液 溅在操作台上造成污染.【1】 3体会 长期以来细胞毒性药物是由护士在没有任何保护的环境下 进行配置,建立配置中心以后,将细胞毒性药物在相对负压, 有排风的万级洁净间内,在生物安全柜的帮助下配置,大大减 少了对护士的危害,并为病人提供了更安全,规范的静脉化疗 药物. 参考文献 [1]刘琴,于淑燕,徐建梅.静脉药物配置中心对接触抗肿瘤 药物护士健康的影响及自我防护[J].护理实践与研 究,2009,6(16),83—84. 作者单位:202150新华医院(崇明)配置中心 (上接第221页) 96h),而API20E所有的生化发应都在24h内完成.不足之处: 1.API20E试剂盒相对较贵.2.API20E有些生化反应的颜色有时 会出现中间色,比~WONPG反应有时出现黄色或微黄,而判断标 准里说,黄色可考虑为阳性,有时会引起判断困难. 参考文献 [1]出口食品大肠杆菌检验方法. 进出口商品检验行业标准. [2]出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法.5N017 92.中华人民共和国进出口商品检验行业标准. [3]出口食品霍乱弧菌检验方法.SN/T1022-2001.中华人民共 和国进出口商品检验行业标准. [4]出口食品副溶血性弧菌检验方法.SN0173-92.中华人民共 和国进出口商品检验行业标准. SN0169—92.中华人民共和国作者单位:363000漳州卫生职业技术学院 —— 227——