交联烯丙基葡聚糖凝胶的合成及其性能

Vo1．13 l997年1月 高分子材料科学与工程 p0LY脓 IC M 阿 IAIS 9：瑾 ℃E AND l 唧 t G No-1 Ja几 l997 交联烯丙基葡聚糖凝胶的合成及其牲能? f， 。 ， 、 ，。一 I 三 ．塞国堡：：陈 群 张 灏．，王 忱 P／’ 。．‘江葶石袖化工学院应用化学幕·常州·2‘ j 。’j ^／， ． 一 占够／ 摘 蔓 、 通过烯丙基葡睾糖与N．N-甲樟一噩丙烯酰胺的悬浮幕夸交联，．I井了 状主奠烽丙●萄囊糖 触 ： 肭性融潮老，禹钳 彀 ， 关■翊葡橐靖鼍驶，化学与钧曩稳窟性，层析介质，分离性融 ，、 O tr ’f ’ t：-一 一 ， L ． l 一 ． 、 ‘ 生物饨学的飞速发晨，健 进了饨仡粤分离辱技术的苯l断进步。赣曲 ryt塑雯联烯丙差葡聚 糖凝腔具有独特的化学结梅，使官有良好的理化性能，柱县析操作时能获得根禽的流速，面且 分辨率和回收率高，是酶、多糖、棱酸和蛋白质等生物大分子分离纯化技来中不可头少的一类 亲水层析介质LI]。国内在生产 干扰索、臼介索 I、蛋白质A和乙肝疫苗等生物捌品过程中， 均使用此类昂贵的进口商品作为纯化分离材料。笔者以国产试荆为竦科，在配置有导谶筒的反 应器中，将烯丙基葡聚糖与N． ·甲撑一双丙烯酰胺悬浮聚合交联，合戚了此类交联烯丙基葡 聚糖珠状凝破。层析凝雎的性能和使用寿命，程走程度上取决于其麓厦l和化学稳定性．通过对 此凝胺的耐压性能、在有机藩荆中韵培账性、耐热稳定性、对生化实鼍I中常用_藩掖的皤定牲和 分离混合蛋白质样品的能力等 试， 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明所台成的交联烯丙基糖聚糖凝艘其青优良的层析行 为和较好的化学与物理稳定性 1实验帮分 ‘ ‘‘。 。。- ． “ 。。 1，1 原料与仪器 ． ． 实验中所用原料均为国产生化毁、化学钝或 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 壹封毁试剂，过硫酸铵按文献[2]所述方法 精制。聚合反应器是一种配置有导流筒的 多片稠矫挡板的、装有推进式搅拌器的和带有加热 夹套的反应器啪 紫外吸收值在上海分析仪器厂翻造的7520型分光光度计上 得。 ’ 1．2 烯丙基葡■■的皤备 。 将含有10．0 g葡聚糖的75 rrIL水溶液置于四口烧瓶中，加热此藩液至6O℃；然后，在搅拌 下加入3．0 g氧氧化钠t接着滴加3．0 g 3-穆再烯。搅搏反应4 h后，加入3．4 g冰醋酸终止反应。 用无水乙肆沉淀反应产物，经真空干燥得到烯丙基葡聚糖，产串为舯 。 1．3 室囊烯丙基葡聚■瓤胶的盒或 在古有90mL甲苯和分散荆P的聚者反应器中加入由24∞L水、8mL甲醇、0．3 gl过赢酸 ·中售石袖化工辩拄井置公司和扛荐省科羹蚩助镰鼍 收稿日期 1995一o7一拍I●馥稿收翻日期{l9姑一12—08 维普资讯 http://www.cqvip.com 第1抽 王 钒等：童联锛丙墓蕾聚糖蕞畦曲台戚丑其性能 铵、2．5 g烯丙基葡聚糖和2．5 gN． 一甲撑一双两烯酰胺组成的瞎渡l接着在50℃和氮气像护 下，快速搅拌反应4 h，得到的珠状交联烯丙基葡聚糖凝胺分别经己酸、丙酮和水洗涤后．爱泡 于15 的己醇溶液中侍用．产品湿体积约为60 mL。 1．4 鼍胶性健翻试 · r 1．4．1 分离蛋白质混各样品的性船：将凝胶装填于内径为14mm的玻璃层析分离柱中，用O．1 mol／I 的HcI溶液洗柱1 h，再用蒸馏水洗至中性l然后。用0．2 ／L的 l0H溶液洗柱，再用 蒸馏水洗至中性l接着用2～3倍柱体积的磷酸缓冲液(pI-I='／)洗柱。经此硬处理后，从由54．4 n1g醛缩酶( =1 58OOO)、30．7 rrIg牛血清白蛋白( =67000)和20．2 细胞色素(磁 12400)3种置白质组成的10InL混合样品中．取0．4InL进行柱层折1分禽，并在280 nm处穗量洗 脱}霞的紫外吸光值 o。层析行为如F 1(a)所示。 ’ 1．4．2 耐热稿定性试验：将漫态的凝胶于中性(pH=7)瓣件下置于高压灭菌器内．于0．2 MPa、120℃下消毒处理O 5 h后，在显截镜下观察其外形变化 并再次装柱考察其分离置白质 混音样品的性能(Fig．1(h))。 ‘ 1- 3 耐压性能试验：援腔经充分溶酝后装柱，以永为漉动相。调节水位高度(可得相应的压 力要求)， 定柱流出液体积，再换算成流速，结果如 品2所示。 - 1．4．4 在有机溶荆中的溶胀性：将一定量的甍腔置于董佰 四氢唳W,Wm~甲苯等有机溶荆 中．测定其体系变化，结果列于 b．1。 。。 1．4．S 凝胶的化学穗定性：以生化实验中常用自 ．1 mol／Ll-ICl、O．2~o]／LNaOH、8删 ／L屎 素、0．1 m0I／L醋酸、3O 乙腈水溶液和3o 异丙酪承溶液为试验溶耐，在室沮下将凝胶爱泡于 上述溶剂中，7 d后取出凝胶装柱，经预处理后蔼定层析分离性能，以考察其化学稳定性(Fig．1 (b)~Fig．1(g))。 2 结果与讨论 2．1 分膏蕾白质混合样品的性健 由Fig．1(a)可知．合成的交联烯丙基葡聚糖凝腔能较好地分离混台蛋白质样品，曲线中出 i 气 O 2I IB 0 2I I8 V(mI) V‘lI-1) ¨l lI噍 ∞ ■-k鼍P“ h 幽 岫 th．f ， ezpesu~的cI-e 1 日鼬 (|)．·r嘲-“ nI 0．2 rrd／L )^||(b)．0．1 rrd／LI-[CI【c)．nlmd／L耻觚 add (d)·30 2- I．d(e)·8md儿 Urea(『)·nd 3O a嘲∞itrlk【E) 册}岫 a1 25 c reape~velyf af~,r●Hd取 ~111{120 Cfor 30nn(h)． 一 一 一 维普资讯 http://www.cqvip.com 毫分子村*科学与工程 理的3个峰对应于分南后曲3种鼍白质，经橙铡、 琏3种蛋白质按分子量的大小6衄：醛培酶、牛趣 清白蛋白和细胞色素C)被依次洗脱。 2．2 凝胺的糟曩穗定性 l在显t镶下珥謇经加压 举处理后昀凝胶 0 元熔化、牯笺和破碎簪现象t葡且 l(h)所毒 的层折行为元明显变化，可见晕胶具有良好的 n． 姜 亘 睡 l997年 耐热稳定性 一 ． ． -- - ．- 。 一 ． ： 。 l：cM 。 辅 -- 由FiK．2可知，随 _医 柏撑 ，渣 递加 -l锄‘ 蹦 一“． 鞠． 雌，_ 快，当静水压超过250 m时，仍艟得剜较高的 是 ： 譬 流建-另壮-经显徽艟蕊寨无裂蟾球粒出孤，反 叫螂 ’-．-_岫。_ 二 |I 映了端晕胶具有良好的喇缝，耐压稚定性较好。 Tab．1中数据说明，由于旃柄极性不弼．凝 股体积皋生变化 在考骞的4种有机密剂中捧胀性艟_大致相局。 。。 2．3 凝胶的化掌穗定性 ． ， 。 ． l‘b)～ ·1(g)毒霸 晕阜mol／L，星 9 n~,／LNl叩、3 z．嚣落雄和 异 丙醇溶液处理后，其分离蛋白质混合样品的性蓖无显蒂羞l别I砸姆溥9．3· 村L尊辟鬻0．丑 mol／LI-ICI溶液辨海后·凝蹿詹_舔曲线有所l鸾蛳说 事酸 岔藤 啦鞫 准真鼠}另外-簿备 种让学试剂赴理后的凝腕，其外形l和景折赢渣拘需明是变 由此表嚼。凝臃具有．．定的化学 稳定性。 。 t ● 考 文 t I Pharms~aⅨ砒 Bi∞dⅡl0I嘴 P'mduc~Caml~ue，1994I 29 2 是摹佩 (WoCeneoe1)．商分子化学宴验 (Ex~ rnenmfofPolymerOmmistry)．安重科擎技术出艟牡 (Anl~ Science andTechnology Press)-1987 豁 ；’ f 3 球群(c Q-n)·赡盒盘、(Q瞄J 。 )．中且缘学鑫第赤扁反应挂骞分子拳术讨论台论文集‘h∞eedir．萨 0f 把6m池6o RmcfivePolyme~Coherence)，西安 [Xian)．1990：178 SYNTHESISANDPROPERTIESOFCROSS．LINKEDCOPOLYMEROF AlJ Y1．DEXTRAN AlqD N．N ． 崛rrHYt范NEB撼矗e碰YLAh皿 E WangFan，So仉gGuoq_忸嚼 QIen ，ZhengH ao，讹 Chin (脚 ．of~ Ocm+Jian~．鼬 ． 犀 Te~bn．,。a喇加 “) · ABSTRACT ’ In this paper，a bE咀dy filtration media w∞obtained b cm~-linking~llyl dextran with N，N 一 methyle~ sacrylamlde by 111ea~3s of suspension c0p0ly“国d主丑 帆．Pr0 s of chcornatography separation，chemical and phy菌ca1 s衄biu如 0f the were investigated．1he啦edia dispalys excenen! sepamtioa characteristics，a吐 is ． both chemically and phys~cally 5tab‘e．1he resuhs of tests，where the gel哪 。【p∞edtOvariouscomn y used bufferinh0che 时 {唧one妊 k at 25℃，showedthat 萄gnjficant changeⅥ甩s n0tfoundinthe chromat~zaphic ptope1"~ the 1inmost ca Itwasalso observedthatthe鲥 hadn0mbiethermal玉曲 i nt ri i ． x 霄0-出I d嘲 n I， cM and pby cal 5Iab．山矗馏。chronm~graphy media separafioa characterimics 维普资讯 http://www.cqvip.com