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杭白菊清除活性氧自由基研究

杭白菊清除活性氧自由基研究一 S f、争机卅食品科技 1994年第3期墓第3●期自由基是游离存在的．带有不成对电子的分子、原子或离子．其化学性质十分活泼。生物体内常有的自由基有：超氧化物阴离子自由基、羟自由基、过氧离子基以及有机过氧基等。近年来研究证实自由基常与癌症衰老及自身多种免疫性疾病有关。在正常生理情况下．自由基不断产生也不断被清除，处于平衡状态下．其浓度是极低的。但病理条件下．自由基浓度增加．造成肘机体的损伤。因此，寻找利于人体吸收的能清除体内过量自由基的外...

一 S f、争机卅食品科技 1994年第3期墓第3●期自由基是游离存在的．带有不成对电子的分子、原子或离子．其化学性质十分活泼。生物体内常有的自由基有：超氧化物阴离子自由基、羟自由基、过氧离子基以及有机过氧基等。近年来研究证实自由基常与癌症衰老及自身多种免疫性疾病有关。在正常生理情况下．自由基不断产生也不断被清除，处于平衡状态下．其浓度是极低的。但病理条件下．自由基浓度增加．造成肘机体的损伤。因此，寻找利于人体吸收的能清除体内过量自由基的外源性清除剂，对疾病的治疗．保护人类健康是有益的．因此，有关这方面的研越来越引起人们的重视。抗白菊是植物性传统饮料，含有黄酮类化合物、腺嘌呤、胆碱，水苏碱，氪基酸及 vB，等。因为有清热解毒．生津止渴．甲肝明目，消疲怡神等保健作用而受人们青晾。据报道甘草中黄酮类成份有明显的抗溃疡、解痉、抗菌、消炎、降血脂．镇埔等作用。关于甘草中黄酮以及芦丁、槲皮索干【』异斟皮苷等黄酮类化合物对自由基清除的研宽已有报道，面对杭白菊所含黄酮类等有效成分是否肓清除作用尚未见报。因此．进行这方面的研宽对揭示忧白菊这一传统植物性饮料的保健实质具有理论意义．对其综合利用和深度加工亦有指导价值．材料和方法 (一)杭白菊承浸出液制备：称取市售菊花 3s加沸水 225m!，潍承浴中浸 j5分钟，抽滤，滤液备用．各取上述滤液】00ml，共 5份。分别加 0．03、0．6，0．9和 j．2县的聚乙烯吡咯烷酮 (该烷酮是多酚类特效吸附剂，日本东京化成工业株式会社生产)。 (二)光照核黄索反应及清除超氧化物阴离子自由基效果测定：反应体系基本上依据 Beauchanp。用 PH7．8的磷酸缓冲液 (50×【0 M)为溶荆，配制含 2×】0 M 棱黄索、】3×】0 M 甲硫氨酸，75×【0 MNBT以及不同量浸提渣的混合液。以缓冲液代替清除剂作空白对照．不照光作佼正．在 25℃，8KLX条件下光照 l 0分钟．在 560nm处测吸光度。 (三)多酚类测定；高锰酸钾滴定法。 (四)黄酮类化台绚测定；三氯化铝比色法。实验结果 · 3 · 维普资讯 http://www.cqvip.com 抗卅★品抖拄 l蚰‘年第 3辫总第期 (一)抗白葛浸出液清跨超置自由基 o 的垃果棱黄索在光照条件下产生 o ，o 能将氯化硝基四氰唑兰(NBT)还原为甲詹，后者为兰色物质，在 56Dm 波长处呈最大吸收，其吸光度 A，表示体系中 o 的含量．而清除剂能清除 07，从而抑髑了蓝色甲膳形成，测得吸光度 A，，A—A．表示 07的减步量，抑制的百分率与清除荆的量在一定范围内成正比美系。清除率( ) 一； x 1o0 ^ 图一，杭白菊水漫出液对 o 有明显的清除效果，在 4oIl1以下抑制的百分率随抗白菊提取液加入量增加而增加． (--)体糸中反应时间和托白薷浸出液对自由基清除率的关系图二，在不加杭菊粗提液的空白反应体系中，光化还原速率在 10分钟以内，随时同直线上升，l0分钟后还原速率趋向稳定．加杭菊粗提液的体系中，有明显的抑制效果，l0分钟前后，抑制率( )最高； l 0分钟后抑制作用反而下降． (三)抚蒋花中不同部位对 0 清除率的比鞋见袁一，杭菊花的三十部位中(花蒂、花蕊、花瓣)，以花蒂清除率最高，其次是花瓣。清除率和相应的多酚类、黄酮类含量差异相一致． (口)多酚和曹鹕羹在抗白萄清除超氯自由基中的作用见罔三，杭菊花漫出渣经聚乙烯吡咯烷酮吸酣多酚和黄酮后，其清除超氧自由基能力随之迅速下降，溶液中多酚黄酮的量和清除率呈相同趋势．讨论该体系产生及清除作用重现性较好，实验表明杭白菊水漫出液对光照棱黄索产生的超氧化物鹏离子自由基有明显的清除作用，由于超氧化墙阴离子自由基常是生成羟自由基等的前体，而这些物质被认为和人的衰老及一些疾病有关，因此杭白菊可能会抑制超氧化钧阴离子自由基在体内对机体产生的进一步损伤，在该实验中，掌握反应时同十分重要，因为反应 10分钟后，清除率反而下降，这可能是杭菊中某些成份起了助氧化作用．表一、图三表明，杭菊花清除自由基的能力和其内舍的多酚类．及黄酮类量有较大的相关，可能多酚类和黄酮类是起清除作用的主体成分，当然，杭白菊中的 AA及嘌呤碱等内吉成分可瞻也参予了清除作用．据丹宁(1989)等报遭 AA对光照棱黄索反应产生的 0 有一定的清除作用}shix， (】991)等证实甲基曛呤类化合物对羟基自由基有清除，从而可髓闻接地抑锕了 07 引起的连锁反应．因此，关于抗白菊中何种成份参予清除或主导作用．仍需进一步研究．另外，体内存在的自由基有多种，杭菊化除了对光照棱黄索产生 O7有清除作用，对其它体系产生的不同自由基是否也有清除作用，这也是有符进一步研究的内窖。维普资讯 http://www.cqvip.com 抗’H★品辞技 1帕●年第3期皇第3|期婷套凿廷圉三杭白菊清除自由基能力和多酚、黄酮类含量关系．多酚类 ·黄酮类 ×清除率丧一杭菊花不同舒位对 0 的蒲譬怍用花蕊花蒂花 ■ 多酚娄( ) 4．2O 5．04 4．52 黄硐类 H I 4．2 J 6．8 J6+0 j膏J；龛辜 39 53 {5 ／／／ ∞I／．．．．．。 — — —— — 一翘瑚 ∞ 嚣 ‘ a 王习 J．岫囝= 杭蒲花粗提渡对NBT光他还原的}唰时闻变化曲线 I：不加粗捏液； Ⅱ：加入粗提液 · 5· 浔篮惩一；、暑I1 维普资讯 http://www.cqvip.com

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