丙酮沉淀法提取茶多糖的研究

·1O· 杭州食品科技 2004年第1期 总第 72期 摘要：本论文以信阳毛尖为研究对象，以水为溶剂，在一定的条件下提取茶多糖。提取液用丙 酮进行沉淀，选取沉淀剂用量、沉淀时间和离心时间三个因素做单因素实验，然后通过正交实验方 法确定了丙酮沉淀法的最佳工艺条件。 关键词：信阳毛尖；茶多糖；沉淀条件；研究 O 前言 河南省是茶叶的主产区，盛产信阳毛尖，信阳毛尖虽然是中国十大名茶，但由于它成名较 晚，历史不长，关于它的研究还不是很多。目前茶多糖提取过程中，提取液主要用乙醇沉淀法、 丙酮沉淀法和CTAB沉淀法来得到茶多糖，本实验主要对信阳毛尖茶多糖提取过程中丙酮沉 淀法进行研究，以期得到最佳的工艺条件。 1 材料与仪器 信阳毛尖茶(河南信阳产)丙酮、无水乙醇、无水乙醚；BS11OS电子天平，北京塞多利斯天 平有限公司；FZ102植物粉碎机，河北省黄骅市齐家务科学仪器厂；电热恒温水浴锅，医疗器械 五厂；LD5—10台式离心机，北京医用离心机厂。 2 实验方法 2．1 实验总流程 茶叶一取样一磨碎(过40~50目筛)一温水浸提一沉淀剂沉淀(丙酮)一离心得沉淀物一 无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌洗涤2次一真空干燥一得粗茶多糖一称量 2．2 丙酮沉淀法的实验研究 用浸提温度60"C，浸提时间55min，液固比25：1，浸提次数为2次的浸提条件，得到浸提 液，选取丙酮做沉淀剂，按照不同的实验条件分别沉淀浸提液中的多糖，离心后，沉淀物置真空 维普资讯 http://www.cqvip.com 杭州食品科技 2OO4年第 1期 总第 72期 干燥箱中，在真空度0．1MPa，温度为5O℃条件下干燥2h，称重。 ． 2．2．1 单因素实验 2．2．1．1 丙酮加入量的影响 取浸提液50mL，选取浸提液：丙酮分别为 1：1、1：1．5、1：2、1：2．5、1：3加入到浸提 液中，静置12h，然后离心lOmin(转速4000转／min)，沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水乙醚 交替搅拌洗涤 2次，真空干燥后称重，分析沉淀剂加入量的影响。 2．2．1．2 沉淀时间的影响 取浸提液5Oral，选取浸提液：丙酮为 1：2进行沉淀操作，分别静置3h、6h、9h、12h、15h， 然后离心lOmin(转速4000转／re_in)，沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌洗涤 2 次，真空干燥后称重，分析沉淀时间的影响。 2．2．1．3 离心时间的影响 取浸提液 50mL，选取浸提液：丙酮为1：2进行沉淀操作，静置时间为12h，离心时间分别 为5rain、lOmin、15min(转速 400转／min)，沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌 洗涤2次，真空干燥后称重，分析离心时间的影响。 2．2．2 丙酮沉淀法正交实验设计 由单因素实验结果分析，确定—个三因素、三水平的正交实验，三因素分别沉淀时间、丙酮 加入量、离心时间。沉淀时间的三个水平分别是lOb、12h、14h；浸提液：丙酮的三个水平分别是 1：1．5、1：2、1：2．5；离心时间的三个水平分别是5min、lOmin、15min。离心机转速为4000转 ／re_in，沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌洗涤2次，真空干燥后称重，得出较佳 的实验条件。 3 结果与讨论 3．1 单因素实验结果 3．1．1 沉淀剂加入量对提取粗茶多糖的影响 沉淀剂加入量对提取粗茶多糖的影响，所得粗茶多糖含量如 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 3--1所示： 表3—1 不同丙酮加人量沉淀所得粗茶多糖的量 所得结果如图3—1所示： 由图3--1可以看出，沉淀剂加入量对多糖的沉淀有一定的影响，在沉淀剂加入量 75mL - - ,lOOmL([!p浸提液与沉淀剂之比为1：1．5～1：2)之间有一明显的增加，以后随着沉淀剂加 入量的增大，茶多糖沉淀量反而有所下降，表明沉淀剂加入量在这一区间段较好 3．1．2 沉淀时间对提取粗茶多糖的影响 ’ ． 维普资讯 http://www.cqvip.com · 12· 杭州食品科技 2004年第 1期 总第 72期 O．O4 一 厂 O．O3 捌 ’ 0． 02 寨0．01 捺 0 50 100 150 200 丙酮加入量 (皿L) 图3-1丙酮加入量对茶多糖沉淀量的影响 沉淀时间对提取粗茶多糖的影响，所得粗茶多糖含量如表 3—2所示 ： 表3—2 不同沉淀时间所得粗茶多糖的量 沉淀时间(h) 3 6 9 12 15 粗菜多糖的量(g) 0．0286 0．0303 0．0334 0．0336 0．0342 所得结果对比如图3—2所示： O．O36 捌 0·032 寒0．028 悄 骤 0．024 3 6 9 12 15 沉淀时间 (h) 图3-2沉淀时间对茶多糖沉淀量的影响 (丙酮) 从图3--2可以看出，总体看来，随着沉淀时间的延长，茶多糖沉淀量增大，在沉淀时间为 6hr~9hr有较明显的增加，9hr以后趋于平缓，说明在6hr~9hr这一时间段沉淀效果较好。 3．1．3 离心时间对提取粗茶多糖的影响 离心时间对提取粗茶多糖的影响所得粗茶多糖的量如表3—3所示： 表3-3 不同离心时间所得粗茶多糖的量 所得结果对比如图 3—3所示： 由图3—3可以看出，在离心时间5~15min范围内，随着时间的延长，茶多糖沉淀量增大， lOmin以后趋于平缓，所以离心时间lOmin左右较好。 维普资讯 http://www.cqvip.com 杭州食品科技 2004年第1期 总第72期 ·l3· 0．04 嘲 1 0．035 冀 礁 0．03 O 离心时间 (min) 图 3-3离心时间对茶多糖沉淀量的影响 (丙酮) 3．2 正交实验 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 及结果分析 根据3．1．1、3．1．2、3．1．3所得结果，我们选择沉淀时间、沉淀剂丙酮加入量、离心时间三 因素，每个因素选三个水平做正交实验。实验方案及结果如表3--4、3--5所示： 表 3—4 因素水平表 表3—5 正交实验方案及结果 各列极差R的大小．说明该列相应的因素在实验中对指标作用的大小．极差大的因素往 往是重要的因素·极差小的因素可能是不重要的因素。表中第2列的极差R一0．0390．比其他 维普资讯 http://www.cqvip.com · l4， 杭州食品科技 2004年第 1期 总第 72期 各列的R都大．说明丙酮加人量是重要因素．丙酮加入量 100比75能明显提高多糖得率，第l 列的极差R一0．0207比其他各列极差都，J、．说明离 L,H,-j-f~-j用8min与用10min对得率的影响 不大 采用R的大小．可以大致排出各因素的主次顺序，即丙酮加入量>沉淀时间>离 L,B,-j-间。 由上面分析．可得算一算的因素水平好搭配为：A。B3C 即离 L,B,-j-间为12min、丙酮加入量 125mL、沉淀时间为 10h。而直接看的好搭配为：A。B3C 即离 L,B,-j-间 12rain、丙酮加入量 100mL、沉淀时间为 10h。 由于算一算的好搭配不在已做过的实验中，为此需做验证实验，即在同样的提取条件下， 沉淀条件为：离心时间12min、丙酮加入量 125mL、沉淀时间为 10h。在此条件下的所得粗茶多 糖量为0．0457g。大于 8号的 0．0443g，所以确定丙酮沉淀法的最佳沉淀条件为：离心时间 12min、丙酮加入量 125mL(即浸提液 ：丙酮---1：2．5)、沉淀时间10h，最佳条件下多糖得率为 2．O9 。 4 结 论 通过单因素实验和正交实验的结果得出。信阳毛尖茶多糖提取过程中，丙酮沉淀法的最佳 工艺条件为：离心时间 12min、丙酮加入量 125mL(即浸提液 ：丙酮一1：2．5)、沉淀时间 10h， 最佳条件下多糖得率为 2．O9 。 维普资讯 http://www.cqvip.com