洋葱总黄酮的提取及鉴别

洋葱总黄酮的提取及鉴别              作者:黄锁义 覃成箭 姚小敏 梁 宇 【关键词】  洋葱     摘要:目的为充分利用洋葱植物资 源～避免资源的浪费～探讨洋葱总黄酮的提取及鉴别方法。 方法采用纯物理的工艺流程过程和紫外线分光光度法从洋 葱中提取黄酮类物质～对所提取的黄酮类物质进行验证。结 果测得样品中总黄酮的含量C=4.84%。回收率为99.4%～其 纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程～无任何化 学变化及污染～是提取洋葱黄酮类物质的有效途径。     关键词:洋葱,  总黄酮,   提取,  鉴别     Extraction and Distinguishing of the Total Flavone from Onion    Abstract:ObjectiveIn order to make use of the resources of onion, avoid wasting, approach the extraction of total flavone of onion.MethodsUsing purely physical process flow and spectrophotometry to extract and check the flavone of onion.ResultsBy this method getting the contents of the total flavone of onion is 4.84% and the rate of recovery is 99.4% with high outpat and purity.ConclusionThis method is a pure physical process, and has not any chemical change and pollution. It is an ideal way to extract the flavone of onion.     Key words:Onion;  Total flavone;  Extraction;  Distinguish     洋葱～又称葱头～属百合科葱属草 本植物～食用可生可熟～可荤可素～欧美国家誉其为“菜中 皇后”。祖国医学认为～洋葱性平～味甘、辛,其功能:健 胃、消食、平肝、润肠、利尿、发汗。临床上 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明常吃洋葱 对身体有很多益处:促进钠盐排泄～有降血压、降血脂、抗 动脉硬化～预防血栓～减少心梗和脑血栓概率,降低血糖含 量～治疗糖尿病,缓解哮喘～抑制胃癌、食道癌、结肠癌、 乳腺癌,预防骨质疏松,预防老年斑等。另外～洋葱含抗菌、 抗炎物质～吃洋葱可防治肠炎痢疾～降低胆固醇～防治冠心病、脑梗塞、心肌梗塞、动脉硬化、脑卒中、高血压、头痛、肩周炎、便秘、更年期综合征及肥胖等,1, 。     现代医学研究发现～洋葱含挥发油、硫化物、类黄酮、甾体皂苷类和前列腺素类等化学成分～有多种药用价值,2, ～为了充分利用～笔者对洋葱中黄酮类成分进行提取与鉴别。现将过程介绍如下。     1  材料与方法     1.1  材料?市售新鲜的洋葱。?试剂:95%乙醇,甲醇CP,三氯化铝CP,盐酸CP,氨水CP,正丁醇CP,冰乙酸CP,乙醇乙酯CP,芦丁对照品,中国生物制品检定所,。?仪器设备:UV-755B紫外线分光光度计,上海分析仪器总厂,,DZF-150小型真空恒温干燥箱,郑州长城科工贸易有限公司,,80-2离心沉淀器,上海分析器械厂,,ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)。     1.2  方法     1.2.1  工艺流程洋葱中总黄 酮提取工艺流程。见图1。     图1  洋葱中总黄酮提取工艺流程     1.2.2  操作步骤取市售新鲜洋葱～切碎～烘干～取50 g～置于大的烧杯中～加蒸馏水煮沸3 h。冷却后进行粗滤～对滤渣用上述方法进行再浸取2次～将3次滤液合并～滤液用高速离心机分离 15 min～1 500 r/min。并进行加热浓缩,加热温度在85?左右,。浓缩冷却后加入等体积95%乙醇～放入冰箱内2 h。用高速离心机进行分离15 min～1 500 r/min。过滤得滤液滤渣～弃去滤渣。对滤液进行蒸发浓缩,加热温度在85?左右,。待乙醇蒸发完后～将浓液置于真空干燥箱中干燥成疏松固体～粉碎得终产物。     1.3  总黄酮的含量测定     1.3.1  标准曲线的制备?对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品200 mg～置于100 ml容量瓶中～加入95,乙醇溶液并稀释至刻度～摇匀。精密称取10 ml置于100 ml容量瓶中～加入95%乙醇使成100 ml, 摇匀即得,每1ml含有无水芦丁0.2 mg,?标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液0.0～2.0～4.0～6.0～8.0～12.0  ml分置于50 ml容量瓶中～各加95%乙醇12 ml～加10%硝酸钠溶液2.0 ml～混匀～放置6 min～再加10%硝酸钠溶液2.0 ml～混匀～放置6 min～加5%氢氧化钠溶液20 ml～最后用95%乙醇稀释至刻度～摇匀～以第1瓶为空白溶液～用UV-755B紫外分光光度计～在500 nm,3,上测定吸光度。结果见表1。     表1  紫外线分光光度计测定吸光度C/mg・ml-1  (略)      1.3.2  提取物含量的测定精密称定提取物1.500 0 g～置索氏提取器中～加95%乙醇回流至无色,6，8 h,～将提取液置于烧杯中～沸水浴加热浓缩至干～再用热水洗涤3次～将洗液移至分液漏斗中～并加无水正丁醇液萃取3~5次～10 ml/次。合并萃取液于烧杯中～沸水浴蒸干～再加95%乙醇使其溶解～并移于50 ml容量瓶中～再加95%乙醇至刻度～摇匀。精密 1量取10 ml于50 ml容量瓶中～加95%乙醇至刻度～摇匀～按标准曲线的制备操作测定吸光度～A=0.353。1.3.3  颜色反应?紫外光下呈色反应:取该样品溶液 点在滤纸上～在可见光下呈灰黄色～在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。?浓氨水反应:取该样品溶液点在滤纸上～将滤纸在氨水上方熏30 s～立即在紫外光下观察～呈极明显的黄褐色荧光斑点。?三氯化铝反应:取样品溶液点在滤纸上～滴加1,三氯化铝乙醇溶液～吹干。在可见光下呈灰黄色～在紫外光下呈黄色荧光斑点。?乙酸镁反应:取样品溶液点在滤纸上～滴加1%乙酸镁甲醇溶液～吹干～紫外光下呈黄色斑点。?盐酸镁粉反应:取乙醇提取液1 ml于试管中加镁粉～再加入浓的盐酸数滴,1次加入,～在泡沫处呈紫红色。     1.3.4  纸层析取样品溶液10 μl点在滤纸上。用正丁醇?醋酸?水=4?1?5为展开剂～上行展开5 h～取出晾干。喷1%氯化铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下～可见荧光斑点。     2  结果     A=0.353～根据回归方程:A=1.243 3C-0.008 1～计算样品中总黄酮的含C=4.84%。回收实验:精密称提取物1.500 0g～加入芦丁对照品1.000 0g～同前样品测定方法操作测定吸光度～求出回收率为99.4%。     3  讨论     实验结果表明～本实验方法工艺简单～回收率为99.4%～利用本文所提供的提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。此方法采用全物理过程～无任何化学变化及污染～且该方法操作简单方便～是一条理想的提取黄酮类物质的途径。黄酮类化合物是一大类天然产物～广泛存在于植物界～是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇～其它包括双氢黄,醇,、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。天然来源的生物黄酮分子量小～能被人体迅速吸收～能通过血脑屏障～能进入脂肪组织～进而体现出如下功能:消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大脑及其他脏器细胞的功能。 黄酮类化合物具有抗癌抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化抗衰老、抗辐射等作用,4，8,。近年来～世界上掀起了植物药开发的热潮～植物药以其天然低毒的特点倍受青睐～而黄酮类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目～洋葱分布广泛～实验结果表明～洋葱中含有较为丰富的黄酮。因此～洋葱具有广泛开发和利用价值～值得综合利用和加强资源开发。     参考文献:     ,1,  张京春,陈可冀.洋葱-全球性保健食品,J,.国外医学・中医中药分册,2003,25(6):335.     ,2,  唐传核.植物功能性的食品,M,.北京:化学工业出版社,2004:121.     ,3,  李冬菊.山楂叶总黄酮的提取及鉴别,J,.辽宁中医杂志,2003,30(7):578.     ,4,  华光军,郭  勇.黄酮类化合物药理研究进展,J,.广东药学,1999,9(4):9.     ,5,  黄河胜,马传庚,陈志武.黄酮类化合物药理作用研究进展,J,.中国中药杂志,2000,25(10):499.     ,6,  王  玮,王  琳. 黄酮类化合物的研究进展,J,.沈阳医学院学报,2002,4(2):115.     ,7,  曹纬国,刘志勤,邵  云,等. 黄酮类化合物药理作用研究进展,J,.西北植物学报,2003,23(12):2241.     ,8,  姜国芳,谢宗波,乐长高.银杏叶黄酮类化合物的研究进展,J,.时珍国医国药,2004,15(5):306.