双歧杆菌发酵乳的研究及临床效果观察

双歧杆菌发酵乳的研究及临床效果观察 胡 援 张宝元 阎 春 崔 彦 马晓虹 _ - - - ● — — _ - 一 ● _ _ — _ — ● _ - ～ (首都儿科研究室) 籀 耍：本实验菌种来源为北京东外乳品厂，由中科院微生物研究所鉴定的两歧双歧杆菌．利用我 所高科技优势，经反复筛选，驯化 再鉴定．扩大培养，制成活菌数高达一亿以上／m1的双歧杆菌发酵 乳．经我所附属医院临床8o铡治疗试验，对腹泻，便秘、消化不良等痘有良好的疗效，可调节人体微生 卷平衡，增加免疫力，安全无毒． A丑STRACT In this paper．we produ~ed the forme11ted mi Lk with more thai1 19'／ml lactobaciIlus blfidns，which is obtained through selection，determination a11d exalldillg eultivati o n from gelleral la~tobaeillus bifidns ． After elillieal observatio11．we filld this mi!k ca11 adjust huron11 s miero--ecological--halalice，i11crease the immunity and it is safety ． 一 前 宫 双歧杆菌是一种与人体健康关系极为密切的正常生理性细菌，自1899年法国Tis sler首先由母乳营 养)Lt粪便中分离出双歧杆菌以后，许多科学工作者对它进行了一系列的研究，验证了其是肠 遭 菌 群 lO0多种微生物中典型的对机俸只有好处没有害处的有益菌．如．抑制脑遭腐败菌的腐败作用；阻 止 毒 素胺的形成 合成多种维生素 促使酪蛋白的消化I有利于二价铁，钙的吸收}恢复和维持体内微生态 平衡t调整菌群失调；降解亚硝胺等致癌物}澈活吞噬细胞的活性；清除自由基．过氧化脂质及麻败细 菌产生的吲噪 胺，氨、硫化氢等有害物质． 但随着年龄的增长，环境污染 抗生素的滥用．该菌含量均可大大下降．困此如何使双歧杆菌在人 体脑道中始终值居优势7如何弥补肠内双歧杆菌的不足7是近20年来发达国家竟相研究的课题之一，根 据该菌能在肠道定植的特点，设想将其加入饮品或食品带八脑内的想法，也就应运而生．从 70年 代 E卫 后，一些国家相继研制出双歧杆菌制剂，曾用于治疗各种因素引起的菌群失调．国内类似产品仅有大连 医学院研制的 。回春生 胶囊． 本研究采用现代厌氧菌实验技术与传统的生物发酵技术相结合的方法．利用双歧杆菌使牛乳发酵制 成双歧乳，并经临床验证其疗效，为双歧杆菌在食品与药品中的应用研究进行了一些探讨，初步摸索了 规模化生产的工艺挠术． ：、实验材料与方法 1．实验材料来源及鉴定 (1)菌种来源：北京东外乳品厂 (2)材料来 源 a．脱脂奶粉：北京南郊乳品厂 b ．蛋白糖：深圳郎氏蛋白糖厂 c ．酵母粉 北京海淀 区微生物培养基制品厂． 【3)菌种鉴定：两歧双歧杆菌 (由中科院微生物研究所鉴定)． 3 一 ，一 一 一 il 维普资讯 http://www.cqvip.com (4)菌种毒性试验依据： a ．根据北京市乳品研究所， 无害，有益健康． b ．据中科院微生物所试验， 物无任何毒性． 市东外乳品厂 湖北武汉市一轻研究所报告 双歧杆菌酸奶对人体无毒 双歧杆菌 (两歧双歧杆菌，婴儿双歧，青春双岐，短双岐等)对人和动 c ．据大连医院康自教授报告，双歧杆菌小鼠~ LDso>500em~,／k~,，小鼠静注 6亿个，只，腹腔注 射15亿个／只，均未见有任何不良反应． 2．主要设备 (1)超净台 (2)均质机 (8)发酵罐 (4)恒温箱 (5)灌装自动封盖机 8．研制内容 (1)菌种分离．培养与鉴定t用无菌接种环将母乳营养几的新鲜粪便以硫乙醇酸盐 (还原剂)肉 扬稀释后接种于IlL培养基本器上，用无菌L彤玻璃棒搅匀，置于氏氧罐中 (混合气体)，37’c培养蚰一 72小时，长出的菌落经耐氧试验，革兰氏染色镶检，生化鉴定后符合双歧杆菌者，保存菌种． (2)耐氧驯化：首先将各菌种在一般好氧条件下培养于深层牛奶培基中，观察其凝乳时间，选择 其中凝乳时间短的，在脱脂牛乳培养基中，添加促进生长发育的物质及能降低氧化还原电位的葡萄搪， (因双歧杆菌繁殖时需要低氧化还原电位)由起始在厌氧条件下培养，逐步增加基质气相中 的 氧 气 组 分。经过多次传代培养使菌种能适立培养在一般好氧条件下的牛乳培基中-并进行正常发酵． (3)菌种的再鉴定 对经耐氧 f化选育出的双歧杆菌菌种．再进行生化鉴定，以证实其遗传的稳定性． (4)发酵剂的制备。生产双歧乳的前提条件是制备双歧杆菌活菌数较高，而凝乳时何较短的发酵 剂，发酵剂的制备又受很多因素的影响，经过反复试验，最后确定了生产用双歧杆菌发酵的最佳条件． 4．工艺 流程 快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计 殛说明： 原料乳一过滤一计量一配料．-过滤一计量一糖 a I b 灭菌c I 2令却 l 促进物质一接种一发酵剂一双歧杆菌苗种 I d发酵 l 混合一乳酸菌发酵剂 l 均质 l e灌装 l f后发酵一成品一检验一出品 工艺说髓。 a 原料乳为脱脂奶粉． h 抽糖量为1嘶． c 牛乳的灭菌温度12：1’c高压灭菌． d 培养发酵温度为42’c恒温， 6—7小时凝乳． e 分装前涂片．镜下鉴定．无杂菌污染． f 培养结束后，将产品置于4 c左右的冷藏室内进行后发酵．T>10‘C细菌继续生长，T<4。C 4 维普资讯 http://www.cqvip.com 结构破坏． 全过程必须严格注意无菌操作，各与发酵乳接触的容器和用具必须彻底灭菌， 防杂菌污染· 技术关键 (1)发酵剂组成及添加量的确定． (2)双歧杆菌台菌物料的制备研究及提高活菌率的研究． 5．鉴定 经革兰氏染色后的双歧杆菌在显檄镜下呈革兰氏阳性，无芽孢、不运动．粗大．多形态的不规则杆 菌．在好氧乳培基中较压氧管中长得粗壮，短杆状、不分叉或分叉，以不分叉为多，当转八厌氧管中分 叉增多。 6．发酵剂组成及添加量 双歧 杆菌发酵剂最后决定由两部分组成，双歧杆菌发酵剂和酸奶发酵剂 ．添加量分别为5啊和4啊． 因为酸奶发酵剂中菌类为需氧菌，它们在产品中消耗氧气，形成一个双歧杆菌厌氧的环境，有利于双歧 杆菌生存和繁殖，且 酸奶发酵剂代谢产生的酸昧，令人们乐于接受． 三、临床效果观察 1．病例 选择t 全部选择儿研所肠遭门诊的馥泻患儿，男52名，女s6名，年龄最小2月，最大4岁，随机对照，分 为治疗组48例，对照蛆4o例。凡大便次数增加 3次／日以上，伴粪质改变，呈承样，蛋花汤样或稀桔便 者均可八选．大便常规可见脂肪球及少量WBC，病程最短 1天．最长 2月，治疗组中有13例，对照 组 中有24例伴有发热．一般情况见表 1 t 裹1 病倒一般情况 组别 年龄 菩警 J 一 治疗组 3o l8 48 2M一 4Y 7 16 l5 l0 26 l5 7 对照组 22 l8 40 3M一 3Y 5 Ig ii 6 28 6 6 7．13± 3．15 7．4± 3．95 合 计 52 36 88 2 M一 4Y 34 28 16 54 21 13 2．治疗方法：分为两组，疗程 3— 5天． (1)双歧杆菌制剂组 (治疗组)剂~130mi／瓶Bid (< 1 g)或tid(> 1 g)· (2)抗生素治疗组剂量氟哌陵15—20mg，kg／日，庆大 氨 苄李曹觇冶 疗． 3．疗效判定 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 (1)一 亨程结束对 (3天复直)，症状消失，太更常规二次正常，大便次数正常．大涟l生扶 正 常，为痊愈，上述任何一项未选治疗标准，为好转，治疗24小时，病情加重或48小时无好转为无效。 (2)凡不能坚持用药，或自行加其它抗生素病例均被淘汰． 4．观察方法t每日 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 精神，食欲．腹痛 大便次数 性状，隔日一次便常规． 四、结 果 1．临床疗效：40仞病例中，3天内恢复者3B例．占75啊，4—7天恢复者7例，占14．6晒，总有 效率89．6啊，另有lo例观察对象固不能坚持用药而被淘汰．见表2 表3． 衰2 临床疗效比较 5 维普资讯 http://www.cqvip.com 裹5 两组三来疗效比较 经x‘检验，xi=15．96 P10。一 10‘个，而且在奶基质中具有较高存活率， (2)不但具有治疗作用，同时提供蛋白质 维生素、钙 · 铁 锌等人体的必需营养物质，而这些营养物质在双歧杆菌发酵作用后易为机体吸收．此外，原牛乳中 的乳糖被双歧杆菌分解利用，更适用于那些乳糖不耐受患者． 5．双蛙杆菌发酵乳贮存期短，如能制成成本低．梧菌数高的度囊，片剂等系列产品，其在食品 与 药品中应用的前景就更广阔了，如何达到这一目的，还有待于进一步研究． 参考文献 (略) 香香果》 “鸡味圈》专种多功能膨化机 生产虾条、家家乐、甜麦圈等2O余种膨化食品 地 址；沈阻市和平区胜丰Ⅱ南街14— 2辽宁省机电设备公司大南业务部 电 话：32]3347 联系人；刘佩文 维普资讯 http://www.cqvip.com