两种天然抗氧化剂清除活性氧的研究

《食品工业科技》 Science and Technology of Food Indusn'y Vo1．22．No．2．2001 两种天煞抗萤剂清瞎活性萤昀研究 金 辉 赵 亚平 于文利 王 大璞 (上海交通大学化学化工学院 ．上海 200240 J ● I● ’● ● ● ● ⋯ ● ‘ ● ● ● ● 一 ’● I● + ● ● + ⋯ ⋯ ● ● ● ● ● 一 ． ”● ’+ ●’● ● ¨ + 一 + 一 ～ ⋯ ●● ‘ ● ● ● 摘 要 采用化学发光法研究了番茄红素和天然 vE对活性氧的清除作用，并比较了二者的抗氧能力随时问和 浓度的变化规律。结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明，番茄虹素清除超氧阴离子、羟基 自由基和脂类过氧化效果较好，Ec 分别为0．75、O．05、 0．1mg，mJ，而所需的时间分别不超过 6s，6s和 2As 天然 vE对超氧阴离子的清除能力则较差，在 lnwdml的浓度时清除 律不超过25％，但清除羟基 自由基和脂类过氧化的效果与番茄红素相近，其 Ec蛐分别为0 lmg／ml和 0．1nwdml，而所需 的时间为 6s和 24s 关键词 番茄红素 天然 vE清除率 自由基 化学发光法 Abstract The scavenging ability on ROS of l：,copene and VE evaluated n-earIs of chemiluminescence in models for gen— eration of superoxide anions．hydroxyl radicals． lipid peroxrdatlon．The changes of antioxidant behaviors with time and concentration ㈣ investigated and compared The efficient concentration (EC5n)oflyeopenetowards supemxlde anions，hydroxyl radicals．Hp'd [~mxMafion and was 0．75mg／ml，0 05mgnd and 0．1 mg／ml，respectively The requiredtime w且s 6 second，6 second and 24 second． respectively VE was not an effective scavenger towards SUlmmxide anions．Ec∞ofVE towards}州r0x radicals and lipid pemxidation WaS 0 lmg／ml and 0 lmg／trd The required time w∞ 6 second an d 24 second ，respectively． Key words lycope ne~vitamin E；scavenging rate；flee racheals；ebe nfilunfineseenee 一 ● ·● ●-● ● 一 一 + ●-● + 一 ● 。+ I-● ● 一 ～ ● ● 一 ● ¨ l● -● 1● ● 一 ⋯ ● · ● ●● + ¨ ● 一 ～ + ● 活性氧(Reactive Oxygen Species简称 ROS)被公认 为是癌症、慢性病和老化的诱因，同时人们也发现多 种天然食品对上述病症有肪治作用。天然食品的这 种功效主要是由于其中含有清除 ROS的有效活性成 分。事实上，已有大量生物活性物质如植物中的黄 酮，茶叶中的茶多酚都已被证实具有清除自由基的作 用。关于富含番茄红素的番茄和富含天然 vE的大 豆这两类食品的对人类健康有益的文献也屡见报道， 番茄红素已被证明是非常有效的单线态氧猝灭剂，同 时也对氮氧 自由基(NO)、磺酰基(Rs )等 自由基有 消除作用；而 VE对脂类过氧化的抑制作用也得到了 公认。但是关于番茄红素和 VE消除如超氧阴离子 、 羟基自由基等ROS的报道则较少。为此本文采用化 学发光法研究和比较了从番茄和大豆中分别提取得 到的具有较高有效成分含量的番茄红素(Lyeopene)和 天然 vE清除氧自由基的作用，为该类产品的深度研 究与开发利用提供科学依据。 1 材料与 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 1．1 材料与仪器 新鲜番茄酱、大豆油脱臭物 市售； 邻苯三酚(PamgaUo) 由北京化学药品有限公司 提供；鲁米诺(Lunfino1)、AAPH(2，2 一Azobis(2-amidino— propane)hydroehlorode)、1，10-二氮杂菲 (1，10一Phenan— throline) 由 Sigma化学药品公司提供；月笕草油( ． 亚油酸含量不低于20％)、NaOH、 O 、HCI、CuCI 均 为 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯，上海试剂二厂生产；碳酸盐缓冲溶液(CB— SS，pH=10、2)、蒸馏水 由实验室制备： Lambd~t．加 型紫外光谱仪 美国制造；SH—G型化 学发光分 析仪 上 海分析仪器六厂；WateIs 2690 HPLC，Symmetry C18柱 。 1．2 Lyeopene和 VE的制备 Lycopene由番茄酱提取制得：番茄酱脱水预处理 后，用乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，然后减压蒸去 溶剂后得到 Lycopene，用紫外光谱法测定其番茄红素 含量为50％。vE从大豆中提取：将大豆油脱臭物首 先进行甲酯化反应，然后将反应混合物于 5qc下冷析 除去甾醇，最后用分子蒸馏得到天然 vE浓缩物，用 HPLC法测定其 VE含量为 60％。 1．3 超氧明离子的产生方法 超氧阴离子由邻苯三酚 自氧化产生 ：将 50 邻苯三酚(1nmmllL)、700,ul CBSS、20,ul鲁米诺(1retool／ L)和一系列不同浓度样品分别放入样品池，测前快 速混匀后，立即开始测定，每 6s记录数据一次，另做 空白实验。清除率(％)=100(空白值一样品峰值)／ 空白值 1．4 羟基 自由基的产生及清除 羟基 自由基是由 Fenton型反应产生 ：将 20 FeC12(1mmol／L)、30,ull，10一二氮 杂菲 (1mmoUL)、80 CBSS和一系列不同浓度样品分别加入样品池，最后 加入50~t10 6％的 0 。测前快速混匀后，立即开始 维普资讯 http://www.cqvip.com 《食品工业科技》 Science and Technolog3,"of Food Industry Vo1．22，No．2，2001 测定，每 6s记录数据一次，另做空白实验 清除率 (％)=100(空白值一样品峰值)，空白值 1 5 清除脂类过氧化 脂类过氧化 由 AAPH引发月笕草油产生：将 100l~tl的月览草油 、20出鲁米诺(1 rnmol／L)和一系列不 同浓度样品及 100出AAPH分别加入样品池，在烘箱 中37℃下预热 0 5h后上机测试，每 6s记录数据一 次，测试温度 38℃，另 做空 白实验。清 除率 (％)= 100(空白值 一样品峰值)，空白值。 2 结果与讨论 2．1 清除超氧阴离子 超氧阴离子是一个从活体组织中新陈代谢产生 的氧 自由基。在生物活体中，当超氧阴离子浓度达到 一 定浓度时将会对大分子如蛋白质、DNA等进行破 坏。图 l是不同浓度 copene对超氧阴离子清除率 与时间的关系。由此可见清除率在 0～6s间上升最 快；在 6～42s内清除率随时间变化很小，浓度为 】．Omg／L时清除率在6s内达到 70％。一般定义自由 基清除率在 50％以上时的浓度为 EC，。，则 Lycopene 对超氧阴离子的 EC 为 0．75mg／nd。图 2显示 了 VE 清除超氧阴离子的清除率和时间的关系，可以看出清 除率随时间上升缓慢 ，同时虽然浓度增加有利于清除 率上升，但在 VE浓度大于 1mg／nd时，清除率仍然在 25％以下，远比番茄红素的清除率小。 0 6 1 2 1 24 30 36 42 48 Ti-e c⋯ —_．一 0 01 ／tl —●-一 0 5Ⅲg _l —。●一 0 7 51g／11 ——●一 1-g／-1 图 1 Lycopene清除超氧阴离于清除率与时间关系图 【OO 童 ljo 6o 40 ； 20 图2 VE清除超氧阴离子清除率与时间关系图 2．2 清除羟基自由基 羟基自由基是生物活体内最具进攻性的活性氧。 · 26 · Lycopene清除率与时间的关系如图 3所示。由此看 出在加入 Lycopene后清 除反应立即开始，在 6s内已 达到最大，之后随着时间的延长，清除率基本没有变 化 ．因此有效抑制羟基 自由基 的时间不超过 6s。 当 Lycopene为 0 1mg／nd，清除率接近 100％，因此 Lyco pene的 EC 为 0．O5mgtL。图 4是 VE清除率 和时 间 的关系，由图可见6s内清除率上升较快 ，6s后基本上 不变。同时可见 Ec 为 0．1mg／mL，显示了VE清除羟 基 自由基较清除超氧阴离子的能力好。 120 毒lo0 l 80 詈 60 40 20 ∞ 0 0 6 l 2 l8 24- 3() 36 42 48 rimg"(㈣ ) — __一0 05nlg／n1 — 一 O t ag／·t —。一 0 5-‘／1t 图3 Lycopene清除羟基自由基清踪率和时间关系图 圈 4 'rE清除羟 基 自由基清除率和时间关系图 2．3 清除脂类过氧化 脂类的过氧化作用是由在生物系统如脂蛋 白、脂 质体、微粒体和细胞膜等的氧化所引发的破坏。因此 清除脂类过氧化的能力也是衡量抗氧化作用的一个 重要指标。Lycopeile抑制脂类过氧化的 自由基清 除 率和时间关系如图5所示。我们可以看出有效清除 D 6 L 】8 24 30 T⋯ “ ec) — ● 一 0 0 L⋯ ／ 1 —● 一 0 — — 一 1_g／口l 图5 Lyeopene清除脂类过氧化清除率和时间关系图 曲 ∞ ∞ 曲 蚰 舯 一 =ⅡJ日u；l 帅粕仲种蛐帅如帅 0 ； ； l u* 帅 蛐 如 仰 0 一S ： ；i 维普资讯 http://www.cqvip.com 《食品工业科技》 Science and Technology of Food Industry Vo1．22。No．2。2001 核桃油自氧化及其抗氧化 的实验研究 赵声兰 李涛 蔡绍芬 魏大巧 余旭亚 陈朝银 ～ (昆明理工大学生化学院，昆明 650051) ● ⋯ ● ● ● ● ～ ● ⋯ ● ● 一 ’● I● 一 一 一 ● ● ⋯ 一 ’● 一 ～ ～ ⋯ ～ I． ● ● ● ● 一 ⋯ ’ 摘 要 以过氧化值(POV)为指标研究了温度、时间对核桃油自氧化过程的影响及添加抗氧化剂对核桃油抗氧 化性能的影响。结果表明，温度、时间对核桃油的氧化过程有高度显著的影响 TBHQ对核桃油具有较好的抗氧化性 能，抗坏血酸和柠檬酸对 TBHQ均表现出较强的协同抗氧化效应，且抗坏血酸的协同抗氧化性优于柠檬酸 使用 O．015％TBHQ+O．01％柠檬酸或 0．015％TBHQ+0 O1％抗坏血酸为核桃油的抗氧化剂．可使核桃油在 15"C下的贮藏期 5L 2．9个月分别延长至29 8个月和 38 9个月。 美键词 核桃油 自氧化 抗氧化 Abstract The effects of tempemtore and time 0n the auto—oxid丑tion of waltiUt oil and arttioxidation activity of several antloxida— tits in walnut oil were studied by oveti-storage test The results Were：The POV of walnut oil was affected remarkably temperature and time TBHQ had 0d antioxicL~tlve activity[or walnut oil TBHQ with vitamin c Or with citric acid exhibited rema~able antioxi- dan1 activity and synergtstie effectin the waltill[oil．Vitamin C belierthall citric acid．When 0 015％ 1BHO with 0 01％ cite acid OYwith 0 叭 ％ vitamin C was usedinthe oil．the~$tll'&1]Ce period ofthe oil could he prolongedto 29 8 months or 38 9 months at l5℃ respe ctively Key words wulaut oil；oxidation；alltioxidation ● ● 一 ～ ● I● ● ⋯ ’● I● 一 ～ ● I ● ● 一 ● - ●¨ ● ～ ’● I● 一 ～ ● I’● ● 一 ～ ～ ● I⋯ ’一 ● ● 一 ● ■● ● 一 由核桃仁提炼的核桃油味美醇香、营养丰富，含 亚油酸 64．6％、油酸 16 3％、亚麻酸 11．2％、棕榈 酸 5．6％、硬脂酸 2．2％，其中不饱和脂肪酸达 92．1％． 必需脂肪酸(EFA)的含量达 75．8％⋯。在经济发达 的国家视核桃抽为保健专用油，近年在国际食用油市 场上价格达 8000～10000美元／t，且供不应求 。但 *云南省省院省拉科技合作资助项目(98YQO17) * 通讯作者{云南省昆明市昆明理工大学生化学院) 由于核桃油富含不饱和脂肪酸，在加工、贮藏及销售 过程中极易发生氧化酸败变质 。为此本文进行 了核 桃油 自氧化和抗氧化的实验研究。 1 材料与方法 1．1 材料与仪器 核桃仁 购于云南省会泽县；核桃抽 自核桃仁 提取精炼而得；三氯甲烷、冰乙酸、硫代硫酸钠 、碘化 钾、可溶性淀粉、柠檬酸、抗坏血酸 均为国产分析纯 试剂；TBHQ，BHT、PG 均为国产食品添加剂。 脂类 过 氧 化所 需 的时 问为 24s左 右 。当浓 度 在 0 hng／ml以上时，清除率可达 50％以上 ，可见 EC5 为 0．Img／rrd 图6是VE清除脂类过氧化的清除率和时 间的关系，在 24s内对脂类过氧化消除率达到最 大。同时可见清除率随浓度增加而增加 ，在1mg／ml 罾 图6 VE清除脂类过氧化清除率和时间关系图 时达到 80％，Ec 为 0．hng／ml。 3 结论 实验结果表明 ．番茄红素和天然 VE浓缩物对活 性氧均具有清除和抑制作用，前者的作用强于后者。 实验使用的反应模型均为水溶液模型．因此该实验结 果提示，在生物活体水溶液环境中，番茄红素和 VE 仍能发挥良好的清除和抑制活性氧的作用。 参考文献 1 Bauer V ，Nakajima T ．Pucovsky V ．et al Effects 0f superoxide generating systems 0n muscle tone．chulinergic and NANC responses in c札airway JD咖 ofthe Autonomic Nerrou*System 2000，79：34 ～ 44 2 Zhao BL，Li XJ，He RG．et al Scavenging of[ect of e~xtracts 0f green tea and natural antioxldants On active oxygen radicals．Cell Bio— Pf ．1989．14：175 · 27 · 维普资讯 http://www.cqvip.com