陈皮挥发油与橙皮苷提取工艺的实验研究

一6 惹黑妻只豪．纛。．翟鬯惫。。羞怎耋。蕊j．舞 陈皮挥发油与橙皮苷提取工艺的实验研究 井山林 郭立玮 彭国平 文红梅(南京中医药大学植物药深加工工程研究中心，2l0029) 摘要 目的：研究陈皮挥发油和植皮苷提取的最佳工艺条件。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ：以挥发油增量为指标．以度提取的产 物和橙皮苷含量采考察加水量、蒸馏时间厦ca(OH)z加量等因素对提取效果的影响。结果：最佳提取条件为； 药材加I2倍水进行水蒸汽蒸馏．收集6倍体积的蒸馏渡，药渣加(9十7)倍水和药材投料量12％的ca(0H)2， 回流(o5+os)h。结论：谊最佳工艺是稳定可行的。 关键词 陈皮 挥发油 提取工艺 正交试验橙盘苷 ExperimentalReasearchonExtractingTechnique OfVolatileoilandHesperidinfromPPrlc口rpmmc打一rPffc"，口抽e JingShan一“n，(；uoI。i—wel，Pc“gGuo—pi“getalt (PlantProcessIngCcnter，NanjmgUnivcrsityofTCM，210029) ABSTRACToBJECTIVE：TDdetermlnetheoptimalextractj“gpfocessofv01aljlcojJ andhesperdin fromPPrzcⅡr声f“，wfzfrIr盯ff“ZⅡ￡ⅡF．METHODS：Usingt11elncreamentofthcvolat【1eoilwlththccxtract y|eldandhesperdincontentasata。get，infactorsofdist|llatorytimc'addl“gwateramountandCa(OH)2 clc．areinvestlgatcd．RESULTS：Thcoptimalprocessisasf0110ws：adding12tinlesamountofwatcr， conecting6“rncsamounc ofdlstillate，thenaddmg16tmlesamountofwaterand12％tlmesanl。untofca (OH)z【ntheresiduecontinuedrefluxfor1h．CoNCLUSIoN：Thisextractingprocessisworkablcand reIiahle，andprovidesbasisforindustriaIproduction． KEYWORDS：v01atileoiI，hcsperidin，extractingprocess，Pericn印i“mf打ri州￡ic“如抽P 陈皮为芸香科植物橘Ci￡r“s，Y￡i衄fnf口Blanco 及其栽培变种的干燥成熟果皮。药材分为“陈皮”和 “广陈皮”。味苦、辛，性温，归肺、脾经。具有理气健 脾、燥湿化痰之功效，常用于胸脘胀满、食少吐泻、咳 嗽多痰‘“。陈皮含挥发油及橙皮苷等有效成分[23。其 中挥发油可采用水蒸气蒸馏法”1提取；而橙皮苷在 碱水中的溶解度比较大“]，可采用碱水提取的方法。 根据组方药材的特点，我们在中药三类新药“儿宝” 的工艺设计中，单独对陈皮采取先提取挥发油，再从 其药渣中提取橙皮苷的处理方法。本文报道陈皮挥 发油及橙皮苷提取工艺的优选实验结果。 l实验仪器与材料 1．1仪器 高教液相色谱仪(Waters515pump，Waters 2487紫外检测器，WatcrsU6K进样器，wDL一95色 谱工作站)；16G一型高速离心机；SB5200一型超声清 洗机(上海Bransod公司)；ShimazhuI。ibrorAEL。一 40SM十万分之一电子天平(日本岛津)；挥发油提 取器(自制)等。 1．2试剂及药品 氢氧化钙(AR)；三氟乙酸(AR)；甲醇(AR)；陈 皮(购于南京市药材公司)经本校中药鉴定教研室吴 启南副教授鉴定，符合《中国药典》标准。 2实验方法与结果 2．1挥发油提取工艺的优选 取陈皮200g，加l4倍量水，进行水蒸气蒸馏， 收集蒸馏液，并观察挥发油量的变化情况。现以挥发 油增量为指标，来考察蒸馏液体积与挥发油增量之 问的关系。我们发现蒸馏液体积达到6倍以后，挥发 油的增量明显减少。故在生产中，收集6倍量的蒸馏 液即可。此外，加14倍量水，收集7．5倍蒸馏液后， 尚可倒出0．5倍的药液。由此可知，陈皮的吸水量为 6倍。所以，陈皮挥发油的提取工艺条件为：加12倍 量水，收集6倍量的蒸馏液。 2．2橙皮苷碱提取工艺的正交试验 2．2．1正交设计”o 根据浸提理论及预试验结 果”]，陈皮的碱水煎煮工艺与加水量、煎煮时间及 Ca(0H)：用量等因素有密切关系。为了选择最佳的 碱提取工艺条件我们选用了L。(34)正交表，以橙皮 苷转移率与浸膏得率为考核指标．进行了9次试验， 其因素水平表见表1。 万方数据 基层中药杂志20。1年第15卷第1期 竺!!至兰坚!!!!!!!!!篁!!!些!!墅!堡!!!坚堡!竺 表I试验因素水平表 2．2．2橙皮苷的含量测定方法 本试验采用 HPT．(：法⋯测定样品中橙皮苷的吉量，色谱条件为： Kronlasilc18柱(4．6mm×250mm，5pm)；2487检测 表2橙皮苷碱水提取工艺正立试验的I．9【3．)表 7 器；流动相MeoH：O．1％TFA水(42：58)；流速1O ml／min；k一283nnl；AUFS一1．0；进样量5“l，柱 温T=30C。橙皮苷的标准曲线为：y一9．920× 103x+8475．5，只一O．9999。并且橙皮苷在O．013 25～0．424mg／ml之间呈照好的线性关系。 2．2．3数据处理与分析根据k(34)正交表，9次 试验的有关数据及其计算分析，结果见表2和表3。 ，躲 ? ； ； ? 雠鼍嚣尹引 碍嬲。 综合评分(。Z) l 1 l 2 2 2 3 3 3 —2662 0 84 3070 R 5732 5．64 2261 一13．73 3634 5 46 6 81 4 59 12．27 3130 4907 34．59 4787 5587 38．78 5777 65．6Z 3538 39．95 36．35 41．09 46．48 43．09 52．17 4930 5073 G=324 注：*z=08x+02y 47 2．2．6方差分析 表3橙皮苷碱水提取工艺芷交试验的方差分析 注：’提取翠以药材为对照·F㈨2)005一190 由表3可知，A、B、C三因素对结果无明显影 响。从陈皮中提取橙皮苷的最佳工艺条件为A。岛、 C，，即(在药材加12倍水进行水蒸汽蒸馏并收集6 倍蒸馏液后)加(9+7)倍水和投料量12％的Ca (()H)2、回流(O．5+O．5)h。 2．2．4最佳工艺的验证取陈皮3份，每份500g， 各按照上述最佳工艺条件进行挥发油和橙皮苷的提 取，并测定提取液中橙皮苷的含量，结果见表4。 表4橙皮苷量佳提取工艺条件的验证结果 500 49，23 6S24 1504 500 4956 6567 15．45 I!! !!：!! 盐：i； !i：i! 由上表可知，按正交试验优选而得的最佳工艺 进行提取试验，三次结果的综合评分均处于最高水 平，这说明该工艺是稳定可行的，适合于工业生产。 3讨论 3．1 生产上通常是通过考察挥发油增量与蒸馏时 间之间的关系来确定陈皮挥发油提取程度的。而本 实验通过考察挥发油增量与蒸馏液体积之间的关系 来确定陈皮挥发油的提取程度，这是为了确定药渣 中残留的含水量，以便控制正交试验时的加水量。 3．2用NaOH调节pH值时，由于果胶溶出过多， 不仅过滤困难而且药液损失过大。而用Ca(OH)。调 节pH值时，它不仅可以沉淀部分果胶[B]，对过滤很 有利，而且药液损失很少。此外，Ca(OH)：一次加入 (即在挥发油提取结束后、第一次回流之前加入)。在 后来的实验中，我们测得两次药液的pH值均在8～ 9．5之问，已经达到了碱性条件，这说明Ca(OH)：一 次加入是切实可行的。 参考文献 l 中华人民共和国卫生部药典簧员会中华人民共和国药典·一 部．北京：化学工业出版杜．2000：148． 2 国家中医药管理局《中华车草》绾委会．中华本草(精选本·上 册)上海科学技术出版杜．1999：1001 3 翻 健，郭力弓．中药现代研究与临床应用(1)学苑出版社， 1993±387． 4柯话清．中草药有效成分理化与药理特性长眇：胡南科学技术出 版社，1992：174． 5 吕圭源．王一诗．中药新产品开发学．北京：^民卫生出版杜． 1997：64 6曹光明中药工程学北京：中目医药科技出版社，1994r35． 7王慕邹，非齄亨：常用中草药高教藏相色潜分析．科学出版社． I996：171 8柯铭清中草药有效成分理化与药理特性长秒：湖南科学技术出 版社．1992：499 (20。o_lO—07收稿) 恐学习嚣¨ 。：。，。：：。。螂Ⅲ引㈣ l 2 3 4 5 6 7 8 9 K K K 万方数据 陈皮挥发油与橙皮苷提取工艺的实验研究 作者： 井山林， 郭立玮， 彭国平， 文红梅 作者单位： 南京中医药大学植物药深加工工程研究中心 刊名： 基层中药杂志 英文刊名： PRIMARY JOURNAL OF CHINESE MATERIA MEDICA 年，卷(期)： 2001，15(1) 被引用次数： 3次 参考文献(8条) 1.《中华人民共和国药典》编辑委员会 中国药典(一部) 2000 2.国家中医药管理局《中华本草》编辑委员会 中华本草(精选本·上册) 1999 3.阴健.郭力弓 中药现代研究与临床应用 1993 4.柯铭清 中草药有效成分理化与药理特性 1992 5.吕圭源.王一涛 中药新产品开发学 1997 6.曹光明 中药工程学 1994 7.王慕邹.陈毓亨 常用中草药高效液相色谱分析 1996 8.柯铭清 中草药有效成分理化与药理特性 1992 相似文献(10条) 1.期刊论文 王晓颖.叶梦屏 陈皮挥发油β-环糊精包合工艺研究 -福建中医学院学报2005,15(2) 陈皮为中药制剂的常用中药,其挥发油具有行气、祛痰、平喘作用.但在中药制剂和贮存过程中常因挥发油的损失而影响制剂质量和疗效.因此,近年 来有研究用β-环糊精包合工艺对陈皮挥发油进行包合,以增加陈皮挥发油的稳定性.报道的方法中有饱和水溶液法、研磨法、液-液包封法、气-液包封法 等.本研究以β-环糊精为主体,陈皮挥发油为客体,采用超声法进行包合试验[1],通过挥发油利用率、包合物收得率、包合物含油率的比较,筛选出最佳工 艺,对陈皮挥发油的β-环糊精包合进一步探索. 2.期刊论文 徐彭 陈皮水提物和陈皮挥发油的药理作用比较 -江西中医学院学报1998,10(4) 陈皮,为芸香科柑橘属植物橘Citrus reticuLata Blanco的成熟果皮,药用资源丰富,药用历史悠久、广泛,主要用于理气健脾、燥湿化痰.多年来,人 们对陈皮的生药、化学及药理进行了大量的研究.以往的药理研究结果表明,陈皮对消化系统、呼吸系统有明显的药理作用.本实验着重比较陈皮水提物与 挥发油对消化道、呼吸道平滑肌等方面的作用有何差别,为临床上合理应用陈皮提供参考. 3.学位论文 林林 陈皮总黄酮、橙皮苷和挥发油的动态分析研究 2008 陈皮是芸香科植物橘Citri Reticulata ‘Blanco’及其栽培变种的干燥成熟果皮。具有理气健脾、燥湿化痰的功效。药材分为“陈皮”（为福橘、 大红袍和温洲密柑等的干燥成熟果皮，产于福建、四川、浙江等）和“广陈皮”（为茶枝柑和行柑的干燥成熟果皮，产于广东新会）。其中以“广陈皮 ”的质量为优，“广陈皮”中又以新会陈皮为道地药材。陈皮主要含有挥发油和黄酮两大类成分。挥发油主要成分为D-柠檬烯。陈皮还含有黄酮类化合 物，其中橙皮苷含量最高。陈皮自古就有“今天下多以广中者来胜”及“陈久者良”之说。贮存时间越久的陈皮，药用与调味效果不同，市场售价也高 ，所以出现了以外地陈皮冒充新会陈皮、以茶水染色的新皮充当陈皮的假冒伪劣产品。陈皮“道地性”和“陈久者良”表现在什么地方？其物质基础有 何依据？正因为如此，迫切需要对新会陈皮和非新会陈皮，不同贮存年份和不同采收期新会陈皮的有效物质成分进行系统的研究，为进一步开发利用陈 皮资源提供依据。 本文研究了陈皮有效物质成分总黄酮的提取和测定方法,并对陈皮挥发油的主要成分作了初步对比分析，主要研究有： (1)陈皮中总黄酮含量的分析方法考察采用紫外分光光度法,在283波长下,以橙皮苷为标准品，直接测定提取液中总黄酮的含量。在 4.548~22.74μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。回归方程为：A=0.033C+0.013，相关系数r=0.9993。加样回收率在98.77~101.6范围内。本法用于陈 皮中总黄酮含量的测定,方法准确、可靠、结果令人满意。 (2)优化新会陈皮总黄酮的提取条件在单因素试验的基础上，采用正交试验方法，以总黄酮含量为考察指标，确定陈皮总黄酮最优提取条件。重点考 察提取时间、水浴温度、液固比三个因素。综合上面的因素考虑，最佳提取条件为：60％乙醇，70℃，液固比1：25，提取3小时，提取一次。 (3)不同产地、不同贮存年份和采收期陈皮总黄酮的含量测定不同贮存年份新会陈皮的贮存期越长，总黄酮含量越高；不同采收期新会陈皮总黄酮含 量相差并不大，青黄皮为高，黄皮次之，红皮最低。从总黄酮含量来看，新会陈皮与外地陈皮比较并不优越，道地药材物质基础有待进一步研究。 (4)不同贮存年份和采收期新会陈皮橙皮苷的含量测定不同贮存年份新会陈皮的贮存期越长，橙皮苷含量越高，这和不同贮存年份新会陈皮总黄酮的 变化规律是一致的;不同采收期新会陈皮橙皮苷含量规律：青黄皮为高，黄皮次之，红皮最低。 (5)新会陈皮挥发油的提取及气-质联用分析选取挥发油的其中12个主要的成分，对不同贮存年限和采收期陈皮样品进行动态分析。结果显示：不同 贮存年份的陈皮样品，挥发油沸点较低的成分变化缓慢，主要成分变化明显，新会陈皮特有成分2-甲氨基-苯甲酸甲酯的含量变化不大，沸点较高的成分 变化也很缓慢。不同采收期和不同贮存年份的陈皮挥发油变化规律类似，而青黄皮和红皮挥发油的成分差异较大，黄皮和红皮差异较小。 4.期刊论文 周欣.黄庆华.廖素媚.莫云燕.陈思.ZHOU Xin.HUANG Qing-hua.LIAO Su-mei.MO Yun-yan.CHEN Si 不 同产地陈皮挥发油的对比分析 -今日药学2009,19(4) 目的 探讨新会陈皮与其他地区陈皮挥发油成分的差异.方法 用GC/MS分析不同产地陈皮挥发油的成分和含量.结果 不同产地陈皮挥发油都含有柠檬 烯主成分,但新会陈皮存在一个含量较高的2-甲氨基-苯甲酸甲酯成分.结论 新会陈皮挥发油的特有成分,将其显著地与其他产地陈皮区分开来,为新会陈 皮的鉴别提供了重要依据. 5.期刊论文 董岩.崔庆新.魏兴国 陈皮挥发油化学成分气相色谱-质谱分析 -山东中医杂志2004,23(6) 陈皮为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥成熟果皮,以广陈皮为最佳;其性温、味苦辛,归肺、脾经;具有理气健脾、燥 湿化痰之功效,主要用于胸脘胀满,食少吐泻,咳嗽痰多等症[1].由于陈皮贮存时间不同,陈皮的来源不同,提取方法不同,挥发油化学成分也有较大的不同 .我们在利用传统提取挥发油方法之前,利用微波炉进行预处理,得陈皮挥发油的含量为1.21%(W),采用气相色谱-质谱-计算机联用技术对挥发油中的化学 成分进行了分离. 6.学位论文 魏引平 肉桂、当归、陈皮、丁香四种芳香性中药制备汤剂方法研究 2008 目的：通过对肉桂、当归、陈皮、丁香水煎煮工艺的研究，找出肉桂、当归、陈皮、丁香制取汤剂的最佳煎煮方法和最适宜的煎煮时间；分析煎煮 时间对挥发油成分和水溶性成份的影响程度。 方法：本实验通过平行实验法分别测定了3种不同煎煮方法(浸泡煎煮、浸泡后下、不浸泡后下)和数个不同煎煮时间得到的肉桂、当归、陈皮、丁香 汤液中挥发油收率、浸膏得率；并通过薄层色谱法和紫外分光光度法对肉桂、当归、丁香不同煎煮时间及煎煮方法所提得的挥发油进行成分分析，用紫 外分光光度扫描法观察不同方法及时间对陈皮所得挥发油提取效果的影响，用高效液相法分析了不同方法及时间对肉桂汤液中桂皮醛的影响。 结果：通过实验得出：各品种浸膏量随时间延长在煎煮时间内上升，两种浸泡法浸膏量较高。四个药材实验结果分别是： ①肉桂挥发油浓度和收率在直接后下组煎煮5min-30min时处于较高水平上，而且缓慢上升，各样品之间薄层图谱差异表现在斑点大小不同，Rf值和 斑点数量基本相同，但样品和对照品之间差异较大，油中桂皮醛含量以直接后下组水平值较高，30min时达到最高值91.2％； ②当归挥发油和水溶性成分在水中溶解度都较大，煎煮方法不同则当归挥发油收率和浓度值达峰时间不同，随时间延长直接后下组变化幅度最小 ，薄层显示，各样品挥发油主要类别一致，但紫外吸收显示，浸泡煎煮组吸收峰数量和最大吸收值随时间延长稳定增长； ③陈皮挥发油收率在四个实验品中最低，以致用挥发油提取器检测不出汤液中挥发油的收率，用紫外吸收法检测显示浸泡煎煮组挥发油吸收值在煎 煮lOmin-30min都有明显高于其他两组，而且吸收值变化不大； ④丁香挥发油浓度和收率在浸泡煎煮组煎煮5min-30min之间在较高水平上缓慢上升，总体水平高于其它两组，而且水平值随煎煮时间变化幅度比其 它两组小，薄层显示，各样品挥发油和对照品比较除斑点较小外，色泽及位置变化不大，各组之间区别也不明显，从扫描图看，浸泡煎煮组除5min时的 样品出峰较少，其它时间的样品出峰较多，峰形基本一致，优于其他组。 结论：研究认为：肉桂制汤宜以直接后下煎煮30min左右为好；当归制汤时若需要突出挥发油的疗效，可以采用直接后下法，若要突出水溶性成份的 疗效，则宜采用浸泡煎煮或浸泡后下法煎煮，煎煮时间在20min以上为好；对于陈皮，若需要突出挥发油的疗效，可以采用浸泡煎煮法，煎煮时间控制在 30min以内；若要突出水溶性成份的疗效，则可采用任一煎煮法煎煮，煎煮时间在20min-40min为好；丁香宜采用浸泡煎煮法制取汤剂，总的煎煮时间不 宜超过30分钟。 7.期刊论文 王艳琴.蔺兴遥 陈皮挥发油对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α及T细胞亚群的影响 -甘肃中医2007,20(6) 目的:观察陈皮挥发油对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α及结肠T细胞亚群的影响.方法:以SFE-C02(超临界二氧化碳)萃取陈皮挥发油,用放射免疫法测 定TNF-α,用流式细胞仪检测CD4+和CD8+.结果:模型组较空白组TNF-α含量显著上升,陈皮挥发油能使TNF-α计数水平下降,其中大剂量作用最明显;结肠 炎大鼠结肠内CD4+和CD8+细胞均增加,陈皮挥发油治疗后回落.结论:陈皮挥发油治疗大鼠实验性结肠炎有效,可能与免疫调节有关. 8.期刊论文 蔡周权.代勇.袁浩宇 陈皮挥发油的药效学实验研究 -中国药业2006,15(13) 目的 研究陈皮挥发油对哮喘的药效学.方法 采用水蒸气蒸馏法提取陈皮挥发油.以二硝基氟苯(DNFP)诱导小鼠迟发型超敏反应(DTH),以豚鼠支气管 肺泡灌洗法观察陈皮挥发油对DNFP诱导DTH的影响,对致敏豚鼠支气管肺泡液中嗜酸性粒细胞的影响,以及氨水刺激致小鼠咳嗽的影响.结果 陈皮挥发油对 DNFP诱导的小鼠耳肿胀具有较强的抑制作用,能减少致敏豚鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数,并能明显延长氨水刺激致小鼠咳嗽潜伏期和减少咳嗽 次数.结论 陈皮挥发油具有平喘、镇咳和抗变应性炎症的作用. 9.学位论文 徐光伟 药对金银花-金银藤、陈皮-枳壳和四种桂花的挥发油成分研究 2010 10.期刊论文 陈皮挥发油超临界CO2萃取工艺的研究 -黑龙江医药科学2005,28(5) 目的:研究超临界CO2萃取陈皮挥发油的最佳萃取工艺条件.方法:采用正交实验法,应用超临界CO2萃取法提取陈皮中的挥发油成分.结果:在提取条件 A2B1C3(即20MPa,35℃,过50目)时陈皮挥发油的萃取率最高,为2.04%.结论:应用超临界CO2萃取陈皮挥发油,提取率高,稳定性强,且操作纯净、安全又保持 生物活性,色味纯正,是具有相当发展潜力的提取分离方法. 引证文献(3条) 1.段琼芬.罗金岳.陈思多.王有琼.安鑫南 我国柑橘精油提取技术研究现状[期刊论文]-安徽农业科学 2008(26) 2.缪作华.王中平.曾靖.周钰梅.黄贤华 橙皮水提取物对昆明种小鼠睡眠和自发活动的影响[期刊论文]-中国临床康 复 2005(44) 3.施淑萍.曾靖.周钰梅.黄贤华 橙皮水提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[期刊论文]-中国临床康复 2005(24) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_jczyzz200101002.aspx 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