高效液相色谱柱的湿法装填技术

· 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 师 园地 · ／， 是槲 ＼／ 高 效 液 相 色 谱 柱 的 湿 法 装 填 技 术 WET FILLING COLUMN ~ LOGY IN HIGH D 田CⅡVE 1 前 言 任何一台高效液相色谱仪 的核心是色谱柱 ，没 有一根在高线速下有良好分离能力的柱子，则一切 品质优良的高压泵，特殊 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 的进样器，高灵敏度检 测器梯度设备等带来的好处都不能体现。因此，大量 从事液相色谱分析的工作者只有掌握液相色谱柱的 装填技术才是解决的最佳途径。本文主要讨论有关 如何实现高技液相色谱柱的湿法装填的方法及要 领 2 湿法桂填充技术装置 对于颗粒直径小于 201xa的固定相，由于静电荷 的作用而具有很高的表面 能，因此它们 在干燥状态 时往往粘结成一 团，直接用干法装填时经常粘附在 柱壁 ，不能获得高的柱效。对于小颗粒液相色谱柱需 用湿法装填完成。湿法也叫匀浆法，是一种台适 的蒋 剂 (或混合溶剂)作为分散介质，经超声渡处理，使填 料微粒在介质中呈悬浮状态，高度分散，形成匀浆 了 黄晓笛 部 朋 ● — — — 一 — — — 一 液，用加压介质(或称顶替液)将匀浆液压入柱管 中，制成均匀的，紧密填充的高技柱。 湿法填充技术装置原理如图所示： 图l 湿法填充技术装置 关于湿法填充技术有几点说明： (1)关于高压泵 一 般资料要求有 40～ 5 压力的装柱 机才 能满足装填 101xa左右粒度的固定相。对硬颗粒固定 相，填装压力要求应比操作压力高出3-4倍。实际 能检索到所需文献。 另外，在 Bcl~teins的历 史补编中，每页 的天头上 都标有对应于该页化舍物在正编的卷．页效以丑系 统号。这叫做对照参考。于是在不同朴编中，有着相 同对照参考的那些 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 页上，有着车日同或相似的化合 物的有关文献。还有，在历次补编中，在每个化合物 名称后面，多标出该化台物有 关文献刊于正编及其 在此之前同～卷 各补编 中 的页嫩 ，这 叫做追踪参 考。如果设有谊踪参考，这表明＆曲醯B首次记述该 化台物。利用两种参考为全面检索提供 了两条可行 的捷径． 3 结束语 Bc出峨地在第五补编之前虽然 德文出版，但是 《化学工程师》3／1~ (总第 54期1 由于化学文献中缩写词，符号和外来语甚多，为培有 语言障碍的用户提供了方便。并且出版者发行了两 种专用词典，即德 ～英 和德 一法 Bc丑g把缸 词典。每 种词典大约砌 个词条，包括了Ben ．嚆 中用到的所 有词，用户可从出版者手中免费得到该词典。在每一 卷的卷首，还附有 Be i B引用的杂志蹦及出版物 的垒称和缩写，以及采用的缩写词的汇总表。在近期 出版的各类大全中， 又增刊了立体化学词汇 术语的 解释 以及斯拉夫字母的译音表。 Be 属于高价母本，原版定价平均每册折合 人民币 12万元。但它仍 自已独特的魅力，牢牢地 吸9I着广大科技工作者，它是一部对科研开发、生产 具有极大价值的经典大型工具书。 ， 1，， 、 j — l ● r ● ● I 1 I 、 一 P＼ 潮 —，，．．．，．．．．．．．．．，．．．． ， 一 一 槽 茎 一 一 岳 维普资讯 http://www.cqvip.com 上一般液相色诺仪的液体泵都可以进行装柱工作。 如 日立各型号蔽倬泵、岛津 l』：-4A蔽体泵，甚至用 岛津 LC一3A单柱塞泵装填 4．0nwn×15锄 柱都 可以 取得成功 国外对装柱 使 用恒 流 泵好还 是恒 压泵 好，看法不一 目前国内装柱机多采用恒匿泵，如： 北京分析仪器厂 6751型装柱机 气动恒压泵 60MPa 四川分析仪器厂 zTS 1装柱机 气动恒压泵 矧 大连物化所 装柱机 往复泵 9C0kg／cra~ f2)关于匀浆槽 匀浆槽一般为圆筒状，既可 以自制也可以购买 到。国内售的匀浆槽容量为 25ml和 50mJ两种，一般 无前置柱，接 口可换装 不 同管径柱。国外匀浆槽 (如 岛津1多带有前置柱．增加前置柱 的原因是：填充物 的密度在柱的顶端急剧下降 ，而使用前 置柱 可使整 个柱中填充物的密度 上下均 匀一致，避免峰的拖尾 现象．不带接El的可浆槽只能接一种管径的空柱。 使用匀搬描应注意最高允许压力 (如岛津75ml 寄量匀浆槽最高压力为4．SMPa)．匀浆槽上部一般 ，有救气装噩，以便于装柱前将槽内气体捧出． (3]关于空柱 空柱 国产价格约 100元，支 进 El价格约 30美 元，支，两种柱的筛板不同．筛板有活筛板与死筛顿 两种，具有活筛板的柱子(国产)死体积大。但优点为 容易更换筛板 具有死筛板的拄子(国外产)死体积 小，缺点为筛板堵死后不易更换。 3 湿法装填色谱柱的具体步骤 (11清洗柱管 装柱前要对柱管及接头进行认真 清洗．清洗液可用丙酮、苯．异丙酮、水、10％氢氧化钾 水溶蔽、甲醇．乙醇等 ，然后吹干 (2】连接装置．连接 各装置成 为整 体系统。要保 证在高压下的密闭性能．避免柱接头及管路的脱 落，柱管保持垂直方向。 (3)打开匀浆槽，加入适量分散介质，使色谱柱 充满． (4】制备匀浆 液。将填料置 于容器 中，加入适 量 分散介质，在超声波浴中处理 1嘶血 ，得到分散均匀 的匀浆液。 (5)迅速将匀浆液倾八匀浆槽中，然后 立即用顶 替液将匀浆槽充满 (6】封好匀浆槽上 El，匀浆槽及整个系统中都 不 能有空气封八。 ⋯ ． 52 ． (7)开动泵．形成所需匿力，迅速打开高压闽，令 顶替液一下子将匀浆液压人柱中，并在一段 时 间内 保持一定压力． (81运{牵i降低泵的输 出压力 ．至压 力表 指示 为 零 停泵。 (91待柱中不再流 出液体后 卸下柱子，用刮刀 仔细削平柱顶端的填料，装上滤片及柱接头。 4 装柱过程的技术要求 ‘ (1)对填料的要求 填料不能有粘结及沉降 的现象．应选用粒度范 围很窄的填料．填充之前最 好先采取措施 去除细粉 (细粉为造成堵塞板的主要原因)．具体办法为：先将 填料 醇液中悬浮 彻底混台均匀后，在重力下沉降 30mh1．倒去含有细粉的醇 液．所得颗粒干燥后再装 柱。此法不仅防止小 倒 翩购 堵塞 ．同时能提高柱技． 『2】顶替液的选择 以前推荐使用甲醇或与分析流动粗相同溶剂较 多．怛甲醇装柱时挥发较多，毒害较大．我们现在使 用无永乙醇作为顶替液，装 正反相 柱和 甲醇作 顶替 液效果证明完全一样。 (∞对匀浆液的要求 匀浆液中分散介质应选择易于从填料上洗掉并 不与之发生反应的溶剂．匀浆液注入匀浆槽后应在 最短时间内启动泵开始装柱。 (4)对空拄舶要求 空柱应保证两端平整，无毛rn，否则发生泄漏。 并应严格去豫油脂．除油脂的方法采用各类溶剂．如 异辛烷、甲苯、氯仿、丙酮、乙醇，甲醇和水等。清洗 后，在烘箱内彻底千燥． 衷 1列出’一些装柱条件 供参考： 装柱者 顶着藏 勾浆液分散介质 压力 MPa 南京军区总医院 甲醇 天律试剂二厂 甲蒡或乙醇 天津莒I药厂 乙醇 巾科院感光化学所 甲醇或乙醇 北京市药植所 甲醇 上拇有机}匕学所 乙烷 二氧武环：四氯化碳 50 i：3 40～ 0 二氧太环：四氯化碳 4．5～60 I：2 加 ～ 40 甲醇：四氯化赣 ～ 42 98 3B 正辛酸：二氯蕾酸 =氧究环：四氯化硅 11 四氧}匕碳 (下转第 l7页) 桃 学工程师 3／1996(总第54期) 维普资讯 http://www.cqvip.com 在氢氧化钠及湿法磷酸 中的镁和铝共同存在下，常 舍生成氟化物的络合盐，它的组成可用通式N~Mg,A]2一 {F，OHk H O表示 4．2 正交试验 对 F由固相转人液相过程产生影响韵主要因素 有：搅拌强度、反 应温度、反应 时间、氢氧化 钠浓度 等、为此 试验选用四因素三水平k( 正交表进行 试骚。试验工艺条件如表 2所 示。对试验 结果采 用 直观 的极差分析．以确定各影响因素大小，实验 结果 及扳差分析如表 3所示。 寰 2 实验工艺素件 对正交试验结果采用以 F转化率为 目标函数作 极差分析，根据极整大小确定各影响因素的严重程 度。在试骚范围 内．以搅拌强度对过程的影响 最严 重。各因素对 F转化率影响的主改关系依次为：搅拌 强度 >反应温度 >反应时间 >氢氧化钠浓度。 试验研究结果表 明．磷酸三聚氰 胺与氢氧化钠 的主反应，其反应控制步骤系扩散传质过程控制。影 寰 3 实验结幂爰龊差分析 试验条件 试牡结果 反应温度 搅拌强度 氢氧化钠浓度 反应耐 问 F转化卓(％ 《化学工程师》3／J996(~ 54期) '； 响主反应过程最重要的因素是搅拌强度。由此可 知，适当降低反应温度，可抑制三聚氰胺反应媒循环 法制 NazHl~O4·12H20 g -阶段反应过 程 中 F杂质 进^产品 Na-,HPO~·12Hp 中，以利于提高产品纯 度。 5 结语 (1)氟硅酸三聚氰胺与氢氧化钠的液圃反应过 程是受扩散传质过程影响较严重的慢反盘过程． (2】影 响三聚氰 胺反 应媒循 环法 制 Na．,m O, l2H^o第二阶段反应过程中 F杂质反应过程 的主要 因素有：搅拌强度、反应温度，氢氧化钠浓度 反 应时 间。各因素对 F转化率影响的主次美系依改为：搅拌 强度 >反应温度 >反应时间 >氢氧化钠浓度。 参 考 文 献 I Richard C sk da丑：ShlT~L McthedofPm,~g Purified Phosphatesorm implLr~P~aesphofi~ ,acid．US Pat 3．920,796 1 11 2 Richard C Sbe,~ an； h力 F M doa!logh．M anufactm~of Purified DiammonilⅡ玎 Phosphates． US． Pat． 239， 739． I9髓 】2．26 3 党亚固．四，I『联合犬学研究生毕业论文．1994,5 4 陈加甫等．辞酸盐的生产与直用．成都科技大 学出版 牡，I弼 lj (上接第 显 页) 4 结论 高救液相色谱技术 已在化学 生化、医药、环保 及工业分析中普遍应用．色谱柱是 液相色谱仪 中最 重要部件之一．色谱柱 的填充是～项技术性很强 的 工作 掌握其技术对从事液相色谱 的工作 人员来说 无疑是大有必要的。我们在工作实践 中运用上述装 填技术使赦相色谱柱的柱效得到很大改善 不仅提 高了工作效率，也节约了大量实验开支． 参 考 文 献 1，谢光华．如何正确运 用高速赦相 色懵技术化学试捌， 1982，2( 2 袁倚盛．高压液相色谱法监测血 药浓度时柱和流动耜 的选 择和处 理 ．药 学通报 ．1984,(19)：6 3 朱袁龄菩 ．现代{瘦相色谱．兰州大学出版社 17 维普资讯 http://www.cqvip.com