【word】 细胞凋亡通路中的survivin分子在肿瘤中的研究进展

【word】 细胞凋亡通路中的survivin分子在肿瘤中的研究进展 细胞凋亡通路中的survivin分子在肿瘤中的 研究进展 1444 ? 综述? 重垦堂年5,El第40卷第14期 细胞凋亡通路中的survivin分子在肿瘤中的研究进展 谭寒星,黄利鸣综述,王艳林审校 (三峡大学医学院分子生物研究所,湖北宜昌443002) 关键词:细胞凋亡;肿瘤;survivin doi:10.3969/.].issn.16718348.2011.14.042文献标识码:A文章编号:1671—8348(2011)14—1444—03 细胞程序性凋亡(apoptosis)是一种细胞生理性,程序性死 亡的过程,在胚胎发育,组织器官塑型以及衰老和病态细胞清 除中起重要作用.各种环境因素和遗传因素导致细胞失去发 生凋亡的能力,是肿瘤发生与发展的关键因素之一,因而激发 和恢复肿瘤细胞发生凋亡的能力,是肿瘤防治的有效途径. survivin是肿瘤凋亡抑制蛋白(inhibitorsofapoptosisprotein, IAPs)家族的重要成员,其活性与肿瘤的关系近来受到广泛关 注.本文综述了survivin与肿瘤关系的研究进展. 1survivin基因的结构及其功能 Crookl3等于1993年在苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonellagranulovirus,CpGV)中首先发现IAP基因,它能抑 制缺失p35基因的苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(autogran phacalifornicamulticapsid—nucleop0】yhedr0virus,AcMNPV) 突变株诱导的Sf221细胞凋亡,以后在AcMNPV,OpMNPV 等其他杆状病毒中也发现存在IAP基因,在人类组织细胞 中,至少发现了8个IAP蛋白家族成员.IAP蛋白家族结构 的共同特点是在N端含有1,3个由约8O个氨基酸构成的重 复序列,称之为杆状病毒IAP重复序列(baculoviralIAPre peat,BIR).BIR是lAP的特征性结构,为一种锌指折叠结构, 包含4或5个a螺旋和3个B折叠结构.IAP蛋白的c端包含 或不包含1个指环(ringfinger)结构,指环含4O个氨基酸(包 括8个半胱氨酸残基和组胺酸残基).毗邻指环结构的泛素结 合区域(ubiquitin-associated,UBA)具有E3泛素连接酶活性, 经泛素一蛋白酶体介导蛋白降解. 胱天蛋白酶(Caspase)家族成员在细胞凋亡的信号调制和 启动死亡的过程中发挥关键作用.在Caspase蛋白的N末端 含有IAP结合基序(IAPbindingmotif,IBM),IAP蛋白中BIR 结构域能与活化的Caspase蛋白中IBM结合,并由此抑制 Caspase活性,进而抑制细胞凋亡发生.IAP蛋白家族中的部 分成员含有Caspase募集结构域(caspaserecruitmentdomain, CARD),由6个a螺旋构成,位于BIR与指环结构之间,具有 介导蛋白和蛋白相互作用的功能,通过与其他包含此结构域的 蛋白形成寡聚体,调节细胞死亡l5J. 已发现人类IAP蛋白家族的8个成员为NAIP,cIAP1,C IAP2,XIAP,ILP2,Livin,BRUCE及survivi),其中survivin在 家族成员中相对分子质量最小.survivin基因克隆于1997年, 全长14.5kb,位于染色体17q25上,由4个外显子和3个内含 子组成.外显子和内含子不同组合形成survivinmRNA多种 剪切异构体其结构有别于IAP蛋白家族其他的成员的是,N 端只有一个BIR结构域,C端缺乏ringfinger结构,而由一个 含4O个氨基酸组成的a螺旋形成的卷曲结构代替.survivin 蛋白含142个氨基酸,相对分子质量为16.5×10.[s-~oJ.X射 线衍射晶体 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 法显示,survivin蛋白在溶液中以独特的二聚 体存在. survivin除具有IAP家族成员共有的抑制细胞凋亡的作 用外,还参与细胞有丝分裂的调节和胞质分裂,其表达有严格 的细胞周期依赖性,于G/M期的表达量达到最大,G/S期表 达量最小.survivin过度表达会促使异常转化的细胞越过凋 亡检测点,并顺利通过有丝分裂,从而促进细胞增殖,增强对治 疗药物的耐受性.survivin在细胞核和细胞质中均有分布,在 分裂间期,survivin与中心体共同定位于细胞质;在有丝分裂 前期和中期,survivin转移到细胞核内与着丝粒蛋白一B(CENP- B)共同结合在着丝粒上;在有丝分裂后期,survivin与赤道板 上的纺锤体微管结合;在末期,与形成中心体的微管束结合,分 布在两个子细胞的中心体内;在细胞质分裂中,它则通过肌动 蛋白一肌球蛋白收缩环浓缩在中间体上”].另外,survivin还 与血管形成有关,在血管发生和形成中扮演重要角色.血管内 皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)能够上 调血管内皮细胞中survivin的表达,后者则通过促进血管内皮 细胞增殖而有利于新生血管的形成.研究发现,能将细胞周期 抑制于G期和s期的因素,也能抑制VEGF介导的survivin 表达上调,由此可将survivin作为抗血管形成的靶点而用于肿 瘤防治[1416]. 2survivin在肿瘤组织中的表达及其治疗 survivin是IAP蛋白家族中惟一于生长发育过程中普遍 表达于胎肺及其他胎体器官的成员.在正常成年人组织仅见 于胸腺,睾丸,分泌期子宫,基部的结肠上皮细胞及有再生功能 的造血干细胞,但在变异细胞和几乎所有的恶性肿瘤,如肺癌, 乳腺癌,胰腺癌,结肠癌,软组织肉瘤,脑肿瘤,黑色素瘤,神经 母细胞瘤,白血病,食管癌,胃癌,肝癌,,膀胱癌,子宫癌及卵巢 癌等均有不同程度的表达,且其表达与肿瘤恶性程度,侵袭性 及临床预后相关[„“]. 有研究显示,survivin蛋白和survivinmRNA在宫颈炎组 织中仅微量表达,在宫颈癌前病变和宫颈癌组织的表达依次显 着增强,在宫颈癌前病变,宫颈浸润癌组织中survivinmRNA 和蛋白两者的表达量均呈正相关,而在宫颈炎组织中两者无明 显相关性.survivinmRNA在恶性肿瘤中的表达具有高度 的选择性,在癌组织中的表达随着病理分期的进展而不断增 高.另有研究发现,食管鳞状细胞癌(esophagealsquamouscell carcinoma,ESCC)肿瘤组织survivin表达阳性,而远癌组织 survivin表达阴性,且survivin的表达与否与其启动子CpG岛 的甲基化状态无关,提示该区域的甲基化修饰未参与调控sur一 *基金项目:国家自然科学基金资助项目(30873282);湖北省自然科学基金 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 项目(2009CDA060). 重庆医学2O11年5月第4O卷第14期 vivin基因的转录[„.有资料显示,survivin在肿瘤细胞耐药 方面扮演重要角色,紫杉醇诱导的微管稳定及有丝分裂阻滞能 增加survivJn表达最终使凋亡通路被阻断[2...sur%,ivin不同 程度地表达于几乎所有的恶性肿瘤,这是多种机制导致sur vivin基因表达调节失控的结果,如染色体17q25上survivin基 因扩增,survivin基因低甲基化,基因启动子活化,p53功能缺 失,增强的磷脂酰肌醇(一3)激酶上游信号和促细胞分裂的蛋白 激酶通路. 鉴于survivin高表达与肿瘤发生的密切相关性,针对SHY— vivin表达的反义RNA.,显性失活突变体,survivin核 酶,survivin-siRNA[2324一及siRNA联合放化疗等开始被用于 肿瘤的基础与临床研究.Wu等的研究结果表明,反义核苷 酸能激活Fas介导的凋亡途径并抑制骨肉瘤细胞MG-63的增 殖,且生长抑制率与凋亡率有剂量依赖性,当反义核苷酸剂量 达到600nM时,其作用达峰值.Cheung等l2将突变(C84A) 失活的survivin与多聚精氨酸穿膜肽(R9)进行基因重组,并在 大肠杆菌中获得重组蛋白dNSurR9一C84A,当将这种重组蛋白 转入三维培养的HeLa和DU145细胞中后,它能通过激活 Caspase9和Caspases一3活性以及增强细胞对TNF_d的敏感 性来诱导细胞凋亡f.Shen等通过 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 3种shRNA,成 功沉默了人胰腺癌Patu8988细胞中survivin基因的表达,然 而较之设计一个shRNA位点的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 而言,两个shRNA位点 并没有明显提高干扰的能力.Li等0设计的siRNA也成功 沉默了子宫颈癌HeIa和乳腺癌SKBr-3细胞中的survivin. 3结语 survivin作为一种重要的抑制凋亡因子,在肿瘤和癌前病 变的早期诊断及判断预后中将发挥重要作用.随着sunivin对 凋亡和细胞周期调控确切作用机制的逐步阐明,以suni~rin作 为靶点开发新的抗肿瘤药物和设计新的治疗手段,对恶性肿瘤 的临床治疗将具有潜在的重大价值. 参考文献 [1] [23 [3] [4] Is] [6] [7] [83 [9] GhaxamiS,HashemiM,AndeSR,eta1.Apoptosisand cancer:mutationswithincaspasegenes[J].JMedGenet, 2009,46(8):497510. 孙玉宁,王升启.以细胞凋亡通路为靶点的抗肿瘤分子治 疗研究进展[J].国外医学药学分册,2006,33(5):321 324. 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E263LiQ,ZhaoJ,LiuJ,eta1.Survivinstableknockdownbv siRNAinhibitstumorcellgrowthandangiogenesisin breastandcervicalcancers[J3.CancerBiolTher,2006,5 ? 综述? 皇垦堂2011年5月第4o卷第14期 (收稿日期:2010—05—10修回日期:2010—10—10) 头颈部肿瘤放射治疗致唾液腺损伤的研究进展 彭哲综述,徐志文审校 (广西医科大学附属第一医院耳鼻喉头颈外科,南宁530021) 关键词:放射性口干;唾液腺功能;形态学 d0i:lO.3969/j.issn.16718348.2011.14.043文献标识码:A文章编号:1671—8348(2011)14—1446—03 放射治疗(放疗)是鼻咽癌等头颈部肿瘤的主要治疗方式. 由于整个或部分唾液腺组织经常被包括在放疗野内,从而导致 唾液腺组织不同程度的损伤,使大多数患者出现放射性口 干_】.].放射性口干是头颈部肿瘤患者接受放疗后常见的并发 症,从而导致患者生存质量降低E351.但其发生机制至今尚未 完全明确,本文主要综述放疗导致的唾液腺损伤在其功能,形 态学及细胞水平等方面的变化. l唾液腺的组成及其生理功能 人类的唾液腺由腮腺,颌下腺和舌下腺三大唾液腺以及分 布于黏膜的小唾液腺组成.9O的混合性唾液由三大唾液腺 分泌,在未受刺激的状态下,2/3的唾液分泌来源于颌下腺;在 刺激状态下,1/z的唾液分泌来源于腮腺;其他微小腺体分泌 的唾液量约占总唾液量的1O,但由于其富含黏液,因此对口 腔黏膜起持续性润滑作用.正常生理状态下,人体每天的唾液 分泌量为0.5,1.0L,pH值为6.5,7.4.唾液的分泌分为两 个阶段:第一阶段是神经递质刺激水分,蛋白质和电解质进入 腺泡细胞腔内形成原唾液;第二阶段是原唾液在导管内的修 饰,NaCI的重吸收,K和HC0.一的排出和一些蛋白质分泌, 随后进入口腔J. 2放疗后唾液腺功能的改变 唾液腺细胞分裂缓慢,更新周期长,理论上应该对电离辐 射不敏感,而临床上通常在放疗后早期患者即发生口干症 状].因此,可认为唾液腺是放射敏感组织,许多学者对此现 象进行了广泛的研究和探讨,但至今放射性唾液腺损伤机制尚 未完全阐明. 2.1放疗后唾液量的改变有相关文献报道放疗后唾液流率 的降低是导致口干的重要因素之一,同时也是检测放疗后唾液 腺功能受损最直接的方法.唾液流率减低或被抑制取决于: (1)唾液腺组织的放射敏感性.Jentzen等]对5O位鼻咽癌接 受放疗患者进行放疗前,放疗中,放疗后1,3,6个月及1,2年 的刺激性和非刺激性的唾液分泌测量,结果发现,在8周的放 疗过程中,患者于放疗第4天,即接受放疗剂量为720CGy时, 刺激性和非刺激性唾液分泌量下降4o,50,且放疗后唾 液分泌量随着时间的推移不能恢复.(2)唾液腺组织受照射的 范围.Baharudin等检测了3O例头颈部肿瘤患者已接受放 疗的唾液分泌量,发现在放疗过程中,全部唾液腺被包括在放 疗野内的患者唾液分泌量比只有部分唾液腺被包括在放疗野 的患者下降明显.(3)照射剂量(单次照射量及累积量).有学 者认为当接受头颈部肿瘤放疗的总剂量小于25,30Gy时,2 年后唾液腺功能可以恢复到放疗前水平DJ.正因为剂量相关 学说得到了多数学者的认可,因此近年新发展起来的同步加速 调强放疗在提高靶目标吸收剂量的同时,更好地控制了周围正 常组织的剂量吸收率,特别是使放射敏感的唾液腺组织在一定 程度上受到了保护,从而减轻放疗后口干[1O12]. 2.2放疗后唾液的电解质及生化改变放疗后唾液的电解质 和生化的改变使唾液的正常功能受到不同程度的影响,由此引 发的一系列并发症,包括咀嚼,吞咽,味觉,讲话,睡眠障碍,甚 至免疫功能下降,口腔菌丛失调,VI腔和VI咽黏膜炎等E133,严 重影响了患者的生活质量,造成其日后严重的经济和精神负 担.Li等__1采用14只小型猪进行单侧腮腺15,20Gy的一次 性照射,于放疗前和放疗后4,16周进行唾液流率及唾液生化 的测定结果提示,在两个放射剂量组中,唾液中的Ca,淀 粉酶均显着降低,唾液中的K显着升高.Lee等[】认为受照 射后4O,90d这两个时间段内唾液的总蛋白,Na,C1一,Ca. 的含量均是降低的,而K含量是升高的. 3放疗后唾液腺的形态学改变 3.1早期形态学改变由于临床上较难获取患者的唾液腺组 织标本,因此目前放疗后唾液腺形态学改变的标本及文献资料 基本来源于动物.因各种动物唾液腺的组织构成与人唾液腺 组成是有差别的,并且不同种属动物之间其唾液腺的构成亦不 甚相同,正由于尚无既定的动物模型,也无既定的研究放射性 唾液腺损伤的放射方式与剂量,所以其照射后形态学改变尚未 得出一致的定论.目前采纳较多的研究动物是鼠类.其优点 有:(1)鼠类放射性唾液腺损伤模型的应用方便,可行性强,成 本较低;(2)其唾液中的水分及蛋白分泌与人相类似;(3)受照 射后快速的唾液分泌下降. 在Boraks等_1的研究中,给予Wistar大鼠头颈部15Gy (每次7.5Gy,分两周进行)照射后立即将其腮腺行透射电镜 观察,可见照射后的腮腺腺泡出现空泡化,粗面内质网扩张,线 粒体结构紊乱以及细胞膜破坏等改变.有文献报道,家兔头颈 部接受一次性15Gy照射后3d,可以观察到由于腮腺细胞膜 破裂导致的细胞内水肿,细胞边界模糊,散在空泡化及细胞核 坏死,随着放疗后时问的推移,可以观察到腺泡分泌功能和形 态的轻微修复m].Urek等_1对小鼠头颈部一次性15Gy大 *基金项目:广西壮族自治区卫生厅重点课题基金资助项目(桂卫重 200634).