过氧化氢对猪骨髓来源内皮前体细胞氧化应激损伤的初步研究

过氧化氢对猪骨髓来源内皮前体细胞氧化应激损伤的初步研究 ,,,,,, 分类号 密级 国际十进分类号(,,,) 第四写匿天孝 学位论文 氧化应激损伤的初步研究 (题名和副题名) 周祥 (作者姓名) 指导教师姓名 王海昌教授(主任医师) 指导教师单位 笙望芏堕盘鲎鱼室堡堕壁垒鲎蜜登 申请学位级别 亟 ? 专业名称内科学(心血管病) 论文提交日期 ,,,,(,, 论文答辩日期 ,,,亟,量 学位授予单位和日期 第四军医大学 评阅人—— 答辩委员会主席 论文起止时间:,,,,年,,月至,,,,年,,月 , ,,,,,, 獯镤髓赢蹶 秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是找个，在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方，,，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名 日期 训一够砒 保护知识产权声明 本八完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即:研究生在校攻读学位期闻论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本八保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校可以公布论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容除外)，可以采用影印，缩印或其他复制手段保存论文。学校有权允许论文被查闻和借闻，并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。 论文作者签各 导师签各:—与、,型,』～日期 刮修一以 第器军医大 缩略语 英文全称 中文全称 荚文缝写 荚文全称 孛文学磺士学证论文 缩略语表 全称 ,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,, 内皮前体细胞 ,,, ,,,,,,,,,,, ;,,,, 内皮细胞 ,,(淤 ,,,;,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,血管内皮生长因予 ,,;,,, 醒,, ,,,,; ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,,;,,, 基本静成纤维纲胞黧长因子 ,,,, ,,,,,,,,,,,,; ,,,, ;,,,, 造血干细胞?, ,,;,,,,; ,,,,, ,,,,,,, 缺血性心脏病,,, ;,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, 冠心病;鸱, ;,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,,,,嚣状动脉旁路移穰术,删,, ,,,,,,;,,,, ;,,,, 单个核细胞,,(,,, 鄹,,,,,;,,, ,,;,,,,,,, ;,,,,,粒细胞,巨嗜细胞熊落刺激因子 ,,,,,,,,,,, ,,;,,,?,,, ,,,,,,,;,,,,;,,,,, ,,,,,,,,,,,耱缯蕤集落裁激嚣予 ,,;,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,皿管内皮细胞生长添加剂 ,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,;,,,,, ,,;,,, 斑浆盘营性盎友瘸嚣子,嚣镶,, ,,,;,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,斑管内皮生长霞予受体一, ,,;,,, ,,;,,,,,,,,,, ,,,,;,,,舡,,,,,,, ,,,, 运动踏板耐受试验,,, ,,,,, ;,,,,,,,, 骀牛斑清 第西军鞭支举硕士掌缓论文,,, ,,,,,,,,,,,,,;,, ,,,,; 磷酸簸缓肄液,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,;,,,,,,,,, 甲基四唑菔,,, ,,,,,,,,,,,,,,, 鞭二骛,,, ,,;,,,, ,,,,,,,,,,,,, 巍酸聪氮酶 , 第四军医大学硕士学位论文过氧化氢对猪骨髓源内皮前体细胞 氧化应激损伤的初 步研究 研究生周祥 导师王海昌教授 第四军医大学西京医院心脏内科，西安,,,,,, 中文摘要实验背景及目的 内皮前体细胞(,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,，,,,,)是一类能增殖并分化为成熟内皮细胞(,,,,,,,,,,, ;,,,,，,,,)的前体细胞。成年个体外周血中的,,,,来源于骨髓(,,,, ,,,,,,，,,)，可以募集、归巢到缺血部位，通过介导局部血管生成和血管新生改善缺血器官的功能，具有良好的临床应用前景。 新近研究发现，冠心病(;,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,，,,,)患者循环血中的,,,,数量下降了近,,,，迁移能力受损，,,,,数量减少和功能受损可导致冠心病患者血管新生障碍。导致冠心病患者,,,,数量减少功能受损的确切机制尚不明确，有研究指出,,,,数量下降、功能受损与冠心病危险因子的数目成反向线性关系，这些危险因子包括高脂血症、高血压、糖尿病、吸烟等，而氧化应激是这些因子引发动脉粥样硬化共同的分子机制之一，因此，冠心病患者,,;,数量下降、功能受损可能与氧化应激相关。 过氧化氢作为活性氧(,,,;,,,, ,,,,,, ,,,;,,,，,,,)家族的重要成员，可在体内外对包括内皮细胞、心肌细胞在内的多种细胞产生氧化应激损伤。也因其价格低廉、取材方便，被广泛应用于有关过氧化损伤的体外实验中。本实验在体外培养猪骨髓源内皮前体细胞的基础上，调整培养基内过氧化氢 , 第四军医大学硕士学位论文浓度，至培养终点，通过对,,,,的细胞存活率、凋亡率、乳酸脱氢酶(,,,)活性、丙二醛(,,,)含量的测定，初步研究氧化应激对,,,,的损伤作用。实验 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 第一部分:猪骨髓源,,,,的体外分离、扩增及鉴定。在无菌的条件下抽取猪骨髓，用,,;,,,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞，经过差速贴壁分离出,,,,，接种在添加特定浓度,,,,、,,,,的培养基中。原代细胞经,,,,,和?,,,(,双染阳性鉴定为,,,,。 第二部分:不同浓度过氧化氢对,,,,的氧化应激损伤效应及复方丹参注射液的拮抗作用。取原代培养的,,,,，在其培养基中添加不同浓度的过氧化氢及复方丹参注射液，至培养终点，,,,法测定细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，并测定培养基中乳酸脱氢酶活性、丙二醛含量。实验结果,、体外成功培养出猪骨髓源,,,,，并经鉴定证实。,、与空白对照组比较，不同浓度的过氧化氢均可使,,,,存活率降低 (,,,,(,,)，组间相比亦有显著性差异(,,,,,(,,，,,,(,,);不同浓度过氧化氢均可使,,,漏出增多(,锄(,,)，组间相比亦有显著性差异(,,,,,(,,，,,,,,(,,);不同浓度过氧化氢均可使,,,含量增高(,锄(,,)，组间相比亦有显著性差异(,,,,,(,,，,,,,,(,,);不同浓度过氧化氢均可使细胞凋亡率上升(,,,(,,)，组间相比亦有显著性差异(,,,,,(,,，,,,(,,)。,、与空白对照组比较，,,,, ,过氧化氢显著降低,,,,存活率(,锄(,,)，使,,,漏出增多(,,,(,,)、,,,含量增加(,,,(,,)、细胞凋亡率上升 (,,,(,,):复方丹参注射液可使上述结果改变，,,,,,,浓度复方丹参注射液总体效果最佳。 , 第四军医大学硕士学位论文结论 过氧化氢可对,,,,造成氧化应激损伤，表现为细胞存活率下降、,,,漏出、,,,台”量增加、细胞凋亡率上升，其损伤效应受到复方丹参注射液一定程度的拮抗，提示抗氧化治疗可能对,,,,氧化应激损伤有效。关键词: 内皮前体细胞，损伤，氧化应激，过氧化氢，复方丹参注射液 , 第四军医大学硕士学位论文 ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,〕,,, ;,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ;,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,:,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,:,,,, ,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,’,, ,,,,,,(,,,,, ,,,,,,;,,,;,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ;,,,,(,,,,),, , ,,,, ,,,,,;,,,,, ;,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,’, ,,,,,,,,,,, ;,,,,(,,,)(，, ,,,,,，,, ,,, ,,,,,,,,,, ;,,;,,,,,,, ,,,,,,, ,, , ,,,, ,,,, ,,,,,,(,,)(,,,, ,,;,,,,,,, ,,,, ,, ,,;,,,,; ,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,;,,,, ,,,,;,,,,; ,,,,,, ,,,,,班,,,;,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,,,,(,,,,,,,,, , ,,,,, ,,,,,,,,, ,,, ;,,,,;,,,,,,, ,,, ,,,;,,,,,( ,,;,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,,,, ,,,,;,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,,,;,,,,,, ,, ,,,,,,,,,，,,,;, ,,,,, ;,,,,,,,,, ,,,,,,,,,;,,,, ,,,,,,;,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,、,,,, ,,,(,,,,,,,, ,,, ,,;,,,,,,, ,,,,, ,,,,;,,,, ,, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,, ,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,,，,, ,,, ,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,,,,;,,,, ,,,,,, ,, ,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,; ,,,, ,,;,,,, ,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,,，,,,,,,;,，,,,,,,, ,, ,,(,,;,,,, ,,,,,,,,, ,,,,,, ,,,,, ;,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,,,,,;,,,,,,, ,,,,, ,,,,, ,,,, ,,;,,,,，,, ,,,,,,,,,;,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,, , 第四军医大学硕士学位论文 (:,,(’( ,, ,,, ,,,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,;,,,, ,,,,,, ,,,;,,,(,,,)，,,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,,、;,, ,,,,;, ,,,,,, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,, ,,;,,,, ,,;,,,,,, ,,, ,,, ,,,;,,,,,, ;,,,, ,, ,,,, ,, ,, ,,,,,(,,,,,,,,,,,，,,,, ,, ;,,,, ,,, ;,,,,,,,,;, ,,, ,,,，,, ,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,(，, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,，,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,,, ;,,,,,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,;,,,,,,,,,(，,,,,,,,,,，,,, ,,,,,,;,,, ,,,,,,,,,,, ;,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,, ,, ,,, ;,,;,,,,,,,,, ,, ,,;,,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,),,,, ,,,,,,, ,, ,,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,, ,, ,,,,(,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,画,,, ,:，,,,,,,,,，,,,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,;,,,,, ,,,,, ,,—,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,(,,, ,,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, ;,,,,,,,,，,,,, ,,,,,,;,,,,;,,,,(,,,,),,,, ,,,,,,,, ,, ,,;,,, ,,,,,,, ,,,,,,,, ;,,,,,,,,,,,,,(,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,, ,, ,,;,, ,,,,,;,,,, ,,,,,,,;, ,,,,,,, ,,, ;,,,,,,, ,, ,,,,,;,,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,, ,, ,,,;,,, ;,,;,,,,,,,,,(,,,, ,,,, ,,,,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,, ,,, ,,,,,,,( ,,,, 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;,,,,，,,,,)来源于曹髓，可以募集、爨熬弱姣焱都蘧，分毯袋蠹疫缨疆(,,,,,,,,,,, ;,,,,，,,,)透过骖复受蒺矗警逡瘦、夯警弱帮盘警生成窝盘管薪室，改舔嫒纛器富匏功戆。近年来，随着细胞秘分子生物学的飞速发展，治疗幢赢管嫩戏鹣理论研究及临床应震日趋成熟，成为冠心病非药物治疗领域中继外科搭桥手术、经皮冠状动脉介入治疗之臌又一亮点。 文献回顾一、治疗燃敷警生成与,,,, 趣蛰黧袋童葵分灸嚣嵇类型:一释是在胚舷裁巍巍警母绸魏逮过 漂整分诬增薅影簸褪争瓣盎警瓣终缝稳，霹盘管发垒(,,,;,,,,,,,,,,)，,,;要一耱是在己鸯纛繁黼络结孝每鲍基础上，经过表皮缨蕤的迁移、增生，最后以芽生的方式扩展出鼹多的斑管网，称为血管新生,(,,,,,,,,,,,,),甜。自从,,,,年,,,虹,,,系统的阐述了舭管新生的机制‘,,以来，普遍认为成体尉烹臻是以血管新生方式产生新的,管，不存在血管发生的功能。但随着研究深入，发现受损或闭塞的血管周围也襻谯着血管发生。 治疗性觚管生成是指将外源性成血管因予和(溅)成皿管细胞，用不同手段导入患者体蠢，通过促进或诱导心脏缺血区的侧浅敷管童成，改善血流供应，挽救濒死，鑫魏，减轻映盘疰状，改善心驻功麓。数下辩缺巍性心薤瘗(,,;,,,,;,,,,, ,,,,,,,，，,,)盘骜赣生治疗鬏壤簿礤究逶惩俸,楚要霞鼹。,或盘警瓣子奔簿的治疗性血管生成 成触臀湖予介导的治疗性血管生成，旱已受剡广泛关注，临床研究已经 ？ 第霆军医大攀磷士举搜谂丈起步。这些成血管因子这些生长因子绝大部分属予肤类生长因子家族，主要瓴括:,管内皮细胞生长因子(,,,,)、碱性成纤维细胞擞长因子,,,,)、转化擞长因子一,(,,,,,)、肝细胞生长因子(，,，,,)、表皮生长因子(,,,)、胰岛豢囊长嚣予(,,,国、巍小援愆纯生长嚣,予(,,,,)、自纲稳禽索,(，,,,)、盎管纛羧豢。,(,,,,)镣。在，,,静治疗中磷究鞍多魏霄激下,蹙:,(,赢管内皮生长瓣子(,,,,) ,,,,,是一类瓣豢结合糖蛋白，其家羧彀插,,,,,,、 ,、,,,,,,、,,,,,,鞠疑盘生长嚣子,穗,,,,,,、,,,,— 嚣)，冀孛在盘管凝敷治疗孛骚究最多觞凳,觏簦,,，帮遴餐骄称的,,,,。,,,,,,嚣编码斓孙淑黪豁显子剪接缝合不同，分为五个娅型，分别由,,,、,,,、,,,、,,,、,,,个氨基酸残基构成，,,,,,,,是其主翳存在形式。,,,,有三羊申特异性络氨酸激酶受体:,,,,,、,,,,,,,、,,,,,。,,,,,、,,,,,璩滚遮予血管内皮细胞，,,,,,表达于游黧謦滤震缨藏。,,,,是一耱盎管肉度纲熬特异性霄熊分爱添，爱够挺进盔嚣斑皮镶施蠡冬分他、,乏移稆增殖哪,;弱辩又萄键遴内菠绸臌产生并谓节纾维鬣囱酶原的激活趿予和抑制因子，屠者巍斑管生成中对基底膜细胞基质的降熊舆有鬟要作用;越多,还可增趣血管通透靛，嫂起发缨鼹接受蒯激因子酌佟建增麓;嚣簿蠹浆鬣鑫矮渗，形戒盎繁燕艘魏貉黪萋震，蠢秘予矗譬生成〔,,。动物心肌缺血模溅研究证实，经,,,,浓疗鼷，缺血心胍的觚管生成明显增加，侧溉循环增多，肌液灌注和心室功能明擞改善〔,？,〕。,(,成纤维缨鼹擞妖邂子(,,,) 嚣蘩嚣皴,憨,,,,,,’,令家蓑系嚣:,,,。，、,,,,,、，,,。,、薹薹,掰,萋、,,,,,、,,,,,、,,,,，镪捂了至少,,多种困子，蔟审研究最多斡为碱性成纤维缨鼹生长因子?,,)。,,,,是一种广谱有丝分裂原，促细胞增麓的作用是非特异髓鹣，对予中瓤层来源翡缀魔，包括残纾缀缓勰、,,,、敷嚣乎滢魏缨照、上皮绷耱、聿孛经簌绥藏等，驽其骞较强麓鬣壤臻终瑟，俸乡,鞠在体试验臻迁爽 ,, 第四军医大学硕士学位论文,,,,能够促进内皮细胞的迁移和增殖，促进血管管腔形成和分支，以及加速原有血管网络之间的连接‘,,,‘,,,。动物试验表明，,,,,能够加速缺血部位的血管生成，提高缺血心肌的灌注和功能‘,,,,,〕。对于急性心肌缺血动物模型，,,,,能够在早期增加梗死区的血流，缩小梗死面积，显著提高左室射血分数〔,,，，,〕。 ,(,血管生成素(,,曲: ,,,,,和,,,,,,以及它们的酪氨酸激酶受体,,,一,、,,,,,主要作用于血管成熟的后期。,,,,,和,,,(,是分泌性的糖蛋白，二者有,,,相同的氨基酸成分，与,,,(,具有相似的亲和性。,,,,,参与构建血管非内皮细胞成分。,,,—,可引起,,,,,磷酸化，,,,,,可拮抗这一过程。,,,,,主要在血管芽生的边缘表达。,,,,,可阻止,,,,,的成熟或稳定功能。,,,,,对血管的作用具有依赖于,,,,的双重性，在存在,,,,的条件下，,,,,,可促进血管新生，而缺乏,,,,时，,,,(,可导致血管退化‘,,,。,,,,,,,等【,,,报道，单独使用,,,,,并不能刺激血管生成反应，提示,丑,(,必须与其他成血管因子联合使用方能发挥治疗作用。,,,,掣,,,将,,哥,和,,,,联合使用，发现可以强化,,,,的生血管作用，并且减少血管的渗漏性。,,;,等在大脑中动脉闭塞的大鼠模型中，采用原位杂交和免疫组化技术，观察到,,,(, ,,,,,水平在动脉闭塞前后持续表达，无明显变化;而,,,,, ,,,,水平在动脉闭塞后,,在梗死周围内皮细胞中明显上升。,,,,,和,,,,水平上升伴随内皮细胞增殖，内皮细胞增殖与,,,,,,,,,,平衡相关【,,,。,(,其他成血管因子 转移生长因子,,(,,,—,)是一类具有抑制或促进双重作用的生长因子。,,,(,不是内皮的促有丝分裂剂，其作用是刺激纤维蛋白酶原激活抑制剂的产生，在血管生成所必需的细胞外基质降解中起重要 第四军医大学硕士学惋论文长因子(,?,调节作用【,,,。胰岛素样生 ,, ,。,)由微血管内皮细胞和血管平滑肌细胞合成，微血管内皮细胞有高亲和力，,,(,受体，与,,,相比，，,,(,对觑锵内皮的促有丝分裂作用较弱〔,,】。血小板源性生长因子(,,,,)是一类从血小掇,颗粒中发现的多肽因子，对血管平滑肌及成纤维细胞具有促有丝分裂作用，商促笔绍血管形成的作用。 采趱多耱戚血管因子联合焉药，对于缺盎心飘巾较大的侧支盘管有诞生长终露，嚣戆楚一令滋较毒嚣途熬磅究方囊【,舅。黧阏,,雩瞧瘟注意嚣或盘警因子应蔫豹不秘方甏。爨燕，,,,诞绥麓臻殪鹣终瓣怒臻特异往戆，辩内皮缨施、成纤维缁臌、平滑肌细胞均有增殖作用，因就萁键舡管新生作用不仅局限于毛细戚臀，也可引起细小动脉增生，同时亦有形成日职厚性病变的可能，对动脉硬化患者肖可能蒯激动脉硬化斑块内平滑肌细胞的增殖使血管进一步狭窄〔,,】。,,,,,以引起血管通透性增高，导致局部水肿。,,,,和,,,都可引起剂量依赖饿的低觑压、肾毒性及骨髓抑,,,,,,,,。同时，这些成血管因子在治疗部位乏夕,的叔管生成作用可能造成靶器官以外踯饿的血管新生，使癌变及视薅膜疯交筑羧性增蹇咎,,,,,。这些潜在的副作翔在犒藤缴鬻孛必须雩,起警惕。,。,,褒臻磷炎檄凝: 目前成搬管因子介导血管薪生的治疗方式童簧肖两种:蛋自治疗、基因治疗。蛋自治疗是指将成血管因子以重组蛋白的形式给药:基因治疗则主要是借助,,,澈,,,、腺病毒或脂质载体转化细胞米实现。 成肌镣因子重组蛋白治疗缺血性心脏病的临床研究始于,,,,年，,;,,,,;,,,镣,,,】首次报道应用,,,,与安慰剂沿瓶臀滋射治疗,,例行;,,,冠脉左翦降支纛乳内动脉搭桥术患者。,年随访结果寝明，治疗组左前降支远端麴镤,支,瓤铰敬麓菱失稿显，翦盎分数提赛,,(,,，掰辩照缝仅受,,(,,，瑟终潼疗缓瘸入戆,貉床疰扶氇毒不霹疆痉嚣改善，瑟簿麓羧麓麓?词诡民蠹跎伲 嫁陡妻蹇瓜柘奋沧瓒荆 煜桦坊颊吒 佟,玻埃埃澳辏 樱簦澹纾恚幔睿畲媳ǖ懒嗽谝环煅现毓诼鋈辰徊荤苄写 逞 酥亟ㄊ醯幕颊咧校 猓疲牵凭 夭啃?锌谧有耐饽つ?,, 第四军医大学硕士学位论文注射，在治疗,周与,,周时，采用,,,,,评价血供，结果显示与治疗前相比有明显改善〔,,】。,,,,,,等在,名冠心病患者中进行了,,,,,,的，期临床试验，肯定了经冠脉内给药的安全性，同时，也初步观察到,,,,,,高剂量治疗组在,,天时的室壁节段的核素灌注明显增加【,,,。此后陆续有一些小规模临床前期试验观察成血管因子在，,,中的治疗作用，结果多表明成血管因子蛋白治疗能够不同程度改善临床症状、运动平板试验时间(,,,)、左室射血分数和血流灌注成像等指标?,,,。,,,,,试验是成血管因子重组蛋白治疗领域中第一个的较大规模随机、双盲、安慰剂对照，，期临床试验。共入选,,,例病人，采用,,,,,,,行冠脉内注射继以静脉注射,次，最终结果表明重组,,,,治疗是安全的，高剂量组的,,,及心绞痛症状较低剂量组和对照组相比有改善趋势，但无统计学差异【”】。在另一个同类试验,黜,中，共,,,例，,,患者接受不同剂量的,,,,,冠脉内注射治疗，治疗组,,盯与对照组,,,时间均延长，但两组间无统计学差异，治疗组心绞痛发作次数在,,天随访时较对照组明显减少，但在,,,天随访时己无差异〔,,】。 成血管因子基因转化治疗缺血性心脏病的临床研究始也于,,,,年首次开展。,,,,,,,等,,,】选择,例经皮腔内冠状动脉成形术或冠状动脉搭桥术后重症,，,病患者，在微创不停跳直视下将质粒为载体的,,,,,,,基因(,,,,,,,,,,)直接注入心肌，术后,周心绞痛症状明显改善，服用硝酸甘油的数量显著减少，,,,月后，造影发现侧枝血管明显增加。,,,,,,,,,等【柏〕进行了腺病毒构建的,,,,(,,,基因(,,,,,,,,,,)的，期临床试验，试验将,,,患者分为,组(,,,,组，,,,,)，同时在缺血区进行,,(,,,,,,,注射，,组(,《)则单独实旌经胸小切口心肌内直接注射，实验,,天后两组均观察到侧支血管评分的增加，同时核素扫描发现室壁运动的改善。,,,,年,,,,等【,,】发表了第一项,,,,基因的随机单盲对照研究的结果。应用,,,,电机械标测定位左心室，于心内膜下注射,,,,,,(,。转染前后比较，平均缺血面积显著减少，心肌灌注明显改善，试验组心绞痛发作、硝酸甘油使用量明显减少。随后公布的的,,, 】, 第四军医大学硕士学位论文 试验【,,,、也证实经冠脉基因转染途径切实可行，耐受性好。 .