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细菌和霉菌总数的检验

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细菌和霉菌总数的检验 11 范围 本标准规定了化妆品微生物学细菌和霉菌总数的检验。 本标准适用于化妆品细菌和霉菌总数的检测。 12 规范性引用文件 GB 7916 化妆品卫生标准 GB/T 7918 化妆品微生物标准检验方法 QB/T 1684-1993 化妆品检验规则 13 一般规定 细菌总数是指1g或1ml化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数和霉菌总数可用来判明化妆品被微生物污染的程度,以及生产所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况,是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。 3.1方法提要: 本标准采用标准平...

细菌和霉菌总数的检验
11 范围 本标准规定了化妆品微生物学细菌和霉菌总数的检验。 本标准适用于化妆品细菌和霉菌总数的检测。 12 规范性引用文件 GB 7916 化妆品卫生标准 GB/T 7918 化妆品微生物标准检验方法 QB/T 1684-1993 化妆品检验规则 13 一般规定 细菌总数是指1g或1ml化妆品中所含的活菌数量。测定细菌总数和霉菌总数可用来判明化妆品被微生物污染的程度,以及生产所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况,是对化妆品进行卫生学评价的综合依据。 3.1方法提要: 本标准采用标准平板计数法。化妆品中污染的微生物种类不同,每种微生物都有它一定 的生理物理特性,培养时对营养 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。 在实际工作中,不可能做到满足所有菌种的要求,因此所测定的结果,只包括在本方法所使 用的条件下(在卵磷脂、吐温-80营养琼脂上,于37℃培养48h;在虎红琼脂培养基上培养72h) 生长的一群嗜中温的需氧及兼性厌氧的微生物总数。 3.2仪器3.2.1250ml锥形瓶。3.2.2电子天平、量筒。3.2.3压力蒸汽灭菌锅。3.2.4移液管。3.2.5灭菌培养皿:直径9cm。3.2.6酒精灯。3.2.7 恒温培养箱。3.2.8放大镜。 3.3培养基和试剂的制备 3.3.1生理盐水: 氯化钠8.5g蒸馏水1000ml 溶解后,分装到加适量玻璃珠的250ml锥形瓶内,每瓶90ml,经121℃(0.11MPa)20min高温高压灭菌。 3.3.2卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基: 制法:称取51g粉状卵磷脂、吐温80-营养琼脂成品培养基加入到1000ml纯水中混合,溶解均匀后分装,经121℃(0.11MPa) 20min高温高压灭菌,储存于冷暗处备用。 3.3.3虎红琼脂培养基: 制法:称取31.6g粉状虎红琼脂成品培养基加入到1000ml纯水中混合,溶解均匀后分装,经121℃(0.11MPa) 20min高温高压灭菌,储存于冷暗处备用。 4 倒培养皿操作步骤: 4.1 按国家标准要求检测细菌总数和霉菌总数. 倒培养皿前供检样品的采集、保存和样品制备按《微生物检验总则》要求进行操作。 4.1.1 细菌总数检测:用移液管吸取1:10稀释的检样1ml,注入到一个灭菌培养皿内;将熔化并冷至45~50℃的卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基倾注于培养皿内,每皿约15ml;随即水平转动培养皿,使样品与培养基充分混合均匀,待培养基凝固后,翻转培养皿,置37℃培养箱内培养48h。 4.1.2 霉菌总数检测: 用移液管吸取1:10稀释的检样1ml,注入到一个灭菌培养皿内;将熔化并冷至45~50℃的虎红琼脂培养基倾注于培养皿内,每皿约15ml;随即水平转动培养皿,使样品与培养基充分混合均匀,待培养基凝固后,翻转培养皿,置25℃培养箱内培养72h。 5 菌落计数方法: 先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5~10倍的放大镜检查,以防遗漏。记下各培养皿的菌落数后,求出同一稀释度各培养皿生长的平均菌落数;若培养皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时,该培养皿不宜计数;若片状菌落不到培养皿中的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半个培养皿菌落计数后乘2,以代 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 全皿菌落数。 6菌落计数原则及 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 方法:6.1首先选取平均菌落数在30~300之间的培养皿,作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释 度的平均菌落数符合此范围时,即以该培养皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) 6.2若有两个稀释度,其平均菌落数均在30~300个之间,则应求出两者菌落总数之比值来决定。 若其比值小于或等于2应报告其平均数,若大于2则报告其中较小的菌落数(见表中例2例3)。 6.3若所有稀释度的平均菌落数均大于300个,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)。 6.4若所有稀释度的平均菌落数均少于30个,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5)。 6.5若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300个之间,其中一个稀释度大于300个,而相邻的另一稀释度小于30个时,则以接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6)。 6.6若所有的稀释度均无菌生长,报告数为每克或每毫升小于10个。 6.7菌落计数的报告,菌落数在10以内时,按实有数值报告之,大于100时,采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数,可用10的指数来表示(见下表报告方式栏)。在报告菌落数为“不可计”时,应注明样品的稀释度。 细菌计数结果及报告方法: 例次 不同稀释度的平均菌落数10-1 10-2 10-3 两稀释度菌数之比 菌落总数 个/g或个/ml 报告方式 个/g或个/ml 1 1365 164 20 - 16400 16000或1.6×104 2 2760 296 46 1.6 38000 38000或3.8×104 3 2890 271 60 2.2 27100 27000或2.7×104 4 不可计 4650 513 - 513000 510000或5.1×105 5 27 11 5 - 270 270或2.7×102 6 不可计 305 12 - 30500 31000或3.1×104           7 注解: 7.1 操作注意事项: 1) 尽量使菌细胞分散开,使每个菌细胞生成一个菌落,否则将会导致重大的技术误差。 2) 制成供试液后,应尽快稀释,注皿。一般稀释后应在1小时内操作完毕。 3) 注意抑菌现象,由于防腐剂未被中和,往往使平板计数结果受影响,如低稀释时菌落少,而高释释度时菌落数反而增大。 4) 对照试验。化妆品的稀释液(特别是1:1O的稀释液)常带有化妆品颗粒,有时与菌落很难区分,为了避免与细菌菌落发生混淆,可作一个检样稀释液与琼脂混合的平板,不经培养放到4℃环境中,以便计数检样菌落时用作对照。 5) 另一种防止化妆品颗粒与菌落混淆的方法是培养基中加TTC。 注:TTC溶液要放冷暗处保存,以防受热与光照而发生分解。 TTC溶液在使用前应在水浴中煮沸半小时。 7.3 菌落计数及报告注意事项 1)如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高,有两种可能性:一是检验工 作中发生差错;二是受防腐剂影响。这二种情况均不可用作检样计数报告的依据。 2)如果平板上出现链状菌落,菌落之间没有明显的界限,这是在琼脂与检样混合时,一个细胞 块被分散所造成。一条链作为一个菌落计,如有来源不同的几条链,每条链应作为一个菌落计,不要把链上生长的各个菌落分开来数。此外,如培养皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入,在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落,也不应分开来数。 3)如果所有平板上都菌落密布,不要用多不可计报告,而应在稀释最大的平板上,任意数其中 两个平方厘米中的菌落数,除以2求出lcm2内平均菌落数,乘以皿底面积63.6cm2,再乘以其稀释倍数。以此结果作报告,例如:10-1~10-3 稀释度的所有平板上均菌落密布,而在10-3稀释度的平板上任意数两个平方厘米内的菌落数是60个,皿底直径为9cm,则该检样每克(或ml)中“估计”菌落数为: 60÷2×63.6×1000=1.9×106 63.6是按皿底直径为9cm时计算而得的面积,如所用培养皿底直径不是9cm,应另求面积。 4)鉴于检样中的细菌是以单个、成双、链状或成堆的形式存在,因而在平板上出现的菌落可 以来源于细胞块,也可来源于单个细胞,故平板上所得需氧和兼性厌氧的菌落数应以单位重量(g)或容量(ml)的菌落形成单位(Colony Formingunits CFU)报告更恰当。 制订/修订 审核 批准 实施日期 分发号                    
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分类:医药卫生
上传时间:2019-01-20
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