[word格式] 比重法测定EPO反相纯化峰中乙醇含量

[word格式] 比重法测定EPO反相纯化峰中乙醇含量 比重法测定EPO反相纯化峰中乙醇含量 由此可见,保压11分钟时平均纯度最 高,提高纯度为86.75%一79.18%=7.57% 结论:二品糖的生产是葡萄糖生产的一 部分,母液再糖化的纯度越高, 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明回收的葡 萄糖越多,收率也越高.所以,必须控制好保 压时间,保证糖化纯度处于最高状态.糖化 一 罐物料,选好放料时间,使纯度最高点保压 11分钟放料,才能使这一罐物料都保持高纯 度的糖化液,这个保压时间为生产所接受,为 二品糖生产提供了可靠的数据. 比重法测定EPO反相纯化峰中乙醇含量 沈阳三生制药股份有限公司(110027)李佳音赵枢孟姝 沈阳新马药业有限公司(110180)张海军 摘要根据相对密度测定法原理,确定乙醇含量与相对密度之间的换算列表,建立 一 种快速监测重组人红细胞生成素反相纯化峰中乙醇含量的方法. 关键词相对密度乙醇含量重组人红细胞生成素 实验证明适当浓度的乙醇在生产工艺中 可对病毒进行灭活,这样将大大提高生物制 品的安全性且方法简单可靠….我厂生产 的重组人红细胞生成素在其反相纯化峰中加 入50%乙醇进行病毒的灭活处理,为了指导 生产在线监测乙醇含量,建立此实验方法. 1 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 1.1设备 比重瓶:容积为25ml. 分析天平(OHAUS公司):感量为 0.0001g. HH一2型恒温水浴锅:精确度为?1oC 温度计:刻度为0—50”C,分度值为 0.5o【=. 1.2试剂 无水乙醇:10mmol/LTirs—HC1溶液;人 血白蛋白(20g/L50ml/瓶) 2方法与结果 2.1比重瓶的校正 2.1.1将比重瓶洗净,烘干至恒重.精密称 定比重瓶质量(精确至0.0001g). 2.1.2将煮沸经冷却的纯化水注入比重瓶, 塞紧瓶塞,多余水分自瓶塞毛细管中溢出. 将比重瓶放人恒温水浴槽直至瓶内水温恒定 (温度控制在20c【=).取出比重瓶,擦干外 壁,精密称定比重瓶与水的总质量(精确至 0.0001g). 2.2比重的测定 2.2.1将稀释成不同浓度的样品注入比重 瓶,按比重瓶校正方法测得瓶与样品质量 (精确至0.0001g). 2.2.2计算相对密度:样品质量 (20c【=)/水的质量(20c【=). 2.3实验过程 2.3.1含不同浓度乙醇的Tirs—HC1溶液 的相对密度(20oC) 精密量取无水乙醇45.0ml,46.0ml, 470ml48.0ml490ml500ml510ml 52.0ml,53.0ml,54.0ml和55.0ml加 10mmol/LTirs—HC1溶液至100ml,分别制得 含乙醇45.O%,46.0%,47.0%,48.0%, 49.0%,50.0%,51.0%,52.0%,53.0%, 54.0%和55.0%的Tirs—HC1溶液.用比重 瓶测得相对密度,实验共做三次,结果如下: ? 43? 比重瓶测得相对密度平均值图例密度之间关系如图: …一,…尊母桂j对节霉系 , ?二平均l值掣冀 通过上图可以看出随着乙醇浓度的增 加,样品的比重逐渐降低,但不成一定的线性 关系.根据以上数据得出20~C时在 10mmol/LTips—HC1溶液中乙醇含量与相对 45,州)%Sll_’HJ%55IX1.;;”lIH1% 乙醇含壕 由此得出20~C时在10mmol/LTips—HC1 溶液中乙醇含量与相对密度之间换算表 乙醇含量 45.O%46.O%47.O%48.O%49.O%50.O%51.O%52.O%53.O%54.O%55. O% 相对密度 0.94090.93910.93800.93410.93310.93130.92910.92690.92500.9221 2.3.2含不同浓度人血白蛋白的505乙醇 一 Tips—HC1溶液的相对密度(2O?) ?精密量取无水乙醇50.0ml,加 10mmol/LTim—HC1至100ml,得到50.O% 的乙醇溶液. ?取150mg(750u1)人血白蛋白加 25.O%乙醇,用10mmol/LTips—HC1溶液加 至50ml,即得含3.Omg/m1人血白蛋白的 5O%乙醇溶液. ?依此分别制得含0.5mg/ml,1.Omg/ ml,2.0mg/ml和2.5mg/m1人血白蛋白的 5O%乙醇溶液 ?按比重法测得相对密度如下: 0934 0.9335 0.933 0.9325 0.932 比重法测得相对密度平均值图例 通过以上数据得到加蛋白后样品的相对 密度与不加蛋白的样品的相对密度的最大偏 差为0.0005.由此可以确定含低浓度蛋白 (3.0mg/ml以下)对样品的相对密度没有影 响. 2.3.3.EPO活性峰接收样品及乙醇含量调 整到50.O%后相对密度的测定 ? 44? 将送检样品与乙醇含量调整后样品测得 的相对密度代人换算表得到的乙醇含量与已 知含量的相对误差最大为0.02%,可以确定 结果准确可靠. 2.3.4比重计与比重瓶的对照实验 根据结果确定可以用比重计代替比重瓶 进行在线操作. 3讨论 3.1重组人红细胞生成素反相纯化峰中含 有10mmol/LTips—HC1溶液及微量的蛋白 (1.Omg/ml一3.0mg/m1)4.1及4.2试验证 明:在此以上条件下对样品相对密度的测定 无显着影响.比重瓶和比重计测定结果偏差 不显着,车间可以用比重计代替比重瓶进行 在线操作.此方法简单,方便,而且对样品不 会造成浪费,是简单可行的操作方法. 平均值 ,? 3.2注意事项 温度对相对密度影响很大,所以操作过 程中要严格控制温度为20?.样品应重复 测定两次.两次结果应一致. 参考文献 [1]血液制品病毒灭活/去除技术指导原则,中国国家药品 监督管理局 [2]中华人民共和国药典,2000年版,附录49—5O 动态浊度法定量测定细菌内毒素含量 沈阳三生制药股份有限公司(110027)赵枢李佳音杨健相阳 摘要应用动态浊度法定量测定细菌内毒素含量,系统适应性符合标 准 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 ,适用 于日常检测. 关键词动态浊度法细菌内毒素 细菌内毒素(Endotoxin)是革兰氏阴性 细菌细胞壁结构中的脂多糖(LIE’S)成分,具 有多种生物活性.1964年Jack.Levin和Fre. derik等人发现细菌内毒素可以迅速引起鲎 血细胞溶解物(鲎试剂)发生凝集反应,从而 导致产生目前最灵敏的细菌内毒素检查法, 即凝胶法?J.该法是一种半定量的限度试 验,存在着主观差异和不能定量的缺点.因 此,在此基础上建立起来的定量检测细菌内 毒素的方法,得到了越来越多的关注和重视. 动态浊度法是其中应用比较广泛的一种定量 检测技术.其实验原理是内毒素与鲎试剂的 C因子系反应,其中被激活的凝固酶切断凝 固原蛋白中特定的精氨肽链,形成凝固蛋白 产生凝胶的浊度变化,采用适当的光学仪器 进行测量的一种分析方法J. 1仪器与材料 1.1仪器 细菌内毒素定量检测仪,天津大学无线 电厂制造,型号:BET一32B;微量移液器(50 , 250u1),上海新汉计量器具技术研究所,型 号:WKY一?;旋涡混合器,天津药典标准仪 器厂,型号:ZH一2 1.2材料 细菌内毒素工作标准品,中国药品生物 制品检定所,2003—10200EU/支;鲎试剂 (TAL),湛江安度新生物有限公司,0205231 1.25ml/支;细菌内毒素检查用水(BET 水),湛江安度新生物有限公司,0311050 5ml/支. 2方法与结果 2.1试验用具的处理:玻璃稀释管,刻度吸 管,反应小试管以及其它玻璃制品首先用酸 性洗液浸泡4hr以上.取出依次用自来水, 纯化水,超纯水反复冲洗10次以上,最后 250?干烤2ht,48ht内使用. 2.2试验过程 2.2.1标准曲线的制备 2.2.1.1细菌内毒素工作标准品用1mlBET 水溶解,置于旋涡混合器充分振荡15min,然 后按10,1,0.1,0.01EU/ml浓度稀释(每稀 释一步抽取细菌内毒素标准品溶液时应振荡 30秒后抽取)作为标准曲线制备的标准溶 液,每一浓度取2管,作为平行管. 2.2.1.2打开细菌内毒素定量检测仪预热, 待仪器稳定后方可进行试验. 2.2.1.3将规定量的BET水加人鲎试剂 中,轻轻摇匀,使其充分溶解,如使用多支鲎 ? 45?