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血清TnI和TnT血清TnI和TnT KKME---专业医学搜索引擎 血清TnI和TnT 概述 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白,由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白C(TnC),它附在收缩的横纹肌细微组织上,TnI是一种结构蛋白,它与肌动蛋白及原肌球蛋白互相作用。TnI与肌动球蛋白在静止状态时相结合,抑制肌动球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有四个能结合钙离子的结合点,当它与细胞内的钙离子结合时,能导致整个肌钙蛋白构造上的变化。肌钙蛋白放松了肌动球蛋白,让肌动球蛋白与肌浆球蛋...

血清TnI和TnT
血清TnI和TnT KKME---专业医学搜索引擎 血清TnI和TnT 概述 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白,由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白C(TnC),它附在收缩的横纹肌细微组织上,TnI是一种结构蛋白,它与肌动蛋白及原肌球蛋白互相作用。TnI与肌动球蛋白在静止状态时相结合,抑制肌动球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有四个能结合钙离子的结合点,当它与细胞内的钙离子结合时,能导致整个肌钙蛋白构造上的变化。肌钙蛋白放松了肌动球蛋白,让肌动球蛋白与肌浆球蛋白互起作用,而造成肌肉收缩。肌钙蛋白具有的3种同分异构体,其中两种同分异构体是骨骼肌所特有的,一种同分异构体是心肌所特有的,这3种肌钙蛋白的同分异构体存在着结构上的差异。心肌中的T和I亚基结构不同于其他肌肉组织,心肌钙蛋白T、I(CTnT、CTnI)由于分子量小,分别为37000D和24000D,所以发病后血中浓度迅速升高,目前已得到抗CTnT和CTnI的特异抗血清,应用免疫层析与酶免技术可进行快速检测与定量测定,具有快速、灵敏、特异等特点。 别名 TnI;TnT 血清肌钙蛋白I(TnI)和肌钙蛋白T(TnT)医学检查 KKME---专业医学搜索引擎 检查名称 血清肌钙蛋白I和肌钙蛋白T 分类 血液生化检查>蛋白质测定 化验取材 血液 原理 (1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:应用免疫层析方法测定样品中的特异抗原(CTnT、CTnI)。测试时滴加血清样品于样品槽,样品通过毛细管效应沿试纸膜运动,如果样品中含有特异抗原,试验部位就出现色带,在对照区域内应该有另一颜色条带作为实验对照。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定:生物素与亲和素作用下的双抗体夹心ELISA,用链霉亲和素-生物素化的抗TnT单克隆抗体作包被物,依次于样品中TnT抗原和酶标TnT单克隆的抗体反应,然后加入底物色原。酶催化底物显色,由系列TnT标准制定的标准曲线,定量测定CTnT含量。 试剂 KKME---专业医学搜索引擎(1)心肌钙蛋白T、I的快速检测:CTnT免疫层析试纸条(德国宝 灵曼公司专利)。 CTnI免疫层析试纸条(进口)。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定: ?生物素-亲和素CTnT单克隆抗体包被板。 ?孵育缓冲液。 ?浓缩洗涤液。 ?酶标结合物。 ?CTnT标准品。 ?底物色原:ABTS(二氨2,2叠氮)。 操作方法 (1)心肌钙蛋白T、I的快速检测: KKME---专业医学搜索引擎 ?将包装纸打开,标记上样品编号。 ?加5,6滴血清样品到样品槽中。 ?在10,15min内观察色带出现情况。 附注: ?试纸条只能用1次,重复使用无效。 ?试纸条试验区和对照区均不出现色带,取另一试纸条重复检测仍无结果,则表示试纸条失效。 ?免疫层析技术测定CTnT、CTnI适合床边快速试验,但只是定性或半定量,要真正了解病情严重程度及选择治疗 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 还需定量测定。 (2)心肌钙蛋白T的ELISA法测定: ?在包被板中分别加入标准血清,对照血清和病人标本于相应的孔内各50μl。 ?每孔各加孵育缓冲液50μl,并轻轻混匀。 KKME---专业医学搜索引擎 ?室温下孵育60min后洗涤三次,10min内完成。在吸水纸上用力拍打微孔。以除去残留水滴。 ?每孔各加入酶结合物100μl,轻轻混匀。 ?倒空微孔板中的孵育液,用洗涤液将微孔洗三次,在吸水纸上用力拍打微孔,以除去残留水滴。 ?将200μl色原底物溶液加入相应的孔中,避光,轻轻混匀,静置30min。 ?用酶标仪在10min内,于405nm和630nm双波长下测定吸光度值(OD值)。 附注: ?CTnT待测标本最好用血清,不要用抗凝血浆,因为抗凝剂如:肝素、EDTA等对CTnT有影响。 ?由于CTnT是心肌细胞损伤释放出来的,所以尽量避免标本溶血,如果标本溶血很可能造成检测结果增高。 KKME---专业医学搜索引擎 ?配制好孵育液不要冷冻保存,应放在2,8?冷藏。 ?实验前应注意试剂有无失效,如变质,其颜色加深。 ?为了提高CTnT检测的可靠性,应注意加样的准确及其他操作过程,比色最好选用双波长。 正常值 干片法:TnI阴性免疫法:TnT0,0.15μg/L。 化验结果意义 升高:心肌缺血损伤,如心肌梗死、急性心绞痛、不稳定型心绞痛、心脏手术后等。心肌损伤后、血中出现TnI、TnT时间最早、持续时间长,因此TnI、TnT是心肌损伤的一个较特异和较灵敏的指标,TnI较TnT更敏感。 (1)急性心肌梗死(AMI),发病后血中浓度很快增高,GTnT、CTnI,3,6h超过参考值上限值,GTnT10,24h达峰值,10,15天恢复正常。CTnI14,20h达峰值,5,7天恢复正常。即出现早,和CK-MB相当或稍早;消失慢,持续时间超过LD1,诊断的窗口期特别长,兼有CK-MB和LD1的优点。灵敏度GTnT为50%,59%(0,6h),CTnI KKME---专业医学搜索引擎 为6%,44%;特异性GTnT为74%,96%,CTnI为93%,99%。据报道GTnT在诊断AMI时比CK-MB更为灵敏,但有报道在肾脏疾病病人血样中发现GTnT,所以特异性较差。GTnT比LD1/LD2比率在诊断AMI中更为灵敏,且在肾病及其他疾病患者血液中未发现CTnI,所以CTnI是心脏受损时唯一的特异性标志物。由于GTnT和CTnI消失慢,所以,可作为心肌梗死后期标志物。 (2)GTnT和CTnI可作为心脏手术中心肌梗死症状出现的指示物,当病人接受动脉搭桥手术时,若GTnT和CTnI含量增加,表明出现心肌梗死,而此时CK-MB含量并无变化。 相关疾病 急性心肌梗死 大头医生
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分类:工学
上传时间:2018-04-04
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