【doc】蒙药紫花高乌头根中新二萜生物碱的分离和鉴定

【doc】蒙药紫花高乌头根中新二萜生物碱的分离和鉴定 蒙药紫花高乌头根中新二萜生物碱的分离 和鉴定 72—7'I) 一 762一药学AmaPlmrmaceutica~nica1999.34(Io):762,766 蒙药紫花高乌头根中新二萜生物碱的分离和鉴定 张树祥,贾世山 ———一,——————一是Zl (内蒙古医学院药学系,呼和浩特o1oo59)^ ?已3每,/ 摘要目的:对蒙药紫花高乌头(Aconitume"mReichb)根的化学成分进行分离鉴定.方法:用硅胶柱色谱 进行分离,经IR,MS,'HNMR,CNMR和DEPT等光谱鉴定化合物的结掏.结果:从紫花高乌头根中得到9个化合 物,经光谱鉴定化合物分别是 deLso|ine(1I),6-demethyldelsodine(II1).denudatine(IV),6-methylmnbrofine(v).8-meth yl- 10一hydIrolycoctoaine(vi),gigactonine(VII),8-methyllyccctonine(Viii).1ycoctonine(IX)和puberaconitine(X).结论: 化合物?I,v.vI和VHI是新二萜生物碱,其余是已知二萜生物碱,这些化合物在本植物中为首次得到. 头属牛扁亚属植物,主产于内蒙古自治区东部地区. 其块根蒙医用于活血化瘀,祛风除湿和消肿止痛,垒 草用于治疗感冒和慢性气管炎….内蒙古自治区 锡盟蒙医研究所用垒草治疗慢性气管炎有效率达 96.89%_21.为了从乌头属牛扁亚属植物中寻找高 效低毒活性成分,作者对其根进行了化学研究.前 文?曾报道了lappaconitine,ranaconitine和 septentriodine3个已知二菇生物碱的分离和结构鉴 定工作.本文继续报道自紫花高乌头根的苯提取物 中分离到的l0个二菇生物碱.经光谱分析和与已 知物比较鉴定了其中9个化合物的结构式.它们分 别是del~line(II),6一demethyldelsoline(III), denudatine(1V),6-methylumbrofine(V),8-methyb 10-hydroxylyc~ctonine(VI),gigacotonine(VII),8一 methyllyc~ctomne(VIII),lycoctonine(IX)和 puberaconitine(X).其中.化合物III,V,VI和VIII 是新化合物,II,IV.VII,1X和x是已知化合物,Ix 含量最高,这些化合物均为从本植物中首次得到. 化合物Ill无色块状结晶.mp202,204?. 由III的EIMS给出的m/z453(60)的M,结合 NMR(包括H,和"CNMR,DEPT谱,见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1)的氢, 碳数推导出III的分子组成为H"N07. "CNMR可以看到8.78.8(t)的C-18亚甲基信号,表 明?是cl9型二菇生物碱.IR中显示有3300cfnI1 收稿阿期:1999.02.14 基金项目:国家自然科学基垒资助项目(3956~87) 联系凡Td:(0471)6912665,Fax:(0471)6955102 8-methyl一10-hydroxylycoctordne .HNMR给出83.35,3.36和 3.加(3x3H,s)3个甲氧基信号,83.70(1H,t.J= 4.6)示14.口H.84.50(1H,s)示6一aH."CNMR给出 24个碳信号,DEPT示有4个甲基,7个亚甲基,9 个次甲基和4个季碳.878.8(t)为l8位亚甲基特 征性信号,859.5(q)应归宿为l8位甲氧基信号J. 质谱上的M丰度为60%,示l位连有羟基';另 外从13CNMR可以看到较大的857.7的C一19信号 时.一般也可以认为l位连有羟基,与已知物 delsoline(?)和gigaconitine(VIII)的el9的8值比 较也很相近.在"CNMR中875,76范围内看不 到氧取代的叔碳信号.但有884.7(d)信号.说明l4 位连有甲氧基而不是羟基;8>90处没有信号,表明 6,7位不连甲氧基,887.9(s)和79.2(s)应分别指定 为羟基取代的C-7和C-8季碳信号,880.6(d)是羟 基取代的C-6信号,此信号与已知物6. demethydelphatine在6,7,8位上有相同排列的羟基 取代结构8值相符【,.所以IIl的结构式为la, 6p,7B,8四羟基,14a,l618一三甲氧基,N一乙基乌 头烷,为新化合物,命名为6-demethyldelsoline. 化合物v无色非结晶性粉末.由v的EIMS 的m/z437(11)的分子离子峰,结合NMR(表1)的 氢,碳数可推导出分子组成为4H39N.在IR 中.3450crftI1为羟基吸收峰.HNMR中81.04 (3H,t,J=7.1)为N一乙基的甲基的信号,83.24, 3.32,3.37和3.40(4×3H,s)示有4个甲氧基,8 3,57(1H,t.J=4.6)为14一/3H,占3.48(1H,s)为6-aH. 在"CNMR和DEPT中,865,鲫间没有出现C.18 的亚甲基信号,也没有C-18甲基信号,表明v为 药学ActaPharmaceuticaSinJca1999.34(10):762,766?763 Cl8型二萜生物碱.836.8(d)信号为C-4信号.进一 步证明了以上的推测"-.由于ElMS的M丰度 较小,C-19的a值为51.2(t).证明1位连有甲氧 基.894.5(d)指定为连有甲氧基的C-6信号.表明7 和8位连有含氧基团,C一15的833.4(t)信号也表明 6位连有甲氧基,这与一般规则相符J.888.7(s) 和77.7(s)应分别指定为连有羟基的C-7和C-8.与 已知类似物umbroline和aeoseptirte的"CNMR数据 相符'.所以,化合物的结构式为78二羟基. 1n.6艮14a,16四甲氧基,4.H.N一乙基乌头烷,为一 新化合物,命名为6一methylumbrofine. 化合翱vI无色非结晶性粉末.由vI的 EIMS给出的Mm/z497和NMR(表1)的氢,碳 数可推导出VI的分子组成为c26}I4,N()B.IR中 3400cm为羟基吸收峰.在HNMR中.81.03 (3H,t,J=7.1)为N一乙基的甲基信号,83.20, 3.34.3.35,3.44,3.45(5×3H,s)为5个甲氧基信 号,84.36(1H.d,J:6.6)示14一pH,84.54(1H+s)示 6-all.CNMR给出868.8(t)信号.示18位连有羟 基,并由此推测vI为C.9二萜生物碱.在"CNMR 中855--59间有5个信号示有5个甲氧基.除MS 中M的丰度较小示l位连有甲氧基外,l9位亚甲 基的851.2信号在较高场也证明了这一点.在 "CNMR的26个碳信号中,最低场的a91.2信号归 宿为甲氧基取代的C-6,889.5和80.5分别为C-7 和C-8羟基取代后的信号,与具相同取代基排列的 已知物acoseptridine比较8值基本相同【,a83.4, 82.6和82.7应分别归宿为连有甲氧基的1.14和 16位碳.在870--80间没有碳信号表明甲氧基不连 有18位,而在868.8处有一信号.表明18位连有 羟基,这与vI的MS中M丰度较小l3和C一19的8 51.2信号得到证实;884.7为羟基取代的C一10 信号,852.0.53.5和40.6分别为11,9和12位碳 信号,10位羟基取代使C.11.9和12向低场位移6 , 8.与文献l7报道的类似物delvestidine基本相同. 所以,化合物vI的结构式为7B.t01a.18一三羟基,l, 6B'8t3,14a.1613一五甲氧基,N.乙基乌头烷.为一新化 合物,命名为8一methyl一10一hydroxylycoctonine. 化合翱VIII非结晶性粉末.由EIMS的m/z 481(8)的分子离子峰,结合NMR(表1)的氢,碳数 可推导出Viii的分子组成为c}I43NO7.IR给出 3400cm的羟基吸收峰.HNMR中,81.04(3H, t.J:7.2)为N.乙基的甲基的信号,83.19,3.31, 3.32.3.42和3.44(5×3H.s)示5个甲氧基,83.50 (1H,t,J:6.6)示14.BH,83.54(1H,s)示6.aH.由 "CNMR和DEPT给出的a68.3(t)信号,示18位 连有羟基,并表明VIII是C】9型二萜生物碱;在855 , 59间有5个甲氧基信号.由VIII的M'丰度较小 和C-19的851.8(t)信号表明1位连有甲氧基.a 90.6(d),88.4(s)和80.5(s)分别归宿为连有甲氧 基,羟基,甲基和甲氧基的6,7和8位,这种排列方 式也使C一15的a值出现在33.4处,与具有相同取 代基排列形式的相似物acoseptridine基本一致]. 故化合物VIH的结构式确定为7口,18一二羟基.1n, 6p,814a.16五甲氧基.N.乙基乌头烷,为新化合 物,命名为8-methyllycoetonine. Fig1StructuresofcompoundsHI,V,VIandVIII 764药学学搬ActaPharmaceuticaSinica1999,34(10)762--766 Tab1CNMRandDEPTdateofcompounds 111.V.VIandVIII(CDCI3) S,d,tandqprefer"toC,CH,CH2andCH3inDEPT respectively 实验部分 熔点用X一4型显微熔点仪测定(未校正).红外 光谱用岛津IR一400型红外光谱仪测定.质谱仪为 VR—zabspec型.核磁共振谱用BrukerAM.500型核 磁共振仪测定.CDC13为溶剂.TMS为内标,硅胶为 青岛海洋化工厂产品,氧化铝为上海五四化学试剂 厂产品.显色剂为改良的碘化铋钾. 原植物由内蒙古自治区兴安盟药检所赵晓峰老 师于1996年8月采集于兴安盟白狼林场.原植物品 种由本院中草药教研室乔俊缠副教授鉴定为毛莨科 乌头属植物紫花高乌头,学名为Aconit"mexcels"m Reichb. 提取分离 紫花高乌头根3.1kg.以5%Na2CO3溶液浸润 后用c6浸渍.回收c6得c6粗提物76g,溶 于适量1%HC1液后用固体Na2Co3调至口H5得 沉淀B部分10.9g,调至pH10时得沉淀c部分 33.8g,碱水用CHC13萃取,回收CHC13得D部分 24.8g.取D部分10g,用碱化硅胶加压柱色谱进 行分离,用一EtOH和c6一MH梯度洗 脱,当c6一EtOH(100:1)洗脱时,得I2mg,1140 mg,用c6H6一EtOH(100:3)洗脱,得Ill25mg,IV 3mg和v10n.当用(=6H6,EtoH(100:4)洗脱 时.得V16mg,Vll16mg,当用--EtOH(100: 5)洗脱时,得VIII27mg;用c6一MH(100:4) 洗脱,得Ix800mg,最后用甲醇洗脱,得x8mg. 结构鉴定 Delsoline(II)无色块状结晶,mp212, 215?.IR(KBr)m:3450,2940,1460,1390. 1210;MSm/z(%):467(M,32).452(M一Me, 100),450(M一OH,60),449(M一o,63).431 (M一OCH3,76).434(M一CH3一H2O.70),418 (M一oCH3一H2O,17);'HNMR(d)cb)占:1.09 (3H,t.J=7.3,N?CH2CH),3.32,3.33,3.35,3.40 (各3H.S,OCH3×4),3.6l(1H.t,J=4.5,14.BH); CNMR(CDCI1):占(1—19):72.6d,27.2t,29.3t, 37.4s,43.9d,90.4d,87.7s.78.5s.44.9d.37.7d, 49.3s,30.5t.43.3d.84.5d,33.4t,82.9d,66.0d, 77.3t,57.2t.5O.3(N—CH2),l3.5(CH3),57.2(6. OCH3).57.7(14一OCH3),56.3(16一OCH3),59.0 (18'-OCH3).以上光谱数据与文献_1报道 delsoline完全一致. 6-Demethyldelsoline(111)无色块状结晶.mp 202,204?.IR(KBr)crn一:3400,3300,2940, 1460.1390,1210,1120,1090;MSm/z(%):453 (M,6O),438(M一C,60).436(M一OH, 100),435(M一H2O,lO).420(M一H2O—CH3, 26).404(M一H2O—OCH3.20);HNMR(CDc1,) a:1.09(3H.t,J=7.2.N—CH2CH3),3.35,3.36. 3.40(各3H,S.OCH3×3),3.70(1H.t,J=4.6,14一 ),3.83(1H,S.6-aH);"CNMR和DEPT见表1. Denudatine(IV)白色针状结晶.mp202, 204?.IR(KBr)crn';3400.3800.1640;MSm/z (%):343(M.1OO),342(M一1.67).328(M一 CH3,24).326(M一oH,80),325(M一H2O,8). 31O(M一H20一CH3,50),231(35);HNMR (CDCI3)a:0,85(3H,S,18一CH3),0.92(3H,t,J= 7.0,N—CH2CH3),4.O1(1H,m,15一H),5.0l,5.04 (各1H.m.C=CH2),11.06,11.5(各1H,br,s. 药学ActaPlmrmaceuticaSinica1999.34(no):762--766 0H).光谱数据与文献t2]报道denudatine相符. 6-Methylumbroline(V】无色非结晶性粉末, mp145,148?.IR(KBr)cm:3450,1460,1390. 1210.1090;MSm/z(%):437(M.1O),422(M CH,,27),420(M0H,6),419(M一O,6). 406(MOCH3.100),404(MH2OCH.27). 388(MHO—OCH3,12);HNMR(CDCI3)8: 1.04(3H.t,J=7.1,N—CH2-CH3),3.24.3.32,3.37, 3.40(各3H,s,OCH3×4).3.57(1H,t,J:4.6,14一 BH).3灌4(1H,s,6-nH);"CNMR和DEPT见表1. 8-Methyl?10-hydroxylycoctonine(VI】无色非 结晶性粉末.IR(KBr)cm,:3400,2960,1460, 1390,1200,1100;MSm/z(%):497(M,3),482 (M一CH3,16),466(M一OCH3,31),450(M一 CH20H—CH,100);'HNMR(CDC13)8:1.03(3H, t,J=7.1,N—CH2一CH3),3.20,3.34,3.35,3.42, 3.44(各3H,s.OCH×5),3.46(1H.t,J=5.1.14— 8H),3.52(1H,s.6-aH);CNMR见表1. Glgaetonlne(VII)无色块状结晶,mp170, 171?.IR(KBr)cm:3490,3300,2960,1460, 1390,1210,1090,1o00;MSm/z(%):453(M, 38),438(M一CH.1o0),436(M一OH,57),422 (MCH2OH,76),421(M一CH3OH,25),404 (M一c0H0H,14);'HNMR(CDCI)8: 1.09(3H,t.J=7.2,N+CH2-CH3),3.40,3.38,3.36 (各3H,s,OCH3×3),3.61(1H.t.J=4.4,14一BH). 4.03(1H,s,6一aH);13CNMR(CDC1)8(C1—19): 72.6d.29.2t,30.5t.38.Is.44.6d,90.5d.87.7s. 78.5s,43.3d,43.9d,49.3s,26.6t,37.6d,84.4d, 33.5t,82.9d,66.0d,66.7t,57.2t,5O.3(N—C), 13.5(CH3),57.7(6'-OCH3),57.7(14'-OCH),56.3 (16'-OCH3).以上数据与文献l】]报道gigactonine 完全一致. 8-Methylycoctonine(VIII)无色非结晶性粉 末.mp120,123?.IR(KBr)cm:3400,2960, 1460,1390,1190.1100;MSm/z(%):481(M. 6),466(M一C,28).449(M一CH3OH,16), 450(MCH2OH,100),334(MCH3OH—CH3, 46);HNMR(CDCI~)8:1.叭(3H.t.J=7.0,N— CH2CH3),3.19,3.31,3.32,3.41.3.42(各3H,s, OCH,×5),3.50(1H,t.J=6.3,14-8H),3.54(1H. s,6-nH);"CNMR和DEPT见表1 Lyeoetonine{IX)白色针晶,mp90,93?. IR(KBr)cm:3400,2960,1460,138{),121O,1090; MSm/z(%):467(M,l1),452(M一CH,39). 436(MOCH3,1o0),434(M一C—H20,24), 418(M一H2O—OCH3,7),404(M一CHOH— OCH3.8);HNMR(CDC1)8:1.03(3H.t,J=7.1, N—cH2CH).3.23.3.32,3.40,3.43(各3H.s,OCH3 ×4),3.59(1H,t,J=4.6.14一BH),3.83(1H,s.6一 aH);13CNMR(CDCI3)8(C1—19):84.3d.26.1t. 31.6t,38.5s,43.2d,90.6d.88.4s,77.5s.49.9d, 38.0d,48.8s,28.7t,46.1d,83.9d,33.6t,82.6d, 64馏d,67.7t,52.6t,51.1(N.CH2).14.1(CH), 55灌(1一OCH3).57.8(6'-OCH,),57.9(14'-OCH), 56.2(16'-OCH).以上光谱数据与文献报道 lycoctonine一致. Puberaconitine(x)白色结晶性粉末,mp178 , 181?.IR(KBr)ern,:3450,3300.3050,1700, 1680,1610.1580,780.700;MSrn/z(%):668(M 0,2).653(M一H2O—CH,,13),555(M一 131,17),467(6),452(38).436(1o0),202(27); 'HNMR(CDCI3)8:1.叭(3H,t.J=7.2,N— CH2CH3).2.8(4H,dd—C,-CH2-C—OH),3.26,3.34. 3.36,3.40(各3H,s,OCH×4),3.60(1H,t,J: 6.3,14一H),3.91(1H.s,6一qH);CNMR(CDC1)8 (C1—19):83.9,23.1,32.5,37.6.43.3.90.8.88.5. 77.5,50.4,37.8,49.0.28.6,46.0,83.9.33.7. 82.4,64.5.69.8,52.4,51.0(N—CH2),14.0(CH3), 55灌(1一OCH3),57.9(6'-OCH,),58.1(14'-OCH3), 56.3(16一OCH),168(Ar-C-O),ll4.8(Ar一1), 141.5(Ar一2),120.7(Ar一3),134.8(Ar.4),122.6 (Ar-5),130.3(Ar一61),171.2(一NH—C一),29.9 (一CH2.),33.1(一cH2一),168(C-OH).以上光谱数 据与文献1]0报道puberaconitine完全一致. 致谢中国医学科学院药物研究所代测核磁共振谱,军 事医学科学院仪器测试中心代测质谱,本院药学系代测红外 光谱,内蒙古自治区兴安盟药捡所赵晓峰老师采集药材. Referenees 1ThestatepMrmaceutica[adminkstrationofChina,ed. 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KEYWORDSAconitumexcelsumReichb;diterpenoidalkaloids;6-demethyldelsoline;6 一 methylumbrofine;8-methyl一10—-hydmxyllycoctonice;8-methyllycoctonine