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定量分析的内标法与外标法.doc

定量分析的内标法与外标法

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2017-09-21 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《定量分析的内标法与外标法doc》,可适用于综合领域

定量分析的内标法与外标法色谱法不仅是一种分离方法而且通过被分离组分分别进入检测器能精确测的各组分在样品中的含量。定性分析:通常用与标准样比较保留时间进行定性即保留时间相同可能是同样的组分保留时间不同肯定不是同样的组分。定量分析是在定性分析的基础上需要纯物质作为标准样品。液相色谱的定量是相对的定量方法即:由已知的标准样品推算出被测样品的量。液相色谱法定量的依据:被测组分的量(W)与响应值(A)(峰高或峰面积)成正比,W=f×A。定量校正因子(f):是定量计算公式的比例常数其物理意义时单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量。由已知标准样品的量和其响应值可以求得定量校正因子。测定未知组分的响应值通过定量校正因子即可求得该组分的量。样品(sample)含有带测物供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。标样(standard)浓度已知的纯品。未知样(unknow)浓度待测的混合物。样品量(sampleweight)待测样品的原始称样量。稀释度(dilution)未知样的稀释倍数。组分(componance)欲做定量分析的色谱峰即含量未知的被测物。组分的量(amount)被测物质的含量(或浓度)。积分(integerity)由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。校正曲线(calibrationcurve)组分含量对响应值的线性曲线由已知量的标准物建立用于测定待测物的未知含量。常用的定量方法标准曲线法分为外标法和内标法。外标法在液相色谱中用的最多。内标法准确但是麻烦在标准方法中用的最多。用被测化合物的纯品作为标准样品配制成一系列的已知浓度的标样。注入色谱柱的到其响应值(峰面积)。在一定范围内标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系即W=f×A制成标准曲线。在完全相同的实验条件下注入未知样品得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f即可求出欲测组分的浓度。外标法的优点:操作、计算简单是一种常用的定量方法。无需各组分都被检出、洗脱。需要标样。标样及未知样品的测定条件要一致。进样体积要准确。外标法缺点:实验条件要求高如检测器的灵敏度流速、流动相组成的不能发生变化每次进样体积要有好的重复性。操作:将已知量的内标样加入标准样品制成混合标样并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。注入色谱柱以(标样峰面积内标样峰面积)为响应值。根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系即W=f×A制成标准曲线。将已知量的内标样加入未知样品注入色谱柱得到欲测组分的响应值。根据已知的系数f即可求出欲测组分的浓度。。内标法的特点:操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定上样体积的变化不会影响影响定量结果。内标法抵消了上样体积乃至流动相、检测器的影响因此比外标法精确。

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