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脑脊液标本的细菌学检验操作规程

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脑脊液标本的细菌学检验操作规程单位及实验室名称项目汉源县人民医院检验科脑脊液标本的细菌学检验操作 编号:LAB/SOP/HY/微-007 日期:2010年5月3日 版本:第一版,第0次修订 第1页,共3页 一、【标本采集】 脑脊液的采集由临床医师以无菌操作腰穿采取脑脊液3-5ml,置于无菌试管内立即送检。如做厌氧菌培养,则需将注射器针头封口,立即送检。 二、【检验方法】 1、一般细菌的培养 (1)一般细菌培养主要适用于脑脊液内的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和大肠杆菌等的分离培养。 (2)用无菌接种环挑取混浊脑...

脑脊液标本的细菌学检验操作规程
单位及实验室名称项目汉源县人民医院检验科脑脊液标本的细菌学检验操作 编号:LAB/SOP/HY/微-007 日期:2010年5月3日 版本:第一版,第0次修订 第1页,共3页 一、【标本采集】 脑脊液的采集由临床医师以无菌操作腰穿采取脑脊液3-5ml,置于无菌试管内立即送检。如做厌氧菌培养,则需将注射器针头封口,立即送检。 二、【检验方法】 1、一般细菌的培养 (1)一般细菌培养主要适用于脑脊液内的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和大肠杆菌等的分离培养。 (2)用无菌接种环挑取混浊脑脊液或经离心的沉渣,非别接种于血平板和普通肉汤培养基。经35℃培养,观察有无细菌生长。若有细菌生长,挑取可疑菌落,并涂片染色镜检。根据菌落特征、细菌形态、染色特点得出初步印象,再进一步鉴定,然后做出报告。若血平板无细菌生长,肉汤有细菌生长,则移种于血平板分离培养,按上述方法鉴定。如血平板、肉汤均无细菌生长,再延长培养数天,仍无细菌生长时,即可报告:“经培养×天无细菌生长。” 2.脑膜炎奈瑟菌的培养 以无菌方法取脑脊液,经3000r/min,离心30min,取沉淀物立即接种于事先预温的巧克力或血平板上,置于5%-10%CO2环境中,经35℃ 1 培养18-24小时后,观察结果。若发现平板上有光滑、湿润、透明、边缘整齐、粘性的中等大小的菌落,经革兰染色为阴性双球菌者,可做出初步报告:“有脑膜炎奈瑟菌生长”。经纯培养后做糖发酵、氧化酶试验、自凝试验、血清玻片凝集试验、乳胶凝集以做出最后的鉴定。 3.新型隐球菌的培养 以无菌方法采取脑脊液标本,经离心沉淀后,取其沉淀物接种于沙保弱氏斜面或血平板培养基上,分别置于37℃及25℃培养。数日后可见有白色或淡褐色酵母样的菌落(如培养较久、菌落则变为湿润、粘液状),如果此时菌落用墨汁染色法染色镜检,可见有出牙的细胞及短芽管(培养时间过长则芽管可消失,荚膜形成)。杆菌菌落及染色镜检特征,可做出初步报告:“真菌培养有新型隐球菌生长。”必要时再做生化反应及动物试验等进一步鉴定。 三、【检验程序】 脑脊液 ↓↓↓离心涂片染色分离培养结核杆菌检查镜检—————————————— ↓↓↓↓ 厌氧环境培养普通及5%-10%CO2培养罗氏培养基培养取沉淀物 涂片抗酸染色↓↓35℃18-24h↓35℃3-4W ———————————————— ↓ 菌落观察 ↓↓↓生化反应→血清学检查←自动化鉴定 ↓ 药敏试验 ↓ 报告结果 作者:肖德慧 时间:2010-5-3
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分类:医药卫生
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