【doc】 女性生殖道鳞状上皮病变的HPV原位杂交检测

【doc】 女性生殖道鳞状上皮病变的HPV原位杂交检测 女性生殖道鳞状上皮病变的HPV原位杂交 检测 诊断病理学杂志2005年8月第l2卷第4期?289? 女性生殖道鳞状上皮病变的HPV原位杂交检测 郭东辉,庞淑洁 (天津市中心妇产科医院病理科,天津300052) [摘要】目的观察女性生殖道鳞状上皮病变的HPV表达与意义.方法应用原位杂交技术对186例女性生殖 遭鳞状上皮病变组织进行HPV6/11,HPV16/18和HP~31/33定型检测.结果尖锐湿疣HP~6/11的阳性表达占 96.4%,官颈上皮内瘤变l级(CIN1)中HPV6/1l与HPV16/18阳性表达分别为47.6%和50%,HPV检测多项阳性病 例占l7.1%.结论CIN1中存在高危型HPV感染病例,混合性HPV感染在CIN中不少见. [关键词】鳞状上皮病变;HPV;原位杂交 [中圈分类号】R737.3[文献标识码】A[文章编号】1007—8096(2005)04—0289一o3 DetectionofHPVbyinsituhybridizationinsquamouscelllesionsoffemalege nitaltract GUODono-hui,PANGShu-jie. (DepartmentofPathology,TianjinCentralObstetricsandGynecologyHospital,Tkmjin30052,China) Abstract:ObjectiveToob~l’VeHPVexpressionanditssignificanceinsquamouscelllesionsoffemalegenitaltract.Meth- edsHPV6/11,HPV16/18andHPV31/33weredetectedbyinsituhybridizationtechniquesin186casesofsquaInouscellle— sionsoffemalegenitaltract.ResultsThepositiveexpressionoftheHPV6/11inthecondylomaWa$96.4%.OftheCIN1. 47.6%werepositiveforHPV6/11and50%werepositiveforHPV16/18respectively.TwoormoretypesofHPVwerefoundin 17.1%ofthecases.ConclusionSomecaseswitllhigh?riskHPVinfectionexistinCIN1.andcasesofHPVinfectionswitll nlorethanonetypeisnotrare. Keywords:Sq~ouscelllesions;HPv:Insituhybridization 女性下生殖道鳞状上皮病变与癌近年显着增 多,研究表明与人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,但 高,低危HPV感染有时与组织形态并不平行,仅凭 光镜形态难以进行判断,理想的诊断方式应是临床 表现+组织形态+HPV病原学检测.目前应用的 HPV原位杂交技术尽管在敏感性方面逊于杂交捕 获二代,因兼具保留组织结构和假阳性低的优势,仍 是协助了解与诊断宫颈鳞状上皮病变的重要方法. 我们采用原位杂交技术对女性宫颈,外阴性阴道的 鳞状上皮病变进行HPV检测,观察其在不同鳞状上 皮病变中的表达. l材料与方法 1.1材料186例鳞状上皮病变组织来自天津市中心妇产 科医院活检病理标本,其中138例为宫颈组织,48例为外阴 与阴道组织,均为鳞状上皮增生性病变,复查切片,根据 WHO(2003) 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 诊断尖锐湿疣,各级宫颈上皮内瘤变(CIN), 官颈与外阴鳞状上皮原位癌(C/VIN)以及鳞状上皮癌;宫颈 扁平湿疣列入CIN1级,仅有鳞状上皮乳头状瘤样改变,未见 明显HPV感染表现亦不伴细胞异型者归为鳞状上皮乳头状 瘤样增生. 1.2方法常规石蜡切片,进行原位分子杂交HPV6/11, HPV16/18与HPV31/33的定型检测.8l例(43.1%)进行单项 HPV检测;105例(56.5%)进行多项HPV检测,包括101例进 行2项HPV检测,4例进行3项HPV检测.各型HPVDNA 探针与检测试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司提 供的荷兰PanPath公司产品,以病变组织细胞核出现蓝紫色 沉积为阳性表达. 1.3统计学处理四格表X2检验. 2结果 186例宫颈,外阴与阴道鳞状上皮病变的分子 原位杂交HPV检测结果显示,宫颈与外阴慢性炎症 的HPV检测绝大多数为(一);几乎所有的尖锐湿疣 HPV6/11(+)(图1),个别病例HPV16/18(+);CIN1 组中HPV6/11与HPV16/18阳性比例相近,差异不显 着(:0.024,P>0.05)(图2),检测结果见表1. CIN2中较多病例表达HPV16/18(图3),亦有较 大比例HPV6/11或31/33检测(+);其中HPV6/11 (+)的4例中有2例合并HPV16/18(+),2例未进 ? 290?JDiagPatho1.August2005,Vo1.12,N0.4 行HPV16/18检测.该组病例HPV16/18的表达显着 高于HPV6/11(=9.2,P<0.05),HPV16/18与 HPV31/33的表达差异不显着(=3.198,P> 0.05). 近半数CIN3与CVS病例表达HPV16/18或 31/33,两者表达比例十分接近(=0.116,P> 0.05).在11例HPV31/33阳性病例中9例同时表 达HPV16/18(图4),仅2例HPV16/18阴性.共18例 出现多项I-IPV检测阳性,占进行多项HP~检测病例 的17.1%(表2). 裹1女性生殖道鳞状上皮病变分子原位杂交I-IPV检测结果 分组阳性表达 “—面——面— 鳞状上皮乳头状瘤l2 样增生 慢性官颈炎35 尖锐湿疣56 CINl29 CIN2l8 CIN322 C/VIS7 官颈鳞癌7 合计186 0/5(0)0/1(O.O) 1/30(3.3)o/1o(o.O) 3/15(20.O).0/1(O.O) 11/22(50.O)0/4(0.O) 11/16(68.8)2/7(28.6) 11/21(52.4)6/14(42.9) 3/7(42.9).3/6(50.O) 2/7(28.3%)0/4(0.O) 42/123(34.1)11/47(23.4) a.2例合并HPV6/I1(+);b.4例合并HPV6/I1(+);c.2例合并 HPV6/I1(+),2例合并HPV31/33(+);d.5例合并HPV31/33(+),1 例合并HPV6/I1(+);e.2例合并HPV31/33(+). 裹2女性生殖道鳞状上皮病变分子原位杂交 HPV检测的多项表达 分组N 3讨论 3.1HPV的组织学检测在女性下生殖道鳞状上 皮增生性病变的诊断,治疗及愈后预测中有重要价 值.免疫组化HPV定型抗体尽管价廉,但因其稳定 性与敏感性不理想难以应用.原位杂交技术运用 HPVDNA核苷酸探针与病变组织杂交,并根据免疫 组化原理进行标记,在保留组织学形态的同时,能够 定位观察到病变组织细胞的HPV表达,假阳性率 低,提高了HPV检测的敏感性与特异性. 3.2CIN1与HPV感染的对应性问题以往认为 CIN1主要为HPV6/11感染,近年研究表明CIN1为 异源性….本组资料CINI中的HPV16/18阳性病例 占50%,与该组HPV6/11阳性表达无显着性差异. 尽管有关CIN1中的HPV16/18感染率文献报道各 异,但CIN1中确实存在高危型HPV感染病例, 在本组资料与近年国内外研究中均得以证实.CIN1 在原位杂交中出现的低危,高危或高,低危HPV共 同表达现象,与其组织学存在扁平湿疣与经典轻度 非典型增生的多种形态有关联,且不同类型HPV感 染在CIN1的组织形态上有重叠,甚至其中可能包括 一 些实为反应性增生的病例H.提示对CIN病变的 研究还有待深入,考虑CIN1的HPV感染类型时应 结合HPV检测,不应将CIN1笼统视为低危HPV感 染病例. 3.3混合性HPV感染在C病变中的存在本组 C1N1,CIN3中同时出现HPV6/11与HPV16/18检测 阳性的比率在16.7%,28.6%,表明HPV高,低危 病毒的混合性感染在CIN病变中较为常见,此点与 近年国外学者观察相同….与CIN1为异源性病变 不同,尽管本组约1/5的CIN2和CIN3表现HPV6/11 和HPV16/18同时阳性,但无单独HPV6/11阳性病 例,表明高危病毒仍是导致高级别CIN病变的主要 原因.本组资料CIN2和CIN3中HPV16/18合并 HPV31/33检测阳性的比率在25%,35.7%,它们的 共同感染可能对CIN病变的发生与发展起到相辅与 相加的作用. 我们运用原位杂交技术,显示女性下生殖道湿 疣性病变的HPV6/11表达为96.4%;各级CIN的 HPV16/18表达在42.9%,68.8%,HPV31/33的表达 为0,50%,结果与Plaza等报道在低,高度鳞状上 皮内病变和宫颈癌的HPVDNA检出率分别为 95%,7O%和4JD%,5O%基本一致.宫颈癌HPV的 表达下降,与此时病毒复制减少有关,更敏感的检测 方法能够在大多数宫颈癌中显示HPVDNA的存 在. 本组2例鳞状上皮乳头瘤样增生HPV6/11检测 阳性,1例慢性宫颈炎HPV16/18检测阳性,可能属 组织学表现不典型或早期HPV感染病例,提示HPV 原位杂交检测在协助认识鳞状上皮增生性病变,并 对患者治疗 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 的选择与随诊中有重要价值,对组 ;)5 )464)-. n?0 ??,j ? 诊断病理学杂志2005年8月第l2卷第4期?291? 织形态与HPV检测结果不一致的病例需结合临床 与病理资料进行正确解释. (本文图1,4见插页第73页) 参考文献: [1]TavasaollFA,DevileeP.Turnoutsofthebreastandfemalegenitalor? 269. gans[J].Lyon,2003:262— [2]HopmanAH,SmedtsF,Dig~efW,et.Transitionofhigh?gradecer? vicalintmepithefialneoplasiatomlcro-invasivecarcinomaischarac? terizedbyintegrationofHPV16/18andnumericalchromosomeabnor- realities[J].JPathol,2004,202(1):23—33. [3]罗灰,李挺,彭莉云,等.人乳头瘤病毒感染与宫颈癌前病变的 小肠海绵状淋巴管瘤1例 关系[J].中华病理学杂志,1999,28(4):248—251. [4]KumanRJ.Blaustein’spathologyofthefemalegenitaltract[M]. Heidlberg:SpnngVerlag,2002.280. [5]PlazaJA,RamirezNC,NuovoG.UtilityofHPVanalysisforevalu? ationofpossiblemetastaticdiseaseinwomenwithcervicalcancer[J]. IntJGynecolPathol,2004,23(1):7—12. 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I{PVl”lK?l.-’圉4 — 73 图2 ::. . . .,. —一, _ 0?. 薯.J_ ? 》.蠢薹I长CLN1A:HE.B??PVI6/18(+1辱位求童 A.HEBHPVIr)厚他带:C .’|=...J.. .尊..?.0’0 . . ,?