[doc格式] 卡氏肺孢子虫在大鼠肺外组织器官播散性的研究

[doc 格式 pdf格式笔记格式下载页码格式下载公文格式下载简报格式下载 ] 卡氏肺孢子虫在大鼠肺外组织器官播散性的研究 卡氏肺孢子虫在大鼠肺外组织器官播散性 的研究 76O中国人兽共患病 ChineseJournalofZoonoses2008,24(8) 文章编号:1002—2694(2008)08—0760—02 卡氏肺孢子虫在大鼠肺外组织器官播散性的研究* 卢致民,尚金星.,邢洁.,唐红炜 摘要:目的研究卡氏肺孢子虫在大鼠肺外组织器官(肾,肝,脾,骨髓)的播散性.方法地塞米松肌肉注射Wistar大 鼠,诱导建立PCP大鼠模型.模型诱导lOw后,剖杀大鼠.取其肺,肾,肝,脾和骨髓.分别怍各组织印片和切片.光学显微镜 下对各组织印片和切片进行病原学和病理学观察.同时设空白对照组.结果PCP组大鼠肺,肾,肝,脾,骨髓印片卡氏肺孢 子虫包囊阳性率分别为100(25/25),4%(]/25)(与对照组比较差异无显着性,P>O.05),0(0/25),0%(0/25),0(oi 25);对照组大鼠各组织印片中均未查到肺孢子虫包囊.PCP组大鼠肺组织病理改变明显,表现为典型间质性肺炎,肺外组织 器官(肾,肝,脾,骨髓)均无明显病理改变,与对照组比较,无明显区别.结论肺孢子虫肺炎大鼠肺外组织器官(肾,肝,脾, 骨髓)没有 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 到卡氏肺孢子虫病原体.也没有出现病理改变.提示肺 孢子虫肺炎大鼠一般不会出现肺外组织器官(肾,肝, 脾,骨髓)播散. 关键词:卡氏肺孢子虫;大鼠;肺;肾;肝;脾;骨髓 中国分类号:R382文献标识码:A DisseminationofPneumocystiscariniiintheextrapulmonarytissuesandorgansofrats LUZhi—min.SHANGJin—xing,XINGJie,TANGHong—wei (DepartmentofParasitology,HebeiNorthUniversity,Zhangjiakou075000.China) ABSTRACT:ToclarifywhetherthedisseminationofPneumocystiscarinii(PCP)occursintheextrapulmonarytissuesand organs(kidney.liver,spleenandbonemarrow).thePCPratmodelwasestablishedbyintramuscularinjectionsoftheWistarrats withdexamethasonefor10weeks.andtheetiologicalandpathologicalexaminationswereperformedonthetissuesectionstaken fromvariousorgansofthePCPratandthenormalratsweretakenascontrols.ItwasfoundthatthepositiveratesofPCPcysts insmearsoflungs,kindney.liver,spleenandbonemarrowofPCPratwere100%(25/25).4(1/25),0%(0/25),0%(0/25). O(0/25)respectinely.NoPCPcystcouldbedemonstratedinsmearstakenfromnormalrats.However.thereweremarked pathologicalchangesinsmearsoflungstakenfromPCPrats.characterizedwi thtypicalinterstitialpneumonia.butnopathologi_ calchangescouldbedetectedintheextrapulmonaryorganswithoutanydiffer encewiththenormalcontrols.Theseresultssug— gestthatnoextrapulmonarydisseminationexistsinPneumocystiscariniirat mode1. KEYWORDS:Pneumocystiscarinii;rat;lung;kidney;liver~spleen;marro w 肺孢子虫(Pneumocystiscarinii,Pc)是一种机 会性致病病原体,在宿主免疫功能低下时可引起严 重的肺孢子虫肺炎(Pneumocystiscariniipneumo— nia,PCP),是艾滋病(AIDS)等各类先天或后天免疫 机能低下患者常见的并发症和主要死亡原因,近年 来在医学界受到高度重视.随着人们对本病的重 视,国内外学者采用动物模型对其做了大量的研究, 但有关肺孢子虫在肺外组织器官播散性方面的研究 尚未见报道.为此,我们以Wistar大鼠为实验对象 建立PCP大鼠模型,对PCP大鼠肺外组织器官 (肾,肝,脾,骨髓)肺孢子虫播散情况进行了研究,现 将结果报告如下. 1材料与方法 1.1实验动物与分组正常雌性Wistar大鼠4O只.清洁 级,体重176~250g,购买于北京中科院遗传与发育生物研 究所动物中心.4O只大鼠随机分为2组,A组25只,为 PCP模型组.B组l5只,为空白对照组. 1.2药物地塞米松磷酸钠注射液为天津药业集团新郑股 份有限公司生产,批号为040712.四环素为张家口市云峰 制药厂生产,批号040113. 1.3PCP大鼠模型建立A组大鼠按文献报告方法建立 PCP模型0,即大鼠后腿肌肉注射地塞米松磷酸钠lmg/只 ? 次.每周两次,同时饮水中加入lg/L四环素,预防继发性 细菌感染,普通颗粒饲料喂养.饮水量不加限制,至模型诱导 *基金项目:河北省医学研究重点项目(No.07339)和河北北方学 院(No.2007029)联合资助 作者单位1.河北北方学院医学技术学院寄生虫学教研室,张家口 075000I 2河北北方学院临床医学系O5级4班,张家口075000 中国人兽共患病 ChineseJourna[ofZoonoses76l 成功.B组大鼠后腿肌肉注射等量灭菌生理盐水,饮用白开 水,其他条件同A组. 1.4大鼠肺及以外组织器官(肾脏,肝脏,脾脏和骨髓)肺孢 子虫包囊感染观察模型诱导10w后.2组大鼠腹腔注射 40mg/kg戊巴比妥钠麻醉,无菌条件下打开胸腔,腹腔,分别 取其肺脏,肾脏,肝脏,脾脏和髂骨,将各组织器官作上下横 断,分别以两个横断面在不同载玻片上印1cm左右印片,共2 张.印片空气中干燥,甲醇固定,姬姆萨染色,油镜下观察. 1.5大鼠肺及以外组织器官(肾脏,肝脏,脾脏)病理学观察 取每只大鼠肺,肾,肝,脾组织少许.1O甲醛溶液固定,常 规酒精梯度脱水,二甲苯透明.石蜡包埋后连续切片,HE染 色后光镜下观察各组织病理变化. 2结果 2.12组大鼠肺及以外组织器官(肾脏,肝脏,脾脏 和骨髓)肺孢子虫包囊观察结果A,B2组大鼠肺, 肾,肝,脾,骨髓卡氏肺孢子虫包囊镜检结果见表l. 由表l可见,A组25只大鼠肺组织印片均检测到卡 氏肺孢子虫包囊,阳性率为100%;1只大鼠肾组织 印片查到卡氏肺孢子虫包囊,阳性率4%,肝,脾,骨 髓均未查到卡氏肺孢子虫包囊.B组大鼠肺,肾, 肝,脾,骨髓内均未察到卡氏肺孢子虫包囊.A组 大鼠肾脏卡氏肺孢子虫包囊阳性率与对照组比较差 异无显着性(P>0.05). 表1A,B2组大鼠肺,肾,肝,脾和骨髓卡氏肺孢子虫包囊 阳性率[%l阳性数/检查数)]镜检结果 Table1MicroscopicresultsofPneumocystiscariniicystin smea~oflung.kidney.liver.spleen.marrowofB groupAandgroupB A100(25/25)(1/25)0(0/25)0(0/25)0(0/25) B0(0/15)o(o/15)o(0/15)o(o/15)o(o/15) 注:与B组比较.*P<O.05 Note:ComparedwithB.*P<O.05 2.22组大鼠肺及以外组织器官(肾脏,肝脏,脾 脏)病理学观察结果A组大鼠肺组织病理改变明 显,即肺泡腔变小,肺泡上皮增生,间隔增宽,间质内 有以淋巴细胞,嗜酸性粒细胞为主的细胞浸润,部分 肺泡腔内充满淡红色泡沫样渗出物;肾脏(包括肺孢 子虫包囊阳性大鼠1只),肝脏,脾脏均无明显病理 改变,与B组比较,无明显区别. 3讨论 肺孢子虫通常寄生于人和其他哺乳动物的肺组 织内,在I型肺泡上皮细胞表面粘附与增殖,造成炎 症反应,从而引起肺孢子虫肺炎,.但也有文献报 道可出现肺外感染,如可出现于淋巴结,脾,肝,肾上 腺,甲状腺以及泌尿生殖道等..Reddy等?曾利 用PCR检测大鼠PCP发生过程中肺及以外组织器 官肺孢子虫感染情况,结果在使用激素2w后,其骨 髓出现肺孢子虫DNA,3w后肝脏出现肺孢子虫 DNA,直至5w肺组织才出现肺孢子虫DNA,虽然 肺组织中出现得晚,但是肺孢子虫在肺组织中繁殖 速度比其他组织快得多,提示肺组织是肺孢子虫适 宜的寄生部位.Rabodonirina和Furuta?等观察 到在PCP发生过程中,许多肺外组织都能检出肺孢 子虫DNA,但是多不引起肺外组织的病理学改变, 故而认为这是PCP发生的自然过程.本实验以 Wistar大鼠为实验对象建立PCP大鼠模型,对PCP 大鼠肺及以外组织器官(肾,肝,脾,骨髓)肺孢子虫 感染情况进行了观察,结果25只大鼠诱导lOw后 肺组织印片中均查到肺孢子虫包囊, 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 PCP大鼠 模型全部诱导成功,从而为本实验研究提供了较好 的动物模型.25只PCP大鼠除1只肾脏检测到肺 孢子虫包囊外,其他均未检测到肺孢子虫包囊,也无 明显的病理改变,分析其原因可能与以下因素有关, Reddy等利用PCR检测各组织器官肺孢子虫 DNA,具有高度的敏感性,组织内含很少量虫体便 可检出,而本实验采用古老的病原学检测方法,灵敏 性较低,当组织内感染虫体数量较少时,不容易检 出.从检测时间上,Reddy等在PCP模型诱发过程 中检测到肺孢子虫DNA,而本实验是在PCP模型 诱发成功后检测肺孢子虫包囊,这种检测时间的不 同是否是检测结果不同的原因,值得进一步研究. 从肺孢子虫对肺外组织器官易感性上分析,本实验 结果支持Rabodonirina和Furuta的观点,认为肺孢 子虫对肺外组织器官的易感性很低,一般不发生肺 外组织器官感染,即使在PCP发生过程中有肺外组 织播散,一般也不会引起病理改变. 参考文献: C13佟小莺,纪伟华.吴增强,等.卡氏肺孢子虫肺炎动物模型的实验 研究[J].中国寄生虫病防治杂志,1997,10(3):201—203. C23李雍龙.人体寄生虫学[M3.6版.北京:人民卫生出版社, 2004:84. C33颜苹苹,严延生.PCR在卡氏肺孢子虫感染的临床和流行病学研 究中的应用CJ3.中国人兽共患病杂志,2000,16(5):94—98. E43ReddyLVtZammitC.ProliferationpatternsoflatentPneumo— cystiscariniiinratorgansduringprogressivestagesofimmuno— suppression[J].JProtozool,1991,38(6):43—47. (53RabodonirinaM,WilmotteR,DannaouiE,eta1.Detectionof PneumocystiscariniiDNAbyPCRamplificationinvariousrat organsinexperimentalpneumocystosis[J].JMedMicrobiol 1997.46(8)t665—668. E63FurutaT,FujitaM,MukaiR,eta1.Severepulmonarypneumo— cystosisinsimianacquiredjmmunodefjcjencysyndromeinduced bysimianimmunodeficicncyvirus:itscharacterizationbythepol— ynlerase’chain—?reactionmethodandfailureofexperimentaltrans—? missiontoimmunodeficientanimalsCJ3.ParasitolRest1993,79 (8):624—628. 收稿日期:2008—02—16:修回日期:2008—02—27