交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺轴相关的细胞因子的影响探讨
交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺轴相关的细胞因子的影响探讨
【关键词】交泰丸/药理学;失眠/中药疗法;细胞因子/血液;疾病模型,动物;大鼠 交泰丸,出自明代《韩氏医通》,由黄连、肉桂两味药物以特殊的配伍比例(质量比为10?1)组成,具有交通心肾、安神之功效,主要用于治疗心肾不交引起的惊悸、夜寐不安等症,临床疗效确切,1-2,。本研究观察了交泰丸对与下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴相关的细胞因子的影响。
1材料与方法
1.1药物黄连和肉桂均购自广州中医药大学第一附属医院,经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定为正品;对氯苯丙胺酸(PCPA)为美国Sigma公司产品。
1.2动物健康清洁级雄性SD大鼠50只,体质量180,200g,从广东省医学实验动物中心购进,合格证号:
2017A015。每只大鼠均在相同条件下自由饮水,摄食,保持自然光照。
1.3试剂白细胞介素 1(IL 1)试剂盒(批号:
24985001)为B,M公司产品;肿瘤坏死因子 α(TNF α)试剂盒(批号:
20171120)为晶美公司产品。
1.4主要仪器CR22G高速冷冻离心机(日本日立);RT 2100C酶标分析仪(广州览众医疗设备有限公司);GSX 500 BS ?型隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂);AUW120D型分析天平(日本岛津);各种规格移液枪(广州实技科学仪器有限公司)。
1.5分组按照随机原则,利用随机数字表法将大鼠分为5组:
正常对照组、模型组、泻心组(单用黄连15g)、补肾组(单用肉桂
1.5g)、交通心肾组(黄连、肉桂质量比为15g?
1.5g),每组10只。
1.6造模,3,除正常对照组外,其他各组均一次性腹腔注射PCPA300mg/kg,30h后观察大鼠行为,复制大鼠完全失眠模型。
1.7给药造模成功后,正常对照组与模型组分别用生理盐水灌胃(2.5g?kg-1?d-1),其他各组以不同比例配伍的药液分别灌胃(2.5g?kg-1?d-1),每天1次,连续7d。
1.8样品采集与处理实验各组最后一次给药24h后,用100g/L水合氯醛腹腔注射(2.3mL/kg)麻醉后,腹腔静脉取血3mL,静置1h,4?过夜,1500r/min离心30min,取上清液,大鼠血清中IL
1、TNF α含量采用酶联免疫吸附(ELISA)法
检测
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,均严格按照试剂盒操作。
1.9统计学方法采用SPSS11.0统计软件进行统计分析。
2结果 2.1一般情况大鼠在PCPA腹腔注射30h后出现烦躁不安,白天也活动不停,不能正常睡眠,昼夜节律基本被破坏,出现完全失眠状态,说明失眠模型复制成功。各用药组连续给药7d后,模型组大鼠失眠状态无明显改善,泻心组大鼠失眠有一定好转,补肾组大鼠失眠有加重的趋势,交通心肾组大鼠失眠明显减轻。
2.2各组大鼠血清IL
1、TNF α含量比较表1结果显示,模型组IL
1、TNF α水平显着性降低(P,0.05或P,0.01);交通心肾组IL
1、TNF α水平显着性升高(P,0.05);泻心组IL
1、TNF α水平有一定程度升高,补肾组以上2指标水平低于模型组,但与模型组比较均无显着性差异(P,0.05)。表1各组大鼠血清IL
1、TNF α含量比较统计方法:
方差分析;
?,,,.,,,
?,,,.,1,与正常对照组比较;
?,,,.,5,与模型组比较 。