金银花检验方法验证方案

金银花检验方法验证 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 本品为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花。夏初花开放前采收，干燥。 性状 本品呈棒状，上粗下细，略弯曲，长2,3cm，上部直径约3mm，下部直径约1.5mm。表面黄白色或绿白色(贮久色渐深)，密被短柔毛。偶见叶状苞片。花萼绿色，先端5裂，裂片有毛，长约2mm。开放者花冠筒状，先端二唇形;雄蕊5，附于筒壁，黄色;雌蕊1，子房无毛。气清香，味淡、徼苦。 鉴别 取本品粉末0.2g，加甲醇5ml，放置12小时，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录? B)试验，吸取供试品溶液10,20μl、对照品溶液lOμl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 检查 水分 不得过12.0%(附录?H 第二法)。 总灰分 不得过10. 0%(附录?K)。 酸不溶性灰分 不得过3(O%(附录?K)。 重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录?B原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法)测定，铅不得过百万分之五;镉不得过千万分之三;砷不得过百万分之二;汞不得过千万分之二;铜不得过百万分之二十。 含量测定 绿原酸 照高效液相色谱法(附录?D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.4%磷酸溶液(13:87)为流动相;检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。 对照品溶滚的制备 取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每Iml含40μg的溶液，即得(10?以下保存)。 供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率30kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50% 甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5,lOμl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含绿原酸(CH0)不得少于1.5%。 l6189 木犀草苷 照高效液相色谱法(附录?D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4.6mm ×250mm,5pm)，以乙腈为流动相A，以o(5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0,15 10?20 90?80 15,30 20 80 30,40 20?30 80?70 对照品溶液的制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品细粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10弘l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含木犀草苷(CHO)不得少于0.050%。 212011 四、验证小组成员及职责 4.1验证小组成员 4.2人员职责 表1: 人 员 职 责 组织相关的验证培训;负责起草验证方案、组织项目的具体验证、督促 验证小组组长 验证小组成员按照验证方案的要求做好验证记录;起草并完成验证报告， 对整个验证项目负责。 按照方案实施验证、并做好记录、意外情况及时汇报和记录、协助起草 验证小组成员 验证方案和报告。 五、验证实施步骤 5.1、为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施 5.2仪器:己经过校正并在有效期内 5.3人员:均经过培训，熟悉方法及使用的仪器 5.4对照品:均购自药品检验所 5.5材料:均符合检验要求 5.6参考资料: 《中国药典》2010年版一部 《药品生产验证指南》(2003版) 检测结果: 表 检验结果 结果判断 试验A 试验B 检测人: 检测日期: 5.7 验证标准:试验A供试品溶液在与对照药材溶液及对照品溶液相同的位置显相同颜色的斑点。试验B供试品溶液在与对照品溶液相同的位置未显斑点。 5.8 检验结果评价 六 含量测定 照高效液相色谱法测定。 仪器:LC-10AT液相色谱仪 6.1空白溶液的制备: 直接取甲醇作为空白溶液。 6.2将结果填入下表。 表 含量测定专属性试验表 保留时间 供试品溶液 对照品溶液 空白溶液 检测人: 检测日期: 6.3验证标准:供试品溶液中应呈现与木犀草苷对照品保留时间相同的色谱峰;空白溶液中在这点应无色谱峰。 6.4结果评价 以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。将结果填入下表。 表 木犀草苷不同浓度的峰面积 浓度(mg/ml) 峰面积(μv*sec) 回归方程 相关系数 检测人: 检测日期: 6.5结果评价 6.6准确度 6.7 色谱条件与系统适用性试验 用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4.6mm×250mm,5pm)，以乙腈为流动相A，以o(5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0,15 10?20 90?80 15,30 20 80 30,40 20?30 80?70 6.8 对照品溶液的制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。 6.9供试品溶液的制备 取本品细粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10Ml，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含木犀草苷(CHO)不得少于0.050%。 212011 A，nA，25TTT实测值(mg/g),f，,f，WWTT 实测值,供试品所含被测成分量回收率%,，100% 加入对照品量 式中f为对照品的浓度除以对照品峰面积得到的值的平均值; A为对照品峰面积;单位μv*sec ; T n为供试品的稀释倍数; , W为供试品的称量;单位g。 T 6.11 计算结果填入下表: 表5 含量测定木犀草苷加样回收率试验表 样品中木犀序样品称量对照品加回收率回收率的平RSD草苷含量实测值(mg) 号 (g) 入量(mg) (%) 均值(,) (%) (mg) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 检测人: 检测日期: 6.12 结果评价 七 精密度 7.1重复性(设操作人员A) 7.1.1色谱条件与系统适用性试验 用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4.6mm×250mm,5pm)，以乙腈为流动相A，以o(5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0,15 10?20 90?80 15,30 20 80 30,40 20?30 80?70 7.1.2对照品溶液的制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。 7.1.3供试品溶液的制备 取本品细粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10Ml，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含木犀草苷(CHO)不得少于0.050%。 212011 7.1.4计算 A，nA，25TTT含量(mg/g),f，,f， WWTT 式中f为对照品的浓度除以对照品峰面积得到的值的平均值; A为对照品峰面积;单位μv*sec ; T n为供试品的稀释倍数; , W为供试品的称量;单位g。 T 7.1.5将计算的结果填入下表 表 含量测定木犀草苷重复性试验表 序号 样品称量(g) 含量(g/g) 含量的平均值(g/g) RSD(%) 1 2 3 4 5 6 检测人: 检测日期: 7.1.6结果评价 7.2中间精密度(换一时间，换一操作人员，设操作人员为B) 7.2.1色谱条件与系统适用性试验 用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4.6mm×250mm,5pm)，以乙腈为流动相A，以o(5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0,15 10?20 90?80 15,30 20 80 30,40 20?30 80?70 7.2.2对照品溶液的制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。 7.2.3供试品溶液的制备 取本品细粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10Ml，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含木犀草苷(CHO)不得少于0.050%。 212011 7.2.4计算 A，nA，25TTT含量(mg/g),f，,f， WWTT 式中f为对照品的浓度除以对照品峰面积得到的值的平均值; A为对照品峰面积;单位μv*sec ; T n为供试品的稀释倍数; , W为供试品的称量;单位g。 T 7.2.5将计算的结果填入下表 表: 含量测定木犀草苷中间精密度试验表 序号 样品称量(g) 含量(g/g) 含量的平均值(g/g) RSD(%) 1 2 3 操作员A 4 5 6 1 2 3 操作员B 4 5 6 检测人: 检测日期: 7.2.6结果评价 八 耐用性 8.1以流动相的组成比例、同一规格的色谱柱为变动因素，得出测定结果不受影响的程度，为使方法用于常规检验提供依据。 8.2色谱条件与系统适用性试验 用苯基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-phenyl 4.6mm×250mm,5pm)，以乙腈为流动相A，以o(5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0,15 10?20 90?80 15,30 20 80 30,40 20?30 80?70 8.3对照品溶液的制备 取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。 8.4供试品溶液的制备 取本品细粉末(过四号筛)约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转 乙醇至刻度，即得。 移至5ml量瓶中，加70% 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10Ml，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含木犀草苷(CHO)不得少于0.050%。 212011 8.5 将数据整理，填入下表。 表 含量测定耐用性试验表 保留时间 分离度 理论板数 色谱条件1 ? 色谱条件2 ? 检测人: 检测日期: 8.6结果评价 九、验证的结果评价及建议 十、再验证周期:质量部门根据验证结果确定再验证周期