【doc】食品中呋虫胺残留量的HPLC-MS／MS检测方法研究

【doc】食品中呋虫胺残留量的HPLC-MS／MS检测 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 研究 食品中呋虫胺残留量的HPLC-MS,MS检 测方法研究 538200&Vo1.29,No.11食品科学※分析检测 食品中呋虫胺残留量的HPLC-MS/MS 检测方法研究 李立,付建,初玉圣:,娄喜山,王杰z (1.中国检验检疫科学研究院,北京100123;2.龙大食品集团有限公司,山东烟台 264001) 摘要:用液相色谱.质谱/质谱法测定食品中呋虫胺残留量.样品用乙腈提取,提取液 加入无水硫酸钠脱水后, 用石墨化非多孔I碳楹Envi—Carb)/酰胺丙基甲硅烷基化硅胶柱(LC-NH2)净化, 液相色谱.质谱/质谱法测定,外标法 定量.测定方法在测量范围内具有良好的线性关系(r>0.999),测定的回收率范围 为67%~90%,检出限为10ktg/kg, 相对 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 偏差为3.15%~8.36%. 关键词:液相色谱.质谱/质谱法;食品;呋虫胺:测定 DeterminationofDinotefuranResidueinFoodswithHPLC.MS/MS LILi,FUJian,CHUYu-sheng,LOUXi-shan,WANGJie (1.ChineseAcademyInspectionandQuarantineBureau,Beijing100123,China 2.LongdaFoodstaffCo.Ltd.,Yantai264001,China) Abstract:AHPLC— MS/MSmethodwasdevelopedtodeterminethedinotefumnresidueinfoods.Thetestsample Wasextracted withacetonitrile,andthentheextractwasdehydratedwithanhydroussodiumsulfate.Aftercl eanedupwithEnvi-Carb/LC—NI-h cartridgeandCl8solid-phaseextractioncartridge.theanalytewasdeterminedwithLC— MS/MSusingexternalstandardmethod. Thismethodhasgoodlinearcorrelation(.999)withrecoveryrateranges67%to90%,detectio nlimit10txg/kg,andrel~ive standarddevi~ionrRSD)3.15%to8.36%. Keywords:HPLC.MS/MS;food;dinotefuran;determination 中图分类号:0657.63文献标识码:A文章编号:1002.6630(2008)I1-0538—03 呋虫胺(dinotefuran)为日本三井化学公司开发的第三 代烟碱类杀虫剂.其与现有的烟碱类杀虫剂的化学结构 可谓大相径庭,它的四氢呋喃基取代了以前的氯代吡啶 基,氯代噻唑基,并不含卤族元素.同时,在性能 方面也与烟碱有所不同.故而,目前人们将其称为"呋 喃烟碱"[1】. II /N\ \//jL\/\ 该药剂杀虫谱广,具有卓越的内吸渗透作用, 在很低的剂量即显示了很高的杀虫活性.该药剂对哺乳 动物,鸟类及水生生物十分安全,对作物无药害,可 用于水稻,果树,蔬菜等众多作物.呋虫胺主要作用 于昆虫神经传递系统,使害虫引起麻痹从而发挥杀虫作 用,呋虫胺作为一种新型的杀虫剂已经在我国广泛应 用,但该项目现没有相应的检测标准.本实验采用液 相色谱.质谱/质谱法测定食品中呋虫胺残留量,方法 简便,满足日常的检测工作需要. 1材料与方法 1.1试剂 呋虫胺标准物质,纯度大于等于98%,用丙酮一正 己烷f1:1,v/v)~O成1.0mg/ml的标准储备液,0~4~C 保存. 并乙腈(色谱纯);正己烷(色谱纯):丙酮(色谱纯); 收稿日期:2008—06.20 作者简介:李立(1968.),女,高级工程师,本科,研究方向为食品检验与检 测.E-mail:ytciqli@163.com ※分析检测良品科学200&VoL29,No.11539 乙醚(色谱纯).氯化钠(优级纯).无水硫酸钠(分析纯, 650?灼烧4h,自然冷却后贮于密封瓶中备用);磷酸 氢二钾(分析纯);磷酸二氢钾(分析纯);氢氧化钠(分析 纯,配制成lmol/L的溶液);盐酸(优级纯,配制成lmol/L 的溶液).正己烷饱和的已睛;丙酮.正己烷(1:1,V/ V);0.5mol/L磷酸缓冲液(pH7.0) 1.2仪器与设备 液相色谱.质谱/质谱联用仪(配备电喷雾离子源. ESI振荡器;漩涡混合器;旋转蒸发仪;高速均质 器(10000r/min);离心机;离心管(100m1);分液漏斗 (250ml,150m1);粮谷粉碎机;食品捣碎机;花生粉碎机. l_3测定条件 1.3.1液相色谱条件 色谱柱:WatersAcquityUplcBEHC81.7m;流动 相:水,乙腈梯度( 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1);柱温:30?;流速:0.2ml/min; 进样量:l0ul. 表1流动相梯度 Table1Gradientofmobilephase 1.3.2质谱条件 电离方式:ESI;毛细管电压:3.0kV;源温度: 120?:去溶剂温度:350~C;锥孔气流:氮气,50L/h: 去溶剂气流:氮气,600L/h;碰撞气压:氩气,3.10 ×10Pa;监测模式:多反应监测. 1.3_3多反应监测条件【2】 检测条件见表2. 表2多反应监测条件 Table2Conditionsofmultiplereactionmonitoring 注:+.该离子用于定量. 1.4分析步骤 1.4.1提取【3】 1.4.1.1小麦,玉米,花生 称取5g试样(精确至0.01g)于100ml离心管中,加 20ml水,放置5min.加30ml乙腈,于l0000r/min均 质提取1min,离心3rain,提取液过滤至250m1分液漏 斗中,残留物再用20ml乙腈重复提取一次.合并提取 液于分液漏斗中,依次加入20g氯化钠和60ml磷酸缓冲 液,振摇3min.静置后,弃去水层.乙腈层加入5g 无水硫酸钠脱水后于40?旋转浓缩至近干. 1.4.1.2水果,蔬菜 称取10g试样(精确至O.Olg)于100ml离心管中,加 30ml乙腈,于lO000r/min均质提取1min,离心3min, 提取液过滤至250m1分液漏斗中,残留物再用20ml乙腈 重复提取一次.合并提取液于分液漏斗中,依次加入 20g氯化钠和60ml磷酸缓冲液,振摇3rain.静置后, 弃去水层.乙腈层加入5g无水硫酸钠脱水后于40?旋 转浓缩至近干. 1_4.1-3鱼,肉 称取10g试样(精确至O.01g)于100ml离心管中,加 30ml乙腈,漩涡混合均匀后于超声波中提取15min,离 心3min,提取液过滤至250m1分液漏斗中,残留物再 用20ml乙腈重复提取一次.合并提取液于分液漏斗中, 依次加入20g氯化钠和60ml磷酸缓冲液,振摇3min.静 置后,弃去水层.乙腈层加入5g无水硫酸钠脱水后于 40?旋转浓缩至近干. 1.4.2净化 1.4.2.1小麦,玉米,花生,鱼,肉 提取物用20ml正己烷溶解残留物,转入150m1分液 漏斗中,分别用20ml正己烷饱和乙腈对溶解液萃取2 次,取下层溶液合并萃取液,40?减压浓缩干,加入 2ml乙腈溶解. 用10ml乙腈预淋洗Envi-carb/LC-NH2(500mg/500mg1 小柱,弃去流出液.注入上述所得溶液,再用20ml乙 腈淋洗,收集洗脱液,于40?旋转浓缩至近干,残留 物用乙腈溶解,定容至2.Oml,过0,21,tm滤膜,供液相 色谱.质谱/质谱测定. 1.4.2.2蔬菜,水果 用10ml乙腈预淋洗Envi-carb/LC—NH2(500mg/500mg) 小柱,弃去流出液.注入上述所得溶液,再用20ml乙 腈淋洗,收集洗脱液,于40?旋转浓缩至近干,残留 物用2.0ml乙腈溶解,过O.2p.m滤膜,供液相色谱.质 谱/质谱测定. 2结果与分析 2.1前处理条件的选择 因呋虫胺的极性较强,采用乙腈和乙酸乙酯作为提 取溶剂,通过做添加回收实验,发现结果显示乙酸乙 酯法回收平行性不好,提取效果较差,所以选用乙腈 作为提取溶剂,加入氯化钠盐析脱水后浓缩,干制品 则需加入适量水浸润. 2.2净化条件的选择 SPE柱及洗脱液的选择:Envi.carb柱对叶绿素及较 5402008,Vof.29,No.11食品科学※分析检测 大悬浮颗粒的净化效果较好,而NH2柱对样品中的有机 酸类的净化效果明显,所以我们采用Envi.carb/NH2柱串 接的方法来净化样品.通过改变洗脱液的种类和比例 『乙腈,甲苯+乙腈=1:3(V/V),甲苯+乙腈=1:1(v/v)】, 发现纯乙腈洗脱回收率高,平行性好,所以最终采用 乙腈做为SPE柱的洗脱液. 2_3仪器条件的选择【】 因呋虫胺易分解,不易气化,因此采用高效液相 色谱HPLC或高效液相液相色谱串联质谱HPLC/MS.MS 进行检测,考虑到方法灵敏度的问题,选择了HPLC/ MS.MS作为检测仪器.在建立液相分离条件时发现呋 虫胺出峰时间较早,难以和杂质分离.受基质干扰比 较严重,通过改变色谱柱类型(Cl8,C8,Hillic等1和流 动相(乙腈.水,甲醇.水,乙腈.2mmol乙酸胺水等)及 流动相比例,最终确立了采用cs色谱柱,在起始梯度 洗脱乙腈:水(40:60)时,呋虫胺受基质干扰较小(图2). 100 80 — 6O 婪40 2O O l00 . 商60 甚4o 20 O O.1O0200300.400500.600.700.80O.901.001.1O 时间(min) 0.1OO20O.30O.4on5OO-加0.700.800.9O1.0o1.10 时间(rain) 图2呋虫胺液相色谱一质谱/质谱多反应监测色谱图 Fig.2HPLCfMS—MSchromatogramofdinotefuranstandard 2-4方法的线性及检出限 配制呋虫胺的标准浓度分别为1O,20,50,10o,200, 500,1O00~g/L.以本标准的测试条件,进样2ul进行测 定,用峰面积对标准溶液中被测组分作图,目标物在 检测范围内均呈线性关系,线性方程和相关系数为Y= 667.314X+1200.67相关系数为0.999.标准曲线见图3. 600000 400O00 200000 浓度(g,L) 图3呋虫胺标准曲线 Fig.3Standardcurveofdinotefurane 当信噪比为3时,HPLC.MS/MS法检出限为10~tg/kg. 2.5方法的回收率和精密度 用不含呋虫胺的蔬菜(菠菜,胡萝卜),水果类(苹 果,菠萝),粮食谷物,坚果类(玉米,小麦,花生), 调味品(紫苏叶),猪肉及马哈鱼等不同种类的样品分别 做添加回收率和精密度实验,样品添加不同浓度标准 后,按本方法进行提取,净化和测定,结果见表3. 检测结果表明:呋虫胺的平均回收率均在67%~90%之 间,变异系数在3.15%,8.36%. 表3回收率及精密度实验 Table3Resultsofrecoveryandprecisionexperiments 品名添加浓度(测定值(g,k平均回收率)变异系数( 3结论 本研究建立了一种简单快速高效的用液相色谱质谱/ 质谱联用法检测食品中的呋虫胺残留量的方法,采用适 当的净化方式,有效去除杂质干扰,达到较高的灵敏 度准确度和精密度,适宜在日常检测中应用. 参考文献: 【l】张亦冰.新内吸杀虫剂.呋虫胺【J1.世界农药,2003,25(5):46—47. [2】GB19648--2005水果和蔬菜中446种农药多残留量测定方法一气 相色谱.质谱和液相色谱一串联质谱法[s】. [3]3日本食安发第1129002号厚生劳动省医药食品局食品安全部长 通知 关于发布提成方案的通知关于xx通知关于成立公司筹建组的通知关于红头文件的使用公开通知关于计发全勤奖的通知 : 一 齐试验法LC/MS农药等同时检测方法[s]. [4]USEnvironmentalProtectionAgeney(EPA).Dinotefuran;Pesticide Tolerance[DB/OL].r2005-03-23)[2008—06—02].http:llwww.epa.gov/ EPA-PEST/2005/MarclEDay-23/p5620.htm.