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小鼠急性脑缺氧实验.doc

小鼠急性脑缺氧实验

家蔓加油
2017-10-15 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《小鼠急性脑缺氧实验doc》,可适用于综合领域

小鼠急性脑缺氧实验本文通过小鼠急性脑缺氧实验、大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型、对脑血流量影响实验、抑制血小板聚集及血栓形成实验、小鼠不完全脑缺血模型、沙土鼠全脑缺血再灌注损伤等实验和模型分别从扩张脑血管、抑制血小板聚集及血栓形成、抗水肿、抗缺血再灌注损伤、抗自由基和兴奋性氨基酸损伤等角度系统的研究了三七中人参三醇皂苷(PTS)对缺血性脑中风的防治作用及其机制。方法小鼠急性脑缺氧实验小鼠ip给药每天一次共次末次给药后min将小鼠逐只断头立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间作为耐缺氧指标。大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型雄性SD大鼠ip预防给药两次每天一次造模前Ohiv给药次造模后h和hip给药两次。模型建立:分离、结扎右侧颈总动脉参照Berdson法用尼龙线阻断大脑中动脉。造模成功能够存活h的大鼠确定为最后实验对象并进行行为学评分后快速取右脑并切成三片将脑前部用于脑含水量测定中部用于脑梗死面积测定后部用于病理组织学检查。对脑血流量影响实验犬静脉滴注给药分别在给药前和给药后、、、、、以及min测定平均动脉血压(MAP)、心率(HR)、脑血流量(CBF)和脑血管阻力(CVR)等指标。(抑制血小板聚集及血栓形成实验抑制血小板聚集:大鼠ip给药共次每天次。于末次给药min后分别自颈总动脉放血在血样中加入μl已稀释的ADP(终浓度为μmol,L)反应min后测定最大聚集度。抑制血栓形成:大鼠经,戊巴比妥钠ip麻醉舌下静脉给药后min分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉。把插入丝线的聚乙烯管的两端分别插入右侧颈总动脉和左侧颈外静脉打开动脉夹开放血液min后中断血流迅速取出聚乙烯管中的血栓在分析天平上称重求出血栓抑制率。(双侧颈总动脉结扎的不完全脑缺血模型给小鼠ip给药共次每天次于末次给药后min麻醉后分离双侧颈总动脉各组经尾静脉注射,伊文思蓝溶液并分别在注射min后结扎双侧颈总动脉。在结扎h后断头取出脑组织称重后测脑组织内伊文思蓝含量并计算脑指数。(沙土鼠全脑缺血再灌注损伤模型采用结扎沙土鼠双侧颈总动脉min再灌注h制备全脑缺血再灌注损伤模型动物随机分成假手术组、模型组、PTSmg,kg组、PTSmg,kg组、PTSmg,kg组和阳性对照药血栓通注射液组。观察造模h后PTS对沙土鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、兴奋性氨基酸及病理组织学的影响。结果(小鼠急性脑缺氧实验结果提示PTS注射液mg,kg以上剂量组给药后均能显著延长小鼠断头喘息时间提示PTS注射液可提高小鼠脑耐急性缺氧的能力以增强对抗脑中风的能力。(大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型实验提示:一定剂量的PTS注射液能改善MCAO大鼠的偏瘫体征缩小脑内梗死面积减轻脑水肿和神经元细胞的继发性损害对MCAO大鼠具有良好的防治作用。(脑血流量实验表明:mg,kg、mg,kg和mg,kg剂量的PTS注射液在给药后分钟内均能明显降低犬脑血管阻力使脑血流量显著增加而对血压无明显影响对心率影响也不明显机制可能与扩张脑血管有关。(抑制血小板聚集及血栓形成实验提示mg,kg和mg,kg剂量的PTS注射液对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用且随着剂量的增大抑制作用逐渐增强抗血栓形成实验提示PTS注射液各剂量组能明显抑制大鼠血栓形成。(小鼠双侧颈总动脉结扎不完全脑缺血模型实验表明:与模型组比较PTS注射液各组脑指数和脑伊文思蓝含量显著降低提示一定剂量的PTS注射液可以抑制小鼠脑缺血引起的脑血管通透性增加从而降低脑指数减轻脑水肿。(PTS对沙土鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用组织病理学检查表明同模型组比较PTS中、高剂量组对沙土鼠脑缺血再灌注致脑组织和神经细胞的病理损伤有较好的改善作用。脑缺血再灌注小时后沙土鼠脑组织SOD活性明显降低MDA含量明显提高与假手术相比较均有显著性差异。PTS给药组的SOD活性与与模型组相比显著升高MDA含量与模型组相比显著降低提示PTS对沙土鼠全脑缺血再灌脑组织的自由基损伤有明显保护作用。造模后模型组Gu和Asp明显升高PTS各组升高值明显低于模型组提示PTS可抑制兴奋性氨基酸的释放保护脑神经细胞。结论综合以上分析结果提示一定剂量的PTS对缺血性脑中风有明显的防治作用其作用机制可能是扩张脑血管、抑制血小板聚集及血栓形成、减轻脑水肿以恢复脑血流的供应以及抵抗自由基和兴奋性氨基酸损伤以保护脑神经细胞。

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