离子液体顶空单滴微萃取分析中药中的高沸点挥发性成分_20993

离子液体顶空单滴微萃取 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 中药中的高沸点挥发性成分_20993 离子液体顶空单滴微萃取分析中药中的高沸点挥发性成分 [标签:来源] 【摘要】 并用于复方鲜竹沥液中愈创木酚的含量的测定。采用改进的悬滴装置，增大了液滴与微量进样器针尖处塑料套管的接触面积，使离子液体的液滴达12 μL，提高了液滴的稳定性及方法的灵敏度。考察并优化了影响萃取的因素，确定了萃取条件:以12 μL 13咪唑基六氟磷酸盐([PF6])为悬滴，在5 mL含36%(w/V)NaCl的样品溶液中，萃取温度80 ?、搅拌速度1000 r/min的条件下，顶空萃取30 min，萃取后直接将液滴吸回微量进样器，进行HPLC检测。愈创木酚在0.05,1.6 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9997); 检出限为0.39 μg/L，愈创木酚的加样回收率为97.6%，RSD为2.5%。本方法操作简单、定量准确，样品前处理简单，成本低，无污染。 【关键词】 离子液体; 顶空单滴微萃取; 高沸点挥发性成分; 复方鲜竹沥液; 愈创木酚 1 引 言 分析中药及其制剂中常含有的一些具有重要活性的挥发性成分，常需采用一定的样品前处理方法进行提取分离及纯化，再用色谱法测定。传统的提取方法[1]有溶剂萃取法、水蒸气蒸馏法、挥发油提取法和超声萃取法等。另外还有一些新方法，如顶空气相色谱法[2]和固相微萃取技术[3]等。但这些方法均存在一些缺点，如挥发油提取法中有机溶剂用量大，提取时间长，操作步骤繁杂，易造成挥发性成分的损失等;固相微萃取则存在探头寿命短，成本较高，交叉污染等问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 。单滴微萃取(SDME)[4]是近年来发展起来的一种萃取装置简单、成本低、溶剂用量少、操作简便快速的样品前处理技术，与色谱技术联用方便，应用广泛。但SDME也存在如萃取溶剂多为有机溶剂， 萃取液滴体积小， 易挥发， 不易高温萃取， 萃取维持时间短等缺点。 离子液体是一种新型溶剂，具有非挥发性、热稳定性强、粘度和密度大等特点[5,7]，用作SDME的萃取剂，避免了传统有机溶剂易挥发，萃取液滴体积小，不易长时间高温萃取等缺点。Manzoori等[8]将SDME的微量进样器针头处的塑料套管下端用热的铜线烫出4个凹槽，使离子液体[C4MIM][PF6]液滴增大到7 μL，用于水样和食物中Pb的测定。本研究进一步改进了悬滴装置，将微量进样器下端的塑料套管用火烧制成一端凸起的圆饼状，增大了悬挂的离子液体与套管的接触面积，将液滴[PF6]增加至12 μL，提高了液滴的稳定性及方法的灵敏度， 顶空单滴微萃取可在高温下较长时间地悬挂较大体积的液滴。利用所建的离子液体顶 空单滴微萃取液相色谱法测定了复方鲜竹沥液[9]中高沸点的有效成分愈创木酚的含量，避免了采用繁琐费时的挥发油提取法或传统的溶剂(乙醚)萃取法[10,12]，操作简单快速，可直接进样分析测定，结果准确，环境友好。改进的离子液体顶空单滴微萃取方法有望应用于药物中的高沸点挥发性成分的测定。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 Series 200 LC pump高效液相色谱仪(PERKIN ELMER公司)，UV检测器(Applied Biosystems 785A);HW2000色谱工作站(上海千谱软件有限公司);DF器(金坊市富华仪器有限公司);MICROLITER#702微量进样器(25 μL，美国Hamilton公司);圆柱形样品瓶(6.4 cm×1.6 cm);圆柱形搅拌子(1.0 cm×0.5 cm)。 愈创木酚(批号:111510200502，中国药品生物制品检定所);复方鲜竹沥液(批号:0901004，0903021，0904029，江西汇仁药业有限公司);13 盐([PF6]，上海成捷化学有限公司);冰醋酸(天津市北宏试剂厂)。甲醇为色谱纯，水为重蒸水。 2.2 顶空单滴微萃取(HSSDME) 顶空单滴微萃取装置如图1。微量进样器下端的塑料套管(0.6 mm i.d，1 mm o.d)烧制成一端凸起的圆饼状(3.5 mm o.d)，以增大悬挂的离子液体与套管的接触面积，从而增大液滴体积及其稳定性。 图1 顶空单滴微萃取装置示意图 取1.8 g NaCl，5 mL样品液及搅拌子放入带聚四氟乙烯塞的样品瓶中，用25 μL微量进样器精密吸取12 μL [PF6]，穿透聚四氟乙烯塞后，在进样器针头装上改进后的塑料套管，密封。将离子液体轻轻推出，使其在距液面1 cm处形成液滴，在萃取温度80 ?、搅拌速度1000 r/min的条件下，顶空萃取30 min，萃取后直接将液滴吸回，进样HPLC分析检测。 2.3 色谱条件 Kromasil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm， 5 μm)。流动相:1%(70?30, V/V);流速:1.0 mL/min;检测波长:274 nm;柱温:室温。 2.4 对照品溶液和供试品溶液的配制 准确称取愈创木酚对照品约10 mg于1000 mL容量瓶中，加水溶解并定容，配制成10.08 mg/L愈创木酚的对照品储备液。精密量取对照品储备液5 mL于10 mL容量瓶中，加水稀释并定容，得对照品溶液。 准确移取复方鲜竹沥液1 mL于50 mL容量瓶中，加水溶解并定容，得供试品溶液。 3 结果与讨论 3.1 顶空微萃取条件的优化 3.1.1 液滴体积与搅拌速度的影响 在参考文献[13,15]的基础上，本实验选择常用的离子液体[BMIM][PF6]为萃取剂。在萃取剂体积为5，8，10，11和12 μL、萃取温度80 ?、搅拌速度1000 r/min、36% NaCl的条件下，顶空萃取30 min，最后将液滴吸回，进行HPLC分析，记录愈创木酚的峰面积。结果表明，随着液滴体积的增大，[PF6]对愈创木酚的萃取效率也增大，但液滴在12 μL时， 萃取完成后由于液滴上附着的水蒸汽使液滴的体积已达到16 μL， 继续增大液滴的体积，液滴的稳定性不能得到保证，为保证较高的提取率及液滴的稳定性，最终选择[PF6]为12 μL。 以12 μL [PF6]为萃取剂，在上述条件下，考察了搅拌速度(250，500，750，1000和1250 r/min)对愈创木酚的萃取效率的影响。结果表明，随着搅拌速度的增加，愈创木酚的萃取效率越高，但在1000 r/min已基本达到萃取平衡，最终选择1000 r/min为理想的搅拌速度。 3.1.2 萃取温度与时间的影响 本实验在以12 μL [PF6]为萃取剂， 36%NaCl，搅拌速率1000 r/min的条件下，考察了温度分别在30，50，60，70和80 ?时， 顶空萃取30 min后萃取愈创木酚的量。结果表明，随温度的提高，愈创木酚提取量不断增大，这可能与其沸点高，在高温下才能挥发并从基质中释放有关，但温度过高会引起离子液体的粘度和体积的变化，而且水浴的温度过高，水蒸汽会附着在液滴上增大其体积，影响液滴的稳定性，故最终萃取温度选择为80 ?。 在上述的条件下，考察了萃取时间15，20，25，30和35 min时愈创木酚的提取量。结果表明，在25 min前，愈创木酚的峰面积随着萃取时间的延长而增大，但30 min时的峰面积与25 min时的基本相同，说明萃取已基本达到平衡，萃取时间最终选择为30 min。 3.1.3 NaCl浓度的影响 盐析作用在HSSDME中，会导致待测物在基质水中的溶解度下降，促使其进入气相，进而加快萃取平衡，提高萃取效率。本实验在已确立的优化条件下，考察了不同盐浓度0%， 10%， 20%， 30%和36%对萃取愈创木酚的影响。结果表明，愈创木酚的提取量随盐的浓度提高而增大，而36% NaCl溶液已饱和，不能继续增加， NaCl的浓度最终选择为36%。 3.2 方法的适用性及专属性 对照品溶液和供试品溶液按2.2节的方法分别处理后，进样测定，记录色谱图(图2)。愈创木酚与其它成分的分离良好，分离度均大于1.5，理论塔板数大于5000。实验结果表明，系统的适用性及专属性良好。 图2 对照品(A)和供试品(B)的HPLC图 Fig.2 HPLC chromatograms of reference substance (A) and sample solution (B) 1. 愈创木酚(Guaiacol)。3.3 线性范围及检出限 分别准确量取对照品溶液3.2，1.6，0.8，0.4，0.2和0.1 mL于10 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，制得系列标准溶液。按2.2节方法处理后进样测定。以愈创木酚峰面积A为纵坐标，浓度c(mg/L)为横坐标，得回归方程A=1.67×106c+3.34×105(r=0.9997)。结果表明，愈创木酚在0.05,1.6 mg/L浓度范围内线性关系良好。取线性最低点对照品溶液依次对倍稀释，按2.2节方法处理后进样测定，按S/N=3计算得愈创木酚的检出限为0.39 μg/L。 3.4 重复性和稳定性 取同一批号(批号0904029)的复方鲜竹沥液，按2.4节制备6份供试品溶液，分别按2.2节方法处理后进样测定，愈创木酚含量的RSD为1.4%。 取同一批号(批号0904029)的复方鲜竹沥液，按2.5节制备供试品溶液，于0， 2， 4， 8， 12和24 h按2.2节方法处理后进样测定，愈创木酚色谱峰峰面积的RSD为2.1%，表明样品在24 h内稳定。 3.5 加标回收率和样品测定表1 复方鲜竹沥液中愈创木酚的含量(n=3)准确量取6份已知愈创木酚含量的同一批样品(批号:0904029)2.5 mL及愈创木酚对照品溶液2.5 mL于样品瓶中，按2.2节方法处理后进样测定，加标回收率为97.6%，RSD为2.5%。 按2.4节方法制备3批供试品溶液，按2.2节方法处理后进样测定，记录色谱图(图2B)。计算复方鲜竹沥液中愈创木酚的含量，测定结果见表1。 【参考文献】 1 LI XiaoRui(李晓瑞), LI FengQin(李奉勤), XUE YanZhao(薛彦朝), SHI DongXia(史冬霞), MA Jing(马 静). 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