二氢卟吩e4的光敏性质探究1
二氢卟吩e4的光敏性质探究
光敏剂的光漂白(photobleaching)是指在光的照射下，光敏剂所激发出来的荧光强度随着时间推移逐步减弱乃至消失的现象，这是光动力诊断临床应用中考虑光剂量和检测需用时间的一个重要因素。
实验意义:探究不同浓度的二氢卟吩e4在不同光源、不同时间的照射下，其吸光度随时间的变化，探测其光漂白特性，为更好地在临床应用上要保持光敏剂的有效杀伤浓度，且控制好光敏剂的激发时间，这样才能保证治疗的效果。
初步设想:
探究二氢卟吩e4在不同浓度，不同光源，不同光照时间对光的敏感性
(1)实验设置了不同的六组光源:660nm、254nm、紫外光、黄光、365nm、白光，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
(2)先后用不同光源在暗室中对不同浓度的二氢卟吩e4待测样品(2 mg/ml，1.5 mg/ml，1 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml)进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，光谱变化
表
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明了光敏剂二氢卟吩e4明显的光漂白特性。
(3)另外，关于温度和pH值的影响关系实验，视实验室中的仪器而定。
仪器药品:SH IMADZU 生产的UV 22201 spectrophotometer (UV 22201 岛津分光光度计)、660nm红外灯、紫外灯(20W，波长接近400nm)、罩灯的纸箱、插座、移液枪、石英比色皿、蒸馏水、擦镜纸、烧杯、4ml一次性试管(8支)、标签纸、二氢卟吩e4(2 mg/ml，1.5 mg/ml，1 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml)
实验所需的药品预先配制好，配好的药品盛装在棕色细颈玻璃瓶中, 避光低温保存在冰箱冷藏室。
实验步骤:
二氢卟吩e4的光敏性质实验
1. 待测二氢卟吩e4溶液的配制
? 2mg/ml二氢卟吩e4溶液:
称取40mg 二氢卟吩e4，滴加氢氧化钠溶液至二氢卟吩e4完全溶解，再加入HCl，使pH至7.5，用去离子水定容至20ml;
1.5mg/ml 二氢卟吩e4溶液: ?
移取7.5ml ?号溶液，用去离子水定容至10ml;
? 1.0mg/ml 二氢卟吩e4溶液
移取5ml ?号溶液，用去离子水定容至10ml;
? 0.5mg/ml二氢卟吩e4溶液
移取2.5ml ?号溶液，用去离子水定容至10ml;
? 0.1mg/ml二氢卟吩e4溶液
移取0.5ml ?号溶液，用去离子水定容至10ml;
? 0.05mg/ml二氢卟吩e4溶液
移取0.05ml ?号溶液，用去离子水定容至10ml;
2. 光照实验
(1)选取1.0mg/ml 二氢卟吩e4溶液，在测量溶液0分钟光照时的紫外吸收光谱，先找出最高吸收峰值对应的吸收波长，根据光敏剂的光源选择原理，再选取了符合波长的光源作为激发光源。在激发光源一致的条件下，再进行不同光敏物质的分组照射及紫外吸收光谱检测。附注:样品在402nm(S带)和652nm(Q带)处有两个特征吸收峰，尽管二氢卟吩e4的长波吸收在652nm，目前的分析工作仍在S带进行检测。选择S带波长是因为在S带检测有较高的灵敏性，物质在S带的吸收强度是Q带的3倍。另外，二氢卟吩e4样品中潜在的一系列杂质(大多数卟啉环结构的物质)在650nm也有强吸收。因此选定400nm为二氢卟吩e4的检测波长。
随着溶液浓度的增大，二氢卟吩e4在可见光区的吸收也增大，但是吸收带的形状没有发生变化。不管是在高浓度还是在低浓度下，除了吸收强度有所变化
外，吸收峰的相对大小和位置没有变化，也没有出现新的吸收带。说明在不同浓度溶液中二氢卟吩e4均以单体形式存在。故实验只选取了1.0mg/ml 二氢卟吩e4溶液做波长检测。
(2)对刚配制好的各浓度二氢卟吩e4溶液进行紫外-可见吸收光谱的检测，分析二氢卟吩e4的光谱特性及浓度对二氢卟吩e4吸收光谱的影响。
(2.1)采用波长为660nm的光源在暗室中对待测样品(二氢卟吩e42 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml)进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，每次照射后取适量溶液进行紫外-可见吸收光谱的检测，分析二氢卟吩e4的光漂白特性。
(2.2)用波长254nm分别把二氢卟吩e4的2 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml各自进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
(2.3)用紫外光分别把二氢卟吩e4的2 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml各自进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
(2.4)用黄光分别把二氢卟吩e4的2 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml各自进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
(2.5)用365nm分别把二氢卟吩e4的2 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml各自进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、80min、100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
(2.6)用白光分别把二氢卟吩e4的2 mg/ml，1 mg/ml ，1.5 mg/ml，0.5 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml各自进行10min、20min、30min、40min、50min、60min、
100min时间的垂直照射，取照射后的各样品进行紫外-可见吸收光谱的80min、
检测，在同种物质、时间间隔一样(10min)的条件下进行了对比实验。
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