实验十七血清尿素氮的测定

实验十七血清尿素氮的测定实验十七血清尿素氮的测定本文档由无尘大哥上传至豆丁网实验十四血清无机磷的测定【原理】用三氯醋酸沉淀血清之蛋白质，于其无蛋白滤液中加入钼酸试剂后，与血清的无机磷结合生成磷钼酸，再用氯化亚锡将磷钼酸还原成蓝色的钼蓝，其蓝色之深浅与血清无机磷的含量成正比。与同样处理的磷标准溶液比色后，通过计算即求出血清无机磷的含量。【试剂】 1、10%三氯醋酸。 2、磷标准溶液（每毫升0.8微克）。 3、钼酸试剂。 4、氯化亚锡溶液。【操作】 1、取小三角瓶一个，加入血清0.2ml，10%...

实验十七血清尿素氮的测定本文档由无尘大哥上传至豆丁网实验十四血清无机磷的测定【原理】用三氯醋酸沉淀血清之蛋白质，于其无蛋白滤液中加入钼酸试剂后，与血清的无机磷结合生成磷钼酸，再用氯化亚锡将磷钼酸还原成蓝色的钼蓝，其蓝色之深浅与血清无机磷的含量成正比。与同样处理的磷标准溶液比色后，通过计算即求出血清无机磷的含量。【试剂】 1、10%三氯醋酸。 2、磷标准溶液（每毫升0.8微克）。 3、钼酸试剂。 4、氯化亚锡溶液。【操作】 1、取小三角瓶一个，加入血清0.2ml，10%三氯醋酸9.8ml，混合后，静置5分钟，过滤，将滤液保留一试管中备用。管号试剂（毫升）1（空白管）2（标准管）3（样品管）血滤液——4.0 蒸馏水4.0—— 磷标准溶液—4.0— 钼酸试剂1.01.01.0氯化亚锡溶液0.50.50.5 2、取三支试管，标明1、2、3号，按前表操作。 3、将各管摇匀后，于室温中静置10分钟，以1号管内溶液作空白，在660nm波长进行比色，记录 2、3号管内溶液的吸光度读数分别为A、A。标样每100毫升血清中无机磷的含量（毫克）正常血清无机磷的含量为3~5毫克/100ml。在甲状旁腺机能减退、维生素D缺乏病时，血清无机磷的含量可降低。在肾功能不全时，可以使血清无机磷的含量升高。故临床上测定血清无机磷含量，有助于有关疾病的诊断。【试剂配法】 1、钼酸试剂：称取5克钼酸铵，溶于10毫升蒸馏水内，再加15毫升浓硫酸，待冷却后，加蒸馏水至100毫升。 2、氯化亚锡溶液：称取2克氯化亚锡溶于5毫升浓盐酸中，保存于棕色瓶内，贮冰箱，此液称为氯化亚锡原液。在每次实验前，取该溶液0.5毫升，用蒸馏水稀释至100毫升。该液贮于冰箱，但只能应用2~3天。 3、无机磷标准液：（1毫升=0.8微克）称取2.194克纯KH2PO4溶于已盛有约100毫升蒸馏水的500毫升的量瓶中，加入10毫升5mol/L硫酸，摇匀，再用蒸馏水稀释至刻度，反复倒转几次摇匀。此液为标准无机磷贮存液，每毫升含磷1毫克。向标准无机磷贮存液中加入氯仿10毫升，用力振荡，使氯仿在贮存液中饱和，如此可防止因细菌的生长而使标准磷的含量下降，取该贮存液0.8毫升用蒸馏水稀释至1000毫升，即配成每毫升含磷0.8微克的标准应用液。【注意事项】 1、血液样品必须新鲜，不能有溶血现象，否则，血球内大量的有机磷进入血清，影响结果，如血液样品久置不分离，血球之中有机磷经酶的作用可变为无机磷，然后通过红血球膜进入血清中，也会导致测定结果过高。 2、用三氯醋酸沉淀蛋白质，滤液呈较强酸性，使磷酸盐不致沉淀，并抑制有机磷化合物的分解。 3、滤纸应先用稀盐酸洗涤，否则滤纸上的磷影响测定结果。 4、氯化亚锡有还原作用（本身不稳定，易被氧化），实验时须临时配制应用液。

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